Page 47 - 《中国药房》2022年6期

甲、灰毡毛忍冬皂苷乙等 [4－5] ，具有修复和愈合骨损伤的 表1 6批续断药材的来源信息
作用 [6－7] ，尤以川续断皂苷Ⅵ的研究较为深入。现代药 编号 产地/购买地 编号 产地/购买地
理研究表明，川续断皂苷Ⅵ可通过抑制软骨基质蛋白多 S-01 贵州威宁彝族回族苗族自治县 S-04 成都荷花池药材市场
S-02 贵州修文县 S-05 广州清平药材市场
糖分解来降低关节腔内炎症介质的表达，从而阻止关节
S-03 贵阳太升药材市场 S-06 安徽亳州药材市场
软骨形态改变，延缓关节退变 [8－10] 。环烯醚萜类化合物
的主要成分为当药苷、马钱苷酸、马钱子苷、续断苷 A、 2 方法与结果
2.1 色谱条件
续断苷 B、林生续断苷Ⅰ等 ，具有促进骨伤愈合、改善
[4]
以 Symmetry C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱
®
学习记忆、提高脑组织抗氧化的作用 [10－12] 。
柱，以乙腈（A）-0.1％磷酸溶液（B）为流动相进行梯度洗
2020 年版《中国药典》（一部）规定了续断药材中川
脱（0～5 min，10％A；5～12 min，10％A→13.3％A；12～
续断皂苷Ⅵ的含量不得少于2.0％，同时亦规定了水分、
23 min，13.3％A；23～45 min，13.3％A→37％A；45～55
总灰分、酸不溶性灰分分别不得过 10.0％、12.0％、
min，37％A）；检测波长为 212 nm（川续断皂苷Ⅵ）、237
3.0％，水溶性浸出物不得少于45.0％ 。此外，有学者对
[1]
nm（续断苷 B、续断苷 A、当药苷、马钱苷酸、林生续断
续断的质量进行了评价：冯汪银等 以川续断皂苷Ⅵ为
[13]
苷Ⅰ、马钱子苷）；柱温为30 ℃；流速为1.0 mL/min；进样
质量评价指标，比较了不同等级续断药材的质量差异；
量为20 μL。
[14]
魏庆红等 以川续断皂苷Ⅵ和总皂苷含量为评价指标，
2.2 溶液的制备
探讨了不同加工工艺对续断药材质量的影响。但上述
2.2.1 供试品溶液 取续断药材样品细粉，约 0.5 g，精
研究的评价指标较为单一，不能全面表征药材的整体质
密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入20％乙醇25 mL，
量；加之续断药材所含药效成分复杂，除川续断皂苷Ⅵ
密塞，称定质量，浸泡 30 min 后超声（功率 100 W，频率
外，马钱苷酸、马钱子苷、当药苷、续断苷A、续断苷B及
40 kHz）处理 30 min，放冷，再次称定质量，用 20％乙醇
林生续断苷Ⅰ这6个环烯醚萜类成分在续断药材中的含
补足减失的质量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5 mL，置
量也较高，且目前尚未见基于环烯醚萜类成分的质量报
于25 mL量瓶中，用20％乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。
道。基于此，本研究拟采用高效液相色谱（high perfor-
2.2.2 对照品溶液 取各对照品适量，精密称定，用甲
mance liquid chromatography，HPLC）法建立同时测定续
醇溶解，制成马钱苷酸、马钱子苷、当药苷、林生续断
断药材中6个环烯醚萜类成分（马钱苷酸、马钱子苷、当
苷Ⅰ、续断苷 B、续断苷 A、川续断皂苷Ⅵ质量浓度分别
药苷、续断苷 B、续断苷 A 及林生续断苷Ⅰ）和 1 个三萜
为 6.654、2.012、2.412、1.080、0.970、2.032、3.156 mg/mL
皂苷类成分（川续断皂苷Ⅵ）含量的方法，旨在为续断药
的单一对照品储备液。分别精密吸取上述各单一对照
材的质量控制提供参考。
品储备液 1.5、0.9、0.8、0.9、0.4、0.8、0.4 mL，置于同一 20
1 材料
mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，得马钱苷酸、马钱
1.1 主要仪器 子苷、当药苷、林生续断苷Ⅰ、续断苷 B、续断苷 A、川续
本研究所用主要仪器有e2695型HPLC仪及配备的 断皂苷Ⅵ质量浓度分别为 499.05、90.54、96.48、48.60、
四元梯度输液泵、二极管阵列检测器、自动进样器和柱 19.40、81.28、63.12 µg/mL的混合对照品溶液。
温箱（美国 Waters 公司），ME204 型电子分析天平[梅特 2.2.3 空白溶剂 以20％乙醇为空白溶剂。
勒-托利多仪器（上海）有限公司]，101-2AB 型超声清洗 2.3 系统适用性试验
机（天津市泰斯特仪器有限公司）等。 取“2.2”项下混合对照品溶液、供试品溶液、空白溶
1.2 主要药品与试剂 剂，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图，详见图
马钱苷酸、马钱子苷、当药苷、林生续断苷Ⅰ、续断 1。由图1可知，在该色谱条件下，理论板数按马钱苷酸
苷B、续断苷A、川续断皂苷Ⅵ对照品均由山东省分析测 峰计均不低于 5 000，各色谱峰与相邻色谱峰的分离度
试中心制备，通过核磁共振氢谱（H nuclear magnetic 均大于1.5，各成分测定不受其他组分的干扰，空白溶剂
1
resonance，H-NMR）、核磁共振碳谱（ C nuclear magne- 对测定无干扰。
1
13
tic resonance，C-NMR）、质谱（mass spectrometry，MS） 2.4 线性关系考察
13
法验证结构，并经 HPLC 法检测纯度均大于 98％（面积 精密吸取“2.2.2”项下马钱苷酸对照品储备液 0.9、
归一化法）；乙腈、甲醇均为色谱纯，乙醇、磷酸均为分析 1.2、1.5、1.8、2.1 mL，置于 15 mL 量瓶中，用甲醇稀释至
纯，水为重蒸馏水。 刻 度 ，制 得 质 量 浓 度 分 别 为 399.24、532.32、665.40、
6批续断药材（编号S-01～S-06）经贵州中医药大学 798.48、931.56 µg/mL的马钱苷酸系列工作溶液；精密吸
药学院江维克教授鉴定为川续断科植物川续断 D. 取马钱子苷对照品储备液0.5、0.7、0.9、1.1、1.5 mL，置于
asper Wall. ex Henry 的干燥根。6 批续断药材的来源信 20 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，制得质量浓度分别为
息见表1。 50.30、70.42、90.54、110.66、150.90 µg/mL 的马钱子苷系

中国药房 2022年第33卷第6期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 6 ·681 ·