Page 93 - 《中国药房》2022年6期

2.4.3 木瓜蛋白酶溶液浓度 取苦杏仁皮粉末约10 g， 2.5 苦杏仁皮中DF和黄酮提取工艺优化的正交实验
精密称定，固定料液比 1 ∶ 20、pH6、α-淀粉酶溶液浓度 2.5.1 正交实验 在单因素实验的基础上，以料液比
1.5％、酶解温度65 ℃、酶解时间2 h，按“2.1”项下方法同 （A）、pH（B）、木瓜蛋白酶溶液浓度（C）、α-淀粉酶溶液浓
步提取 DF 和黄酮，分别按“2.2”“2.3.8”项下方法计算两 度（D）为考察因素，DF 和黄酮含量为指标，采用 L9 （3）
4
者含量，考察不同木瓜蛋白酶溶液浓度（0.1％、0.5％、 正交表进行实验设计。将DF和黄酮含量分别赋予50％
0.9％）对DF和黄酮含量的影响。各条件平行操作3次， 的权重计算综合评分：综合评分＝（DF 含量/DF 含量最
取平均值，结果见图1C。由图1C可知，随着木瓜蛋白酶 大值）×0.5+（黄酮含量/黄酮含量最大值）×0.5。综合评
溶液浓度的增加，DF 和黄酮含量均呈先降低后增加的 分越高，表示在该实验因素条件下，苦杏仁皮中DF和黄
趋势，均在木瓜蛋白酶溶液浓度为0.1％时达到峰值；经 酮的含量越高 [20－21] 。苦杏仁皮提取工艺优化的因素与
one-way ANOVA 检验可知，木瓜蛋白酶溶液浓度对 DF 水平见表 2，实验设计方案与结果见表 3，方差分析结果
和黄酮含量的影响均有统计学意义（P＜0.05），故选择 见表4。
木瓜蛋白酶溶液浓度0.1％～0.9％进行后续实验。
表2 苦杏仁皮提取工艺优化的因素与水平
2.4.4 α-淀粉酶溶液浓度 取苦杏仁皮粉末约 10 g，精
水平 A/（g/mL） B C/％ D/％
密称定，固定料液比 1 ∶ 20、pH6、木瓜蛋白酶溶液浓度
1 1∶10 5 0.1 0.5
0.5％、酶解温度65 ℃、酶解时间2 h，按“2.1”项下方法同 2 1∶20 6 0.5 1.5
步提取 DF 和黄酮，分别按“2.2”“2.3.8”项下方法计算两 3 1∶30 7 0.9 2.5
者含量，考察不同α-淀粉酶溶液浓度（0.5％、1.5％、 表3 苦杏仁皮提取工艺优化的实验设计方案与结果
2.5％）对DF和黄酮含量的影响。各条件平行操作3次， 实验号 A B C D DF含量/（g/g） 黄酮含量/（mg/g） 综合评分/分
取平均值，结果见图1D。由图1D可知，随着α-淀粉酶溶 1 1 1 1 1 0.824 1.759 0.922
液浓度的增加，DF含量呈先降低后增加的趋势，当α-淀 2 1 2 2 2 0.762 1.632 0.854
3 1 3 3 3 0.722 1.485 0.795
粉酶溶液浓度为 0.5％时达到最高；黄酮含量呈先增加
4 2 1 2 3 0.655 2.082 0.898
后降低的趋势，当α-淀粉酶溶液浓度为 1.5％时达到最 5 2 2 3 1 0.690 1.692 0.825
高；经 one-way ANOVA 检验可知，α-淀粉酶溶液浓度对 6 2 3 1 2 0.702 1.022 0.672
7 3 1 3 2 0.594 2.001 0.841
DF 和黄酮含量的影响均有统计学意义（P＜0.05），故选
8 3 2 1 3 0.631 1.698 0.791
择α-淀粉酶溶液浓度0.5％～2.5％进行后续实验。 9 3 3 2 1 0.623 1.682 0.782
2.4.5 酶解温度 取苦杏仁皮粉末约 10 g，精密称定， K1 0.857 0.887 0.795 0.843
0.798 0.824 0.845 0.789
固定料液比1 ∶ 20、pH6、木瓜蛋白酶溶液浓度0.5％、α-淀 K2
K3 0.805 0.750 0.821 0.828
粉酶溶液浓度 1.5％、酶解时间 2 h，按“2.1”项下方法同 R 0.059 0.137 0.050 0.054
步提取 DF 和黄酮，分别按“2.2”“2.3.8”项下方法计算两
表4 苦杏仁皮提取工艺优化的方差分析结果
者含量，考察不同酶解温度（50、65、80 ℃）对DF 和黄酮
方差来源 平方和 自由度 均方 F P
含量的影响。各条件平行操作3次，取平均值，结果见图
A 0.018 9 2 0.009 4 151.01 ＜0.01
1E。由图 1E 可知，随着酶解温度的增加，DF 和黄酮含 B 0.085 0 2 0.042 5 679.20 ＜0.01
量均无明显变化；经one-way ANOVA检验可知，酶解温 C 0.011 1 2 0.005 5 88.39 ＜0.01
D 0.014 0 2 0.007 0 112.13 ＜0.01
度对DF含量的影响无统计学意义（P＞0.05），而对黄酮
误差 0.001 1 18 6.257 0×10 －5
含量的影响有统计学意义（P＜0.05），故从经济和节能
由表3可知，各因素对DF和黄酮含量影响的大小顺
角度考虑，暂不将酶解温度作为后续正交实验的考察因
素，选择酶解温度50 ℃。 序依次为B＞A＞D＞C，即pH＞料液比＞α-淀粉酶溶液
2.4.6 酶解时间 取苦杏仁皮粉末约 10 g，精密称定， 浓度＞木瓜蛋白酶溶液浓度，得到最优提取工艺为
固定料液比1 ∶ 20、pH6、木瓜蛋白酶溶液浓度0.5％、α-淀 A1B1C2D1，即料液比 1 ∶ 10、pH5，木瓜蛋白酶溶液浓度
粉酶溶液浓度 1.5％、酶解温度 50 ℃，按“2.1”项下方法 0.5％、α-淀粉酶溶液浓度0.5％。各因素对DF和黄酮含
同步提取 DF 和黄酮，分别按“2.2”“2.3.8”项下方法计算 量的影响均有统计学意义（P＜0.01），其中pH的影响最
两者含量，考察不同酶解时间（1、2、3 h）对DF和黄酮含 大，随后依次为料液比、α-淀粉酶溶液和木瓜蛋白酶溶
量的影响。各条件平行操作 3 次，取平均值，结果见图 液浓度，方差分析结果和极差分析结果一致。
1F。由图1F可知，随着酶解时间的延长，DF和黄酮含量 2.5.2 最优提取工艺的确定 综合分析单因素和正交
均无明显变化；经one-way ANOVA检验可知，酶解时间 实验结果，得到最优提取工艺如下：料液比 1 ∶ 10、pH5、
对DF和黄酮含量的影响均无统计学意义（P＞0.05），故 木瓜蛋白酶溶液浓度0.5％、α-淀粉酶溶液浓度0.5％、酶
从经济和节能角度考虑，暂不将酶解时间作为后续正交 解温度50 ℃、酶解时间1 h。
实验的考察因素，选择酶解时间1 h。 2.5.3 验证实验 取苦杏仁皮粉末约 10 g，精密称定，

中国药房 2022年第33卷第6期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 6 ·727 ·