Page 101 - 《中国药房》2025年13期
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2 方法 691161211、691171210、691180701)、注射用硫酸长春新
2.1 血样采集及 DNA提取 碱[深圳万乐药业有限公司,国药准字 H44021772,规格
因多项药代动力学研究表明,利妥昔单抗的ctrough与 1 mg(按 C46H56N4O10 ·H2SO4 计),批号分别为 1706V2、
药-时曲线下面积(area under the curve,AUC)显著相 1809V1、1810V1]、醋酸泼尼松片(天津力生制药股份有
关 [10―11] ,且文献推荐检测第 1 个疗程的 ctrough进行预后分 限公司,国药准字 H12020689,规格 5 mg,批号分别为
[12]
析 ,故本研究检测了第1个疗程利妥昔单抗的ctrough,即 CP180511A、CP190602A、CP190615A)、利 妥 昔 单 抗
在第2个疗程给药前采集患者血样2 mL,用乙二胺四乙 ELISA试剂盒(美国BioVision公司)。
酸抗凝管收集。所有血样采集后于6 h内以5 000 r/min 2.4 临床治疗方法
离心10 min,分离出血浆和血细胞,将血浆冻存于-80 ℃ 登记入组患者确诊时及治疗过程中的身高、体重、
超低温冰箱,3个月内完成血药浓度检测;剩余血细胞按 合并用药情况、一般健康状态、生化指标、血常规指标等
®
TIANamp 血液 DNA 试剂盒[天根生化科技(北京)有限 资料。患者根据病情并遵照《中国恶性淋巴瘤诊疗规范
公司]说明书操作提取 DNA,于-80 ℃超低温冰箱冻 (2015 年版)》 ,接受 4~6 个疗程 R-CHOP 方案治疗,每
[9]
存,用于后续基因型检测。
21 d 为 1 个疗程。R-CHOP 化疗方案的用法用量为:利
2.2 基因型检测
妥昔单抗375 mg/m 缓慢静脉注射、环磷酰胺 750 mg/m 2
2
采用 Haploview 4.2 软件挑选 MS4A1 基因 tagSNP:
静脉注射、多柔比星 50 mg/m(或多柔比星脂质体 20
2
rs1051461、rs17155034、rs4939364、rs10501385;取“2.1”
2
mg/m)静脉注射、长春新碱 2 mg 静脉注射,第1~5天;
项下血样分离后的冻存血细胞,以基质辅助激光解吸电
另每天口服泼尼松 100 mg,每21 d为1个疗程。一般达
离-飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ioniza‐
到完全缓解后巩固2个疗程,共进行6~8个疗程。若期
tion time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)
间发生肿瘤进展或控制不佳,则更换其他化疗方案,视
法进行基因型检测。首先采用 Assay Designer 3.1 软件
为患者出组。
设计PCR引物并进行PCR扩增,然后进行虾碱性磷酸酶
2.5 疗效评价
消化反应和单碱基延伸反应,最后采用 MALDI-TOF-
在患者治疗结束后,每 3 个月对其进行 1 次电话随
MS法,以Typer 4.0软件检测质谱峰,根据质谱峰图判读
访,建立电子管理档案,随访日期截至 2024 年 12 月 31
各样本目标位点的基因型。
日。在随访期内,基于患者的 PFS 和 OS 绘制生存曲线
2.3 利妥昔单抗血药浓度检测
(PFS是指患者从接受治疗至观察到疾病进展或因任何
采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosor‐
原因死亡之间的时间;OS 是指从随机化分组开始至因
[11]
bent assay,ELISA) 检测利妥昔单抗血药浓度。取
任何原因死亡或到随访截止的时间),探讨 MS4A1 基因
“2.1”项下冻存血浆,通过建立“捕捉抗体-利妥昔单抗-
多态性与利妥昔单抗疗效的相关性。
检测抗体”的夹心法进行血药浓度定量。方法的特异
2.6 统计学处理
性、选择性、准确度、精密度、稀释线性、稀释平行性、样
应用SPSS 24.0软件对数据进行统计分析。采用单
品稳定性均符合要求。
因素线性回归分析患者人口统计学(性别、年龄、体重
所用仪器、药品及试剂有:Veriti 梯度 PCR 仪(美国
等)、临床指标、基因型与第 1 个疗程利妥昔单抗稳态
ABI 公司)、DNA 质谱阵列基因分析系统(美国 Agena
Bioscience 公司)、酶标仪/全波长读数仪(美国 Thermo ctrough的相关性;再将有统计学意义(P<0.05)的因素作为
Fisher Scientific 公司)、利妥昔单抗注射液(瑞士 Roche 自变量,第 1 个疗程利妥昔单抗稳态 ctrough作为因变量进
Pharma Ltd 公司,国药准字 J20170034,规格 100 mg/10 行多元线性回归分析。绘制 Kaplan-Meier 曲线以评估
mL,批号分别为 H0224/SH0123、H0242/SH0132、H0235/ 患者的PFS和OS。以MS4A1基因型和肿瘤分期为自变
SH0129)、注射用环磷酰胺(德国Baxter Oncology GmbH 量,采用 Cox 回归模型评估影响患者预后的因素,数据
公司,国药准字 H20160467,规格 0.2 g,批号分别为 以风险比(hazard ratio,HR)及其 95% 置信区间(confi‐
7F167A、7F172A、8A210A)、注射用盐酸多柔比星(瀚晖 dence interval,CI)表示。
制药有限公司,国药准字 H33021980,规格 10 mg,批号 符合正态分布的计量资料以x±s表示,多组间比较
分别为18007113、18019811、1900611)、盐酸多柔比星脂 采用方差分析,进一步两两比较采用t检验;偏态分布的
质体注射液(石药集团欧意药业有限公司,国药准字 计量资料以M(P25,P75 )表示,使用非参数检验。计数资料
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H20113320,规 格 为 10 mL∶20 mg,批 号 分 别 为 用频数或率(%)表示,采用χ 检验。检验水准α=0.05。
中国药房 2025年第36卷第13期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 13 · 1643 ·