Page 88 - 《中国药房》2022年6期

表2 芒果苷等5种成分的加样回收率试验结果（n＝6） 显相同颜色的斑点，且阴性对照无干扰。在方法学研究
取样量/ 已知量/ 加入量/ 测得量/ 加样回收率/ 平均加样回 RSD/ 中，笔者比较了不同厂家的薄层板以及在不同温度、不
成分
g mg mg mg ％ 收率/％ ％ 同湿度下的展开情况，结果表明，各色谱斑点及分离度
芒果苷 0.507 0 0.493 8 0.516 6 0.983 2 94.73 95.00 0.52
0.507 4 0.494 2 0.516 6 0.985 0 95.01 均符合 2020 年版《中国药典》（四部）通则“0502 薄层色
[10]
0.507 4 0.494 2 0.516 6 0.982 5 94.52 谱法”的相关要求 ，且耐用性良好。此外，本课题组还
0.507 9 0.494 7 0.516 6 0.989 5 95.78 对天南星（制）进行了 TLC 鉴别研究，但阴性对照有干
0.507 2 0.494 0 0.516 6 0.982 5 94.56 扰，经过多次实验后仍未能找到适宜的展开条件，故未
0.507 5 0.494 3 0.516 6 0.987 0 95.37
升麻素苷 0.507 0 0.341 2 0.311 7 0.676 8 107.67 105.16 1.32 将其TLC鉴别方法列入正文中。
0.507 4 0.341 5 0.311 7 0.671 3 105.81 3.3 HPLC流动相的选择
0.507 4 0.341 5 0.311 7 0.667 9 104.72 通过查阅相关文献 [12－15] ，本课题组考察了甲醇-0.1％
0.507 9 0.341 8 0.311 7 0.667 5 104.49
0.507 2 0.341 3 0.311 7 0.665 2 103.91 醋酸溶液、甲醇-0.1％磷酸溶液、乙腈-0.2％醋酸溶液 3
0.507 5 0.341 5 0.311 7 0.666 7 104.33 种流动相系统的分离效果。结果显示，以甲醇-0.1％磷
柚皮苷 0.507 0 3.297 5 3.175 5 6.392 4 97.46 97.16 0.42
0.507 4 3.300 1 3.175 5 6.378 0 96.93 酸溶液为流动相时，5种待测成分的出峰时间、峰形及峰
0.507 4 3.300 1 3.175 5 6.382 5 97.07 纯度最优，故采用甲醇-0.1％磷酸溶液作为流动相。
0.507 9 3.303 4 3.175 5 6.379 8 96.88 3.4 HPLC检测波长的选择
0.507 2 3.298 8 3.175 5 6.372 3 96.79 本课题组前期采用二极管阵列检测器进行全波长
0.507 5 3.300 8 3.175 5 6.407 9 97.85
新橙皮苷 0.507 0 2.320 5 2.324 7 4.670 5 101.09 101.00 0.77 扫描，发现芒果苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷在
0.507 4 2.322 4 2.324 7 4.694 8 102.05 254 nm波长处有最大吸收，柚皮苷、新橙皮苷在280 nm
0.507 4 2.322 4 2.324 7 4.646 4 99.97 波长处有最大吸收，故选择254、280 nm作为检测波长。
0.507 9 2.324 7 2.324 7 4.663 2 100.59
0.507 2 2.321 5 2.324 7 4.659 7 100.58 3.5 HPLC供试品溶液提取条件的选择
0.507 5 2.322 8 2.324 7 4.688 0 101.74 本课题组前期分别考察了超声、冷浸、加热回流等
5-O-甲基维斯阿米醇苷 0.507 0 0.598 8 0.546 9 1.163 8 103.31 104.97 1.50 不同提取方式的提取效果，结果表明，超声处理的提取
0.507 4 0.599 2 0.546 9 1.160 8 102.69
0.507 4 0.599 2 0.546 9 1.175 5 105.38 效果最好，故最终确定以超声作为供试品溶液的提取方
0.507 9 0.599 8 0.546 9 1.178 6 105.83 式。本课题组前期还考察了提取溶剂（50％甲醇、70％
0.507 2 0.599 0 0.546 9 1.179 4 106.13 甲醇、甲醇、乙醇、正丁醇）、超声时间（20、30、50 min）、
0.507 5 0.599 4 0.546 9 1.181 7 106.47
取样量（1.0、2.0、4.0 g）对提取效果的影响，结果显示，取
表 3 4 批扭伤归胶囊中芒果苷等 5 种成分的含量测定 1 g样品加50％甲醇超声提取30 min的效果最好。
结果（n＝2，mg/g） 3.6 不足
批次 芒果苷 升麻素苷 柚皮苷 新橙皮苷 5-O-甲基维斯阿米醇苷 本方中天南星（制）为有毒中药，在实验设计中有
181101 0.974 0.673 6.504 4.577 1.181
190901 0.980 0.694 6.600 4.616 1.185 TLC鉴别和含量测定研究内容。但在TLC鉴别研究中，
190902 0.967 0.689 6.549 4.578 1.174 本课题组尝试了多种供试品溶液制备方法：60％乙醇超
210481 0.448 0.728 8.149 9.249 0.885 声处理、甲醇超声处理、乙醇冷浸处理、乙醇加热回流、
平均值 0.842 0.696 6.951 5.755 1.106
石油醚索氏提取等；同时，本课题组也尝试了多种展开
2015中已被删除，增加了红花的TLC鉴别，对知母、天南 剂和显色剂，均未得到理想结果[未找到天南星（制）的
星（制）、白芷未涉及。本研究在现行质量标准的基础 特征斑点]。此外，本课题组还尝试采用HPLC法对天南
上，增加了知母和白芷的 TLC 鉴别，同时采用 HPLC 法 星（制）进行鉴别和含量测定研究，但均未能找到特征
对防风、枳壳、知母进行了含量测定，以达到同时控制方 峰。鉴于此，此次标准提升未涉及天南星（制）相关检验
中不同药味的目的，为进一步提高扭伤归胶囊的质量标 项目。
准提供参考。 本课题组在前期实验中设计了当归指标性成分阿
3.2 TLC鉴别药材和方法的选择 魏酸的含量测定项，但实验结果显示，阿魏酸的含量较
扭伤归胶囊由9味药组成，成分复杂，现行标准质控 低，色谱峰响应极弱且阴性对照有干扰，虽反复优化供
不够全面，缺少白芷、知母、天南星（制）等关键药味的质 试品溶液的制备方法和色谱条件，仍未能消除阴性对照
控项目，故十分有必要建立上述药材的TLC鉴别方法以 的干扰，考虑到现行质量标准已收载当归的 TLC 鉴别
控制药品的整体质量。本研究参考 2020 年版《中国药 项，故此次多成分含量测定未纳入阿魏酸。
典》（一部）“白芷”“知母”鉴别项下的方法建立了扭伤归 综上所述，本研究在扭伤归胶囊现行质量标准的基
胶囊中这两味药的TLC鉴别方法 。结果显示，供试品 础上，增加了白芷、知母的TLC鉴别项，扩展了含量测定
[11]
色谱中，与对照药材和（混合）对照品色谱相应位置上均 项的指标性成分，建立了可同时测定扭伤归胶囊中芒果

·722 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 6 中国药房 2022年第33卷第6期