Page 54 - 《中国药房》2025年18期

LVEDV， LVESV， CK-MB， LDH， cTnI， cTnT， TNF-α， IL-1β， ROS and MDA， cell apoptosis rates， and protein expression of
cleaved caspase-3 were all decreased significantly （P＜0.05）； and the changes in various indicators were more pronounced in the
Pac-H group （P＜0.05）； both groups showed varying degree of improvement in myocardial histopathological morphology.
Compared with the Pac-H group， the aforementioned indicators in rats from the Pac-H+3-MA group were all significantly reversed
（P＜0.05）. CONCLUSIONS Pac may promote mitochondrial autophagy in cardiomyocytes of CHD rats by activating the PINK1/
Parkin signaling pathway， thereby reducing inflammatory responses and oxidative stress and improving myocardial injury.
KEYWORDS pachymic acid； PINK1/Parkin signaling pathway； coronary heart disease； cardiomyocytes； mitochondrial
autophagy

冠心病（coronary heart disease，CHD）是一种因冠状 SB-T6013）均购自上海圣尔生物科技有限公司；肌酸激
动脉粥样硬化导致心肌供血不足、引发心脏功能障碍的 酶同工酶（creatine kinase isoenzyme，CK-MB）、乳酸脱氢
[2]
[1]
心血管疾病 ，其高死亡率对人类健康构成严重威胁 。 酶（lactate dehydrogenase，LDH）、肌钙蛋白 I（cardiac tro‐
目前，临床主要采用抗血栓药物进行症状控制和预防， ponin I，cTnI）、肌钙蛋白 T（cardiac troponin T，cTnT）试
但不能治愈，且存在患者需长期服药及可能引发诸多药 剂盒（批号分别为 ALD36903、ALD29174、ALD29481、
物不良反应的问题 。茯苓酸（pachymic acid，Pac）是一 ALD30609）均购自上海艾连达生物科技有限公司；微管
[3]
种从茯苓中提取的天然四环三萜类化合物，具有抗炎、 相 关 蛋 白 1 轻 链 3 Ⅱ（microtubule-associated protein 1
[4]
抗氧化和降糖等活性 。研究显示，Pac可通过抑制心肌 light chain 3 Ⅱ，LC3Ⅱ）、LC3Ⅰ、选择性自噬衔接蛋白
[5]
细胞铁死亡和氧化应激来减轻心肌缺血再灌注损伤 ； p62、活化型胱天蛋白酶 3（cleaved caspase-3）、Parkin、
[6]
还可改善心力衰竭大鼠的心功能 ，但具体作用机制尚 PINK1 和 β - 肌 动 蛋 白（β -actin）一 抗（批 号 分 别 为
未 阐 明 。 PTEN 诱 导 激 酶 1（PTEN-induced kinase 1， ab229327、ab167421、ab140651、ab214430、ab315376、
PINK1）/Parkin RBR E3 泛素蛋白连接酶（Parkin RBR
ab300623、ab118777）及辣根过氧化物酶标记的山羊抗
E3 ubiquitin-protein ligase，Parkin）信号通路是调控线粒
兔二抗（货号ab302644）均购自英国Abcam公司。
体自噬的关键通路，研究证实，激活该通路可促进缺血
1.3 实验动物与饲料来源
性心肌病大鼠和心力衰竭大鼠的线粒体自噬，抑制心肌 雄性 SD 大鼠 70 只，SPF 级，体重 180～200 g，由南
细胞凋亡，改善心肌损伤 [7―8] 。本研究主要探讨Pac是否
方医科大学实验中心提供，生产许可证编号为 SCXK
可通过调控 PINK1/Parkin 信号通路介导线粒体自噬来
（粤）2021-0041。高脂饲料购自北京华阜康生物科技股
改善CHD大鼠心肌损伤，旨在为CHD的治疗提供参考。
份有限公司。大鼠在温度（23±2）℃、相对湿度（60±
1 材料
5）%，12 h 昼夜交替的环境中饲养，自由摄食、饮水。动
1.1 主要仪器
物实验经湖北医药学院动物伦理委员会批准，审查批号
本研究所用主要仪器包括 DW-T5 型彩色多普勒超
为湖北医药学院动（福）第2023-申072号。
声诊断仪[大为医疗（江苏）有限公司]、SGO-HD800X 型
显微镜（深圳市深视光谷光学仪器有限公司）、AU2700 2 方法
2.1 造模、分组与给药
型全自动生化分析仪（日本 Olympus 公司）、ZC1099 型
取 60 只大鼠建立 CHD 模型，以高脂饲料（10% 猪
透射电镜（上海茁彩生物科技有限公司）。
油、2% 丙硫氧嘧啶、0.2% 胆固醇、0.5% 牛磺胆酸钠、其
1.2 主要药品与试剂
余为基础饲料）喂养6周，然后连续3 d腹腔注射盐酸异
Pac（批号29070-92-6，纯度＞98%）购自湖北健楚生
丙肾上腺素（5 mg/kg），每日给药 1 次。以大鼠心电图
物医药有限公司；盐酸异丙肾上腺素（批号 HY-B0468，
纯度＞99.86%）和PINK1/Parkin信号通路抑制剂3-甲基 ST 段抬高≥0.1 mV 且心肌组织 HE 染色显示明显受损
[9]
腺嘌呤（3-methyladenine，3-MA；批号 HY-19312，纯度＞ 视为造模成功 。将造模成功的 43 只大鼠中的 40 只按
99.91%）均购自美国 MCE 公司；苏木精-伊红（HE）试剂 随机数字表法分为模型组（CHD组）、Pac低剂量组（Pac-
（批号 SB-CP091）和肿瘤坏死因子 α（tumor necrosis fac‐ L 组）、Pac 高剂量组（Pac-H 组）、Pac 高剂量+PINK1/Par‐
tor-α，TNF-α）、白细胞介素 10（interleukin-10，IL-10）和 kin信号通路抑制剂组（Pac-H+3-MA组），每组10只。同
IL-1β 酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒（批号分别为 时，取10只正常大鼠作为对照组（Con组）。造模结束后
SB-FY7591、SB-FY4991、SB-FY7634）以及过氧化氢酶 第1天开始给药，Pac-L组和Pac-H组大鼠分别腹腔注射
[10]
（catalase，CAT）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase， 10 和 20 mg/kg 的 Pac ，Pac-H+3-MA 组大鼠腹腔注射
[11]
SOD）、活性氧（reactive oxygen species，ROS）、丙二醛 20 mg/kg的Pac和30 mg/kg的3-MA（根据相关文献 换
（malondialdehyde，MDA）、TUNEL 检测试剂盒（批号分 算），Con组和CHD组大鼠腹腔注射等体积生理盐水，每
别 为 SB-EC8453、SB-EC5759、SB-R6033、SB-ZR2653、 日给药1次，连续给药4周。

· 2268 · China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 18 中国药房 2025年第36卷第18期