Page 49 - 《中国药房》2025年18期
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域性差异特征      [8―9] 。因此，探究不同产地草豆蔻的质量                 用甲醇补足减失的质量，取出放置30 min，过滤，过0.22
          差异对保障草豆蔻的质量稳定和用药安全尤为重要。                            μm微孔滤膜，即得。
                                                      [10]
              草豆蔻主要分布于广东、广西、海南、云南等地 ，                        2.2 色谱条件
          由于产地不同，加之市场上其同属近缘药材较为常见，                               以 Agilent 5 TC-C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）为色
          因此该药材面临基原混杂和市场伪品混淆的双重困境。                           谱柱，以甲醇（A）-水（B）为流动相进行梯度洗脱（0～5
          目前，草豆蔻的质量控制研究多聚焦于其挥发性成分分                           min，30%A→55%A；5～10 min，55%A→65%A；10～35
          析上，而对其非挥发性成分的研究较少，故而无法系统                           min，65%A；35～37  min，65%A→74%A；37～50  min，
          反映该药材的品质特征，亦难以确保其内在药效的稳定                           74%A；50～55 min，74%A→95%A）；柱温为 30 ℃；流速
          可控。基于此，本研究采用高效液相色谱（HPLC）法建                         为1.0 mL/min；检测波长为235 nm；进样量为5 μL。
          立18批草豆蔻药材的指纹图谱，并对2020年版《中国药                        2.3 指纹图谱的建立及相似度评价
                                                [2]
          典》规定的草豆蔻药材的 4 个有效成分指标 含量进行                         2.3.1 精密度试验
          测定，从而综合评价不同产地草豆蔻药材的质量差异，                               取草豆蔻药材粉末（编号S1），按“2.1.2”项下方法制备
          以期为该药材的品质鉴别与用药安全提供参考依据。                            供试品溶液，按“2.2”项下色谱条件连续进样分析6次，记
          1 材料                                               录色谱图。以山姜素的色谱峰为参照峰，计算得各共有峰
          1.1 仪器                                             相对保留时间和相对峰面积的RSD分别为0.61%～1.34%
              本研究所用主要仪器包括 Agilent 1100 型 HPLC 仪              和0.69%～1.86%（n均为6），表明该方法精密度良好。
         （美国Agilent公司）、AX224ZH/E型电子分析天平（美国                   2.3.2 稳定性试验
          Ohaus 公司）、PL-S60T 型超声波清洗机（东莞康士洁超                       取按“2.1.2”项下方法制备的同一批草豆蔻药材（编
          声波科技有限公司）等。                                        号 S1）的供试品溶液，分别于室温下放置 0、2、4、8、12、
          1.2 试剂与药材                                          24 h时按“2.2”项下色谱条件进样分析，记录色谱图。以
              山 姜 素 对 照 品（批 号 110762-202407，纯 度 ≥            山姜素的色谱峰为参照峰，计算得各共有峰相对保留时
          99.4%）、乔松素对照品（批号 111829-202404，纯度≥
                                                             间 和 相 对 峰 面 积 的 RSD 分 别 为 0.42%～1.26% 和
          99.9%）、小豆蔻明对照品（批号 110763-202406，纯度≥
                                                             0.52%～2.02%（n 均为 6），表明供试品溶液在室温下放
          97.9%）、桤木酮对照品（批号 111830-202204，纯度≥
                                                             置24 h内稳定。
          98.7%）均购自中国食品药品检定研究院；甲醇（色谱级）                       2.3.3 重复性试验
          购自美国 Tedia 公司；水为娃哈哈纯净水。18 批草豆蔻                         取草豆蔻药材粉末（编号S1），按“2.1.2”项下方法平
          药材分别采自广东、广西、海南等地（表 1），经江苏省中                        行制备 6 份供试品溶液，按“2.2”项下色谱条件进样分
          医院药学部朱育凤主任中药师鉴定均为姜科山姜属植                            析，记录色谱图。以山姜素的色谱峰为参照峰，计算得
          物草豆蔻 A. katsumadai Hayata 的干燥近成熟种子。所               各共有峰相对保留时间和相对峰面积的 RSD 分别为
          有药材均置于阴凉干燥的塑封袋中贮存，备用。
                                                             0.34%～1.18% 和 1.01%～2.28%（n 均为 6），表明该方法
                     表1 18批草豆蔻药材的产地
                                                             重复性良好。
          样品编号 产地              样品编号 产地                       2.3.4 指纹图谱的建立
          S1    广西壮族自治区玉林市玉州区    S10  广东省肇庆市高要区
          S2    广西壮族自治区玉林市玉州区    S11  印度尼西亚                      按“2.1.2”项下方法制备 18 批草豆蔻药材的供试品
          S3    广西壮族自治区玉林市玉州区    S12  云南省红河哈尼族彝族自治州河口瑶族自治县   溶液，按“2.2”项下色谱条件进样分析，得到各批药材的
          S4    广西壮族自治区玉林市玉州区    S13  云南省红河哈尼族彝族自治州河口瑶族自治县   HPLC 图。将 HPLC 图依次导入《中药色谱指纹图谱相
          S5    广西壮族自治区玉林市玉州区    S14  海南省海口市龙华区              似度评价系统（2012 版）》，以 S1 图谱为参照图谱，时间
          S6    广东省肇庆市高要区        S15  海南省海口市龙华区              窗宽度设置为0.1 min，经多点校正和Marker峰匹配后，
          S7    广东省肇庆市高要区        S16  海南省海口市龙华区
          S8    广东省肇庆市高要区        S17  海南省海口市龙华区              生成 18 批草豆蔻药材的 HPLC 指纹图谱与对照指纹图
          S9    广东省肇庆市高要区        S18  海南省海口市龙华区              谱 R，并确定共有峰11个，详见图1。将生成的对照指纹
          2 方法与结果                                            图谱R与山姜素、乔松素、小豆蔻明、桤木酮混合对照品
          2.1 溶液的制备                                          溶液的 HPLC 图（图 2）进行比对，确认供试品溶液指纹
          2.1.1 混合对照品溶液的制备                                   图谱中的6、7、8、11号峰分别为山姜素、乔松素、小豆蔻
              分别取山姜素、乔松素、小豆蔻明、桤木酮对照品适                        明、桤木酮的色谱峰。
          量，精密称定，用甲醇溶解并稀释，制成每 1 mL 含山姜                       2.3.5 指纹图谱的相似度分析
          素 46.4 μg、乔松素 40.2 μg、小豆蔻明 43.4 μg、桤木酮                 利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》
          81.8 μg的混合对照品溶液，过0.22 μm微孔滤膜，即得。                   计算18批草豆蔻药材指纹图谱与对照指纹图谱R的相似
          2.1.2 供试品溶液的制备                                     度。结果显示，18 批草豆蔻药材的相似度分别为 0.983、
              将各产地的草豆蔻药材粉碎处理后过三号筛，精密                         0.982、0.979、0.994、0.948、0.985、0.965、0.986、0.985、0.977、
          称取0.5 g粉末，置于三角锥形瓶中，加甲醇20 mL，称定                     0.996、0.996、0.996、0.998、0.995、0.998、0.991、0.997，均大于
          质量，超声（功率250 W，频率40 kHz）提取15 min，放冷，                0.9，表明不同批次草豆蔻药材的成分组成较为一致。


          中国药房  2025年第36卷第18期                                              China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 18    · 2263 ·
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