Page 86 - 《中国药房》2022年6期
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母对照药材色谱和芒果苷对照品色谱相应的位置上，均                            5-O-甲基维斯阿米醇苷的测定均无干扰。
        显相同颜色的荧光斑点，且知母阴性对照无干扰。                              2.2.6  线性关系考察        取“2.2.1”项下混合对照品贮备
                                                            溶液，用 50％甲醇稀释，制成芒果苷质量浓度分别为
                                                            7.98、15.95、31.91、63.81、127.63 μg/mL，升麻素苷质量浓
                                                            度分别为 6.74、13.48、26.96、53.92、107.84 μg/mL，柚皮
                                                            苷质量浓度分别为 53.06、106.12、212.24、424.45、848.96
                                                            μg/mL，新橙皮苷质量浓度分别为 39.31、78.61、157.23、
                                                            314.45、628.90 μg/mL，5-O-甲基维斯阿米醇苷质量浓度
                                                            分别为 13.54、27.08、54.15、108.31、216.62 μg/mL 的系列
                                                            混合对照品溶液，按“2.2.4”项下色谱条件进样测定，记
                                                            录峰面积。以待测成分的峰面积（y）为纵坐标、质量浓
                                                            度（x）为横坐标进行回归分析，得回归方程，结果见表1。
                     1  2   3   4   5   6   7
            1：芒果苷对照品；2：缺知母阴性对照；3：知母对照药材；4～7：供               2.2.7  检测限和定量限考察           取“2.2.6”项下最低质量
        试品（批号分别为181101、190901、190902、210481）                浓度的混合对照品溶液，用 50％甲醇逐级稀释，按照
                     图2 知母药材的TLC图                          “2.2.4”项下色谱条件进样测定，以信噪比10∶1测得定量

        2.2 含量测定                                            限，以信噪比3 ∶ 1测得检测限。结果显示，芒果苷、升麻
        2.2.1  混合对照品贮备溶液的制备              取芒果苷、升麻素           素苷、柚皮苷、新橙皮苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的定量
        苷、柚皮苷、新橙皮苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品各                         限分别为 0.06、0.16、0.18、0.16、0.24 μg/mL，检测限分别
        适量，加 50％甲醇制成质量浓度分别为 127.63、107.84、                  为0.02、0.05、0.05、0.05、0.07 μg/mL。
        848.96、628.90、216.62 μg/mL 的混合对照品贮备溶液，              2.2.8  精密度试验       取“2.2.6”项下芒果苷、升麻素苷、
        备用。                                                 柚皮苷、新橙皮苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷质量浓度分
        2.2.2  供试品溶液的制备          取扭伤归胶囊内容物适量，               别为 31.91、26.96、212.24、157.23、54.15 μg/mL 的混合对
        研细，混匀，取约1.0 g，精密称定，置于25 mL量瓶中，加                     照品溶液，按照“2.2.4”项下色谱条件重复进样测定6次，
        50％甲醇 20 mL，超声（功率 250 W，频率 40 kHz）处理                记录峰面积。结果显示，芒果苷、升麻素苷、柚皮苷、新
        30 min，放冷，加 50％甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤                      橙皮苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷峰面积的 RSD 分别为
        液，即得。                                               0.40％、0.42％、0.30％、0.31％、0.26％（n＝6），表明仪器
        2.2.3  阴性对照溶液的制备           分别取缺防风、缺知母、              精密度良好。
        缺枳壳阴性对照样品各 1.0 g，按照“2.2.2”项下方法操                     2.2.9  稳定性试验       取“2.2.2”项下供试品溶液（批号
        作，制成相应的阴性对照溶液。                                      181101），分别于室温下放置 0、2、4、8、12、24 h 时按照
        2.2.4  色谱条件      以 Agela Durashell C18 （4.6 mm×250  “2.2.4”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果显
        mm，5 μm）为色谱柱，以甲醇（A）-0.1％磷酸溶液（B）为流                   示，芒果苷、升麻素苷、柚皮苷、新橙皮苷、5-O-甲基维斯
        动相进行梯度洗脱（0～5 min，20％A；5～15 min，20％A→                阿米醇苷峰面积的 RSD 分别为 0.24％、1.20％、0.20％、
        33％A；15～36 min，33％A→45％A；36～50 min，45％A→            0.25％、1.15％（n＝6），表明供试品溶液在室温下放置
        55％A；50～55 min，55％A→70％A；55～60 min，70％A→            24 h内稳定性良好。
        20％A）；流速为 1.0 mL/min；柱温为 35 ℃；检测波长为                 2.2.10  重 复 性 试 验    精 密 称 取 扭 伤 归 胶 囊（批 号
        254 nm（芒果苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷）、                      181101）内容物1.0 g，共6份，分别按照“2.2.2”项下方法
        280 nm（柚皮苷、新橙皮苷）；进样量为10 μL。                         制成供试品溶液，再按照“2.2.4”项下色谱条件进样测
        2.2.5  专属性考察       分别吸取“2.2.1”～“2.2.3”项下混           定，记录峰面积并代入回归方程计算各成分的含量。结
        合对照品贮备溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各 10                           果显示，芒果苷、升麻素苷、柚皮苷、新橙皮苷、5-O-甲基
        μL，按“2.2.4”项下色谱条件进样测定，记录色谱图，详见                      维斯阿米醇苷的平均含量分别为 0.974、0.673、6.504、
        图3。由图3可见，在该色谱条件下，供试品溶液的理论                           4.577、1.181 mg/g，RSD 分别为 1.03％、0.27％、0.38％、
        板数按芒果苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷峰计均不低于                           0.39％、0.36％（n＝6），表明方法重复性良好。
        10 000，相邻色谱峰间的分离度均大于1.5；同时，供试品                      2.2.11  加样回收率试验        称取已知含量的扭伤归胶囊
        色谱中，在与对照品色谱相同保留时间处检出色谱峰，                           （批号181101）内容物约0.5 g，精密称定，共6份，分别置
        方中其他成分对芒果苷、升麻素苷、柚皮苷、新橙皮苷、                           于 25 mL 量瓶中，加入芒果苷、升麻素苷、柚皮苷、新


        ·720 ·  China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 6                                    中国药房    2022年第33卷第6期
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