Page 62 - 《中国药房》2023年8期

20 批样品平行测定3次。结果见表1。由表1可见，不同批
15 次样品中 5-HMF 含量为 4.10～35.13 μg/g，含量差异较
mAU 10 大。使用 SPSS 26 软件对贮存时间（贮存时间为生产日
5-HMF
5
期到样品检测时间2022年6或7月）与5-HMF含量进行
0
相关性分析，结果显示，贮存时间与 5-HMF 含量呈显著
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 10
t/min 正相关（P＜0.01），表明盐酸氨基葡萄糖片中 5-HMF 含
A.对照品溶液
20 量呈明显的动态变化趋势。
15 表1 8批样品中5-HMF的含量测定结果（n＝3，μg/g）
mAU 10 5-HMF 编号 生产日期 5-HMF含量 编号 生产日期 5-HMF含量
S1 2020年12月 30.82 S5 2021年11月 10.97
5
S2 2021年2月 35.13 S6 2021年11月 6.81
0
S3 2021年5月 26.65 S7 2022年1月 8.09
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 10 S4 2021年9月 18.84 S8 2022年3月 4.10
t/min
B.供试品溶液（编号S1） 2.2 5-HMF的形成动力学研究
20
2.2.1 反应动力学实验 取样品（编号 S8）细粉，共 4
15
份，平铺于称量瓶中，加盖密封后，分别置于 50、60、70、
mAU 10
5 80 ℃恒温箱中放置 7 d，每隔 1 d 取细粉适量（约相当于
盐酸氨基葡萄糖 500 mg），精密称定，平行 3 份，按
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 10 “2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”项下色谱
t/min
C.阴性样品溶液 条件进样测定，依据标准曲线计算样品中5-HMF含量并
图1 5-HMF 对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液 换算成相当于盐酸氨基葡萄糖片标示量的含量。结果
的HPLC图 显示，反应温度越高，反应时间越长，样品中5-HMF含量
2.1.8 重复性试验 取样品（编号 S1）细粉，共 6 份，精 越高，同一反应温度下 5-HMF 含量与反应时间呈正相
密称定，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.1” 关。与放置第 0 天相同反应温度相比，50、60 ℃下放置
项下色谱条件进样测定，记录峰面积，依据标准曲线计 第1天时5-HMF含量增加小于5倍；70、80 ℃下放置第1
算样品中 5-HMF 含量并换算成盐酸氨基葡萄糖片标示 天时5-HMF含量快速上升，相比放置第0天相同反应温
量的含量。结果显示，5-HMF的含量为30.44 μg/g，RSD 度时，5-HMF含量增加超过10倍，表明当反应温度超过
为0.59%（n＝6），表明方法重复性良好。 60 ℃时，反应存在快速诱导期。结果见表2。
2.1.9 稳定性试验 取供试品溶液（编号S1），分别于室 表2 不同反应温度、时间下样品中5-HMF的含量测定
温下放置 0、4、8、12、18、24 h 时按“2.1.1”项下色谱条件 结果（x±s，n＝3，μg/g）
进样测定，记录峰面积。结果显示，5-HMF 峰面积的 时间/d 50 ℃ 60 ℃ 70 ℃ 80 ℃
0 4.10±0.03 4.10±0.03 4.10±0.03 4.10±0.03
RSD 为 0.36%（n＝6），表明供试品溶液于室温下放置 1 14.21±0.27 18.63±0.32 42.57±0.88 50.58±1.48
24 h内稳定性良好。 2 25.87±0.35 31.17±1.56 52.56±1.46 64.65±1.12
3 36.12±0.68 42.03±1.12 66.36±1.23 82.17±2.98
2.1.10 加样回收率试验 取样品（编号 S1）细粉适量
4 41.53±1.99 50.56±0.98 71.48±2.44 91.32±2.23
（约相当于盐酸氨基葡萄糖250 mg），共9份，精密称定， 5 43.32±0.66 53.25±1.12 80.34±1.23 99.02±1.21
分别置于 50 mL 容量瓶中，按已知量的 80%、100%、 6 51.92±1.48 59.12±1.43 86.16±1.28 111.50±3.74
7 57.81±1.08 68.27±1.28 97.79±3.74 120.40±1.78
120% 精密加入“2.1.2”项下对照品溶液，按“2.1.3”项下
2.2.2 5-HMF 形成动力学模型分析 热反应体系中
方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”项下色谱条件进样测
5-HMF含量随时间的变化规律，可采用零级动力学模型
定，记录峰面积并计算加样回收率。结果显示，5-HMF
的 加 样 回 收 率 为 99.38%～99.73%（RSD＝0.53%，n＝ 或一级动力学模型进行分析，拟合得到不同温度下的反
9），表明方法准确度好。 应速率常数（k），再利用Arrhenius公式计算5-HMF的表
[13]
2.1.11 样品含量测定 精密称取8批样品，按“2.1.3”项 观活化能（Ea，kJ/mol），公式如下 ：
下方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”项下色谱条件进样 零级动力学模型：Ct＝C0+k0·t ⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅ （1）
测定，记录峰面积，依据标准曲线计算样品中 5-HMF 含 一级动力学模型：Ct＝C0 exp（k1·t）⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅⋅ （2）
量并换算成相当于盐酸氨基葡萄糖片标示量的含量，每 式中，Ct为 t 时的 5-HMF 含量（μg/g），C0为 5-HMF

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