Page 44 - 《中国药房》2022年6期

表5 丁香酸等成分的回归方程、线性范围、定量限与检 表6 丁香酸等成分的加样回收率试验结果（n＝9）
测限
待测成分 称样量/ 已知量/ 加入量/ 测得量/ 加样回收率/ 平均加样回收率/ RSD/
线性范围/ 定量限/ 检测限/ g μg μg μg ％ ％ ％
待测成分 回归方程 R 2
（μg/mL） （μg/mL） （μg/mL） 丁香酸 0.531 1 38.57 18.52 56.78 98.33 99.11 2.00
丁香酸 y＝0.991 5x－0.278 1 0.999 6 0.715 3～45.778 0 0.357 7 0.146 0 0.512 6 37.23 18.52 55.38 98.00
去酰基萝藦苷元 y＝0.067 1x－0.003 1 0.999 9 2.379 4～152.281 0 0.475 9 0.164 1 0.523 6 38.02 18.52 56.73 101.03
白首乌二苯酮 y＝0.659 9x－0.021 5 0.999 9 0.642 0～41.085 0 0.642 0 0.248 8 0.462 1 33.56 37.04 71.10 101.35
青阳参苷元 y＝0.225 7x－1.452 6 0.999 4 14.541 6～930.662 0 2.423 6 0.833 3 0.464 5 33.73 37.04 71.40 101.70
0.471 2 34.22 37.04 71.18 99.78
2.5.7 精密度试验 取“2.5.3”项下供试品溶液（编号 0.455 1 33.05 55.56 86.36 95.95
S7），按“2.5.1”项下色谱条件连续进样测定6次，记录峰 0.461 2 33.49 55.56 87.49 97.19
0.452 1 32.83 55.56 87.65 98.67
面积。结果显示，丁香酸、去酰基萝藦苷元、白首乌二苯
去酰基萝藦苷元 0.531 1 180.90 86.52 264.80 96.97 98.54 2.21
酮、青阳参苷元峰面积的 RSD 分别为 1.00％、2.20％、 0.512 6 174.60 86.52 259.80 98.47
1.80％、0.54％（n＝6），表明方法精密度良好。 0.523 6 178.40 86.52 265.40 100.55
2.5.8 重复性试验 取隔山消药材（编号 S7）粉末 1.0 0.462 1 157.40 173.00 325.50 97.17
0.464 5 158.30 173.00 323.40 95.43
g，共6份，精密称定，分别按“2.5.3”项下方法制备供试品 0.471 2 160.50 173.00 329.20 97.51
溶液，再按“2.5.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积 0.455 1 155.10 259.60 408.80 97.73
并按外标法计算样品含量。结果显示，丁香酸、去酰基 0.461 2 157.10 259.60 418.70 100.77
0.452 1 154.00 259.60 419.30 102.20
萝藦苷元、白首乌二苯酮、青阳参苷元含量的 RSD 分别
白首乌二苯酮 0.531 1 70.26 31.58 101.30 98.29 96.33 2.54
为 0.67％、2.00％、2.80％、0.58％（n＝6），表明方法重复 0.512 6 67.82 31.58 99.14 99.18
性良好。 0.523 6 69.27 31.58 98.53 92.65
0.462 1 61.14 63.16 123.50 98.73
2.5.9 稳定性试验 取“2.5.3”项下供试品溶液（编号
0.464 5 61.45 63.16 123.80 98.72
S7），分别于室温下放置0、2、4、8、12、24 h时按“2.5.1”项 0.471 2 62.34 63.16 123.00 96.04
下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果显示，丁香酸、 0.455 1 60.21 94.74 149.70 94.46
0.461 2 61.02 94.74 150.20 94.13
去酰基萝藦苷元、白首乌二苯酮、青阳参苷元峰面积的
0.452 1 59.81 94.74 149.60 94.78
RSD 分别为 1.40％、1.60％、2.40％、0.98％（n＝6），表明 青阳参苷元 0.531 1 950.10 420.20 1 356.05 96.61 95.96 2.93
供试品溶液于室温下放置24 h内稳定性良好。 0.512 6 917.00 420.20 1 340.42 100.67
2.5.10 加样回收率试验 称取已知含量的隔山消药材 0.523 6 936.70 420.20 1 345.45 97.27
0.462 1 826.70 840.40 1 634.78 96.15
（编号S7）粉末，每份约0.5 g，共9份，按已知量的0.5、1、 0.464 5 831.00 840.40 1 646.96 97.09
1.5 倍精密加入与待测成分含量相当的混合对照品溶 0.471 2 843.00 840.40 1 649.10 95.92
液（按“2.5.2”项下方法配制），按“2.5.3”项下方法制备供 0.455 1 814.20 1 261.00 1 950.51 90.11
0.461 2 825.10 1 261.00 2 023.16 95.01
试品溶液，再按“2.5.1”项下色谱条件进样测定，记录峰
0.452 1 808.80 1 261.00 2 003.19 94.72
面积并计算加样回收率，结果见表6。
2.5.11 样品含量测定 取 16 批隔山消药材粉末约 1.0 表7 丁香酸等成分的含量测定结果（n＝3，μg/g）
g，分别按“2.5.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.5.1” 编号 丁香酸 去酰基萝藦苷元 白首乌二苯酮 青阳参苷元
项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按外标法计算样 S1 35.48 95.23 39.68 －
S2 90.53 567.93 109.86 2 651.58
品含量。每样品平行测定3次，取平均值，结果见表7。
S3 91.15 270.91 160.37 2 028.24
3 讨论 S4 44.54 372.47 175.55 1 927.84
3.1 提取溶剂及提取方法的选择 S5 40.57 583.10 16.91 592.02
S6 64.24 388.74 43.14 1 882.52
在前期预实验中，本课题组分别考察了不同提取溶
S7 72.62 340.70 132.30 1 788.63
剂（水、30％乙醇、50％乙醇、70％乙醇、乙醇、30％甲醇、 S8 23.55 － 43.22 3 587.15
50％甲醇、70％甲醇、甲醇）对隔山消药材指纹图谱的影 S9 139.90 331.30 210.88 3 442.71
S10 71.83 377.09 97.40 2 189.82
响。结果发现，当以 30％乙醇为提取溶剂时，各成分色
S11 76.27 456.91 120.33 211.68
谱峰的响应和峰形均较好，基线较平稳，故选择 30％乙 S12 147.80 428.96 35.94 3 383.63
[19]
醇为提取溶剂。崔乐伟 采用HPLC法测定了不同批次 S13 42.19 525.93 168.57 2 323.79
S14 83.40 378.85 199.83 1 923.51
断节参中青阳参苷元含量，当回流提取溶剂中加入盐酸
S15 17.12 548.12 31.16 1 395.33
时，青阳参苷元等活性成分的色谱响应更强。基于此， S16 41.85 309.63 33.16 2 465.47
本研究参考上述文献的方法，考察了提取溶剂中加盐酸 平均值 67.69 398.39 101.14 2 119.59
与不加盐酸对各成分色谱响应的影响。结果显示，与不 －：低于定量限

·678 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 6 中国药房 2022年第33卷第6期