Page 59 - 《中国药房》2023年8期

表3 各组BMSCs培养液中TNF-α、IL-1β、IL-6含量比
NF-κB p65 65 kDa
较（x±s，n＝6，pg/mL）
caspase-3 32 kDa
组别 TNF-α IL-1β IL-6
对照组 71.3±6.6 52.6±1.9 109.5±3.7 Bax 19 kDa
模型组 215.3±8.6 a 148.3±2.5 a 274.2±1.5 a
丁苯酞低浓度组 175.2±3.1 ab 105.1±3.1 ab 213.9±4.2 ab Bcl-2 26 kDa
丁苯酞中浓度组 131.0±4.5 abc 85.4±3.7 abc 177.8±1.2 abc GAPDH 36 kDa
丁苯酞高浓度组 79.9±4.1 abcd 62.3±3.5 abcd 144.6±2.2 abcd
F 341.606 474.071 81.434 对照组 模型组 丁苯酞低 丁苯酞中 丁苯酞高
浓度组
浓度组
浓度组
P ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001
A.电泳图
a：与对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与丁苯酞 1.2 NF-κB p65
低浓度组比较，P＜0.05；d：与丁苯酞中浓度组比较，P＜0.05 caspase-3
1.0 a Bax
a
a Bcl-2
蛋白相对表达量 0.6 ab ab abc abc
NF-κB p65 151 kDa 0.8 ab abcd
GAPDH 154 kDa 0.4 ab abc abc abcd abcd
对照组 模型组 丁苯酞低 丁苯酞中 丁苯酞高 0.2 a abcd
浓度组 浓度组 浓度组
0
A.电泳图 对照组 模型组 丁苯酞低 丁苯酞中 丁苯酞高
浓度组 浓度组 浓度组
a
1.0
NF-κB p65 mRNA表达水平 0.6 abc abcd 酞低浓度组比较，Ｐ＜0.05；d：与丁苯酞中浓度组比较，Ｐ＜0.05
B.柱状图（n＝6）
ab
0.8
a：与对照组比较，Ｐ＜0.05；b：与模型组比较，Ｐ＜0.05；c：与丁苯
图3 各组BMSCs中NF-κB p65、caspase-3、Bax和Bcl-
0.4
0.2
2蛋白表达比较
0
对照组 模型组 丁苯酞低 丁苯酞中 丁苯酞高 内毒素，可以激动 TLR-4，活化 NF-κB 信号传导通路，
浓度组 浓度组 浓度组
[11]
B.柱状图（n＝6） 刺激促炎信号级联反应，是一种重要的致炎诱导剂 ，
a：与对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与丁苯酞
广泛应用于模拟炎性损伤研究。本实验采用脂多糖诱
低浓度组比较，P＜0.05；d：与丁苯酞中浓度组比较，P＜0.05
图2 各组BMSCs中NF-κB p65 mRNA表达比较 导 BMSCs 炎性损伤，结果显示，与对照组比较，模型组
细胞存活率显著降低，凋亡率和促凋亡蛋白 caspase-3、
3.5 各组BMSCs中NF-κB p65、caspase-3、Bax和Bcl-2
Bax 表达均显著升高，抑凋亡蛋白 Bcl-2 表达显著降低，
蛋白表达比较
提示炎性微环境对 BMSCs 的生存有不利影响；与模型
如图3显示，与对照组比较，模型组和丁苯酞低、中、
组比较，丁苯酞各浓度组细胞存活率均显著升高，凋亡
高浓度组BMSCs中NF-κB p65、caspase-3、Bax蛋白相对
率和 caspase-3、Bax 蛋白表达均显著降低，Bcl-2 蛋白表
表达量均显著升高（P＜0.05），Bcl-2 蛋白相对表达量均
达均显著升高，且呈浓度依赖性，表明丁苯酞对脂多糖
显著降低（P＜0.05），其中模型组变化最显著；与模型组 诱导的BMSCs炎性损伤具有明显的改善作用。
比较，丁苯酞低、中、高浓度组BMSCs中NF-κB p65、cas‐
NF-κB是一种重要转录调控因子，广泛表达于哺乳
pase-3、Bax蛋白相对表达量均显著降低（P＜0.05），Bcl- 动物细胞中，可特异性结合众多细胞基因的启动子及增
2蛋白相对表达量均显著升高（P＜0.05），且呈浓度依赖 强子序列位点，然后调控各种重要的细胞因子、生长因
性，以丁苯酞高浓度组变化最显著。 子、趋化因子、黏附分子和免疫受体的表达，参与调节机
4 讨论 体的免疫应答、炎症反应及细胞的增殖、分化和凋亡等
脑卒中是危害人类健康的重大疾病之一，无菌性炎 生命活动 。本研究结果显示，与对照组比较，脂多糖
[12]
症贯穿缺血性脑卒中的整个病理生理过程。在脑动脉 可诱导 BMSCs 培养液中的炎症细胞因子 IL-1β、IL-6、
闭塞发生后，炎症反应、氧化应激及细胞凋亡等一系列 TNF-α 的含量升高，促进 NF-κB p65 mRNA 及蛋白表
[8]
事件可进一步加重缺血脑组织损伤 。脑组织缺血后的 达；而丁苯酞可降低上述炎症细胞因子含量，抑制 NF-
炎性微环境是影响移植后细胞存活率的重要因素。为 κB p65 mRNA及蛋白表达，表明丁苯酞可拮抗脂多糖致
了解决缺血性脑卒中患者 BMSCs 移植后细胞存活率 炎作用，减弱细胞炎性损伤和NF-κB信号通路的活性。
较低的困境，需要改善核心梗死区及缺血半暗带周围 综上所述，丁苯酞对脂多糖诱导的 BMSCs 炎性损
恶劣的微环境。近年有研究证实，通过药物预处理 伤具有改善作用，其机制可能与抑制 NF-κB 信号通路
BMSCs，可减弱炎症因子释放，改善微环境条件，从而提 有关。
高移植后细胞的存活率 [9―10] 。脂多糖是革兰氏阴性细菌 （下转第960页）

中国药房 2023年第34卷第8期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 8 · 949 ·