Page 49 - 《中国药房》2022年6期

算样品含量。结果显示，马钱苷酸、马钱子苷、当药苷、 2.9 样品含量测定
林生续断苷Ⅰ、续断苷 B、续断苷 A、川续断皂苷Ⅵ含量 精密称取 6 批续断药材粉末，各约 0.5 g，按“2.2.1”
的 RSD 分别为 1.20％、1.70％、1.78％、1.58％、1.78％、 项下方法制备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样
0.44％、1.36％（n＝6），表明方法重复性良好。 测定，记录峰面积并按标准曲线法计算样品含量（质量
2.8 加样回收率试验 浓度若超出线性范围，则适当稀释或浓缩）。每样品平
取已知含量的续断药材（编号 S-01）粉末，每份约 行操作5次，取平均值，结果见表4。
0.25 g，共6份，精密称定，置于100 mL锥形瓶中，分别精 表 4 6 批续断药材中马钱苷酸等成分的含量测定结果
密加入“2.2.2”项下各单一对照品储备液 5.5、2.6、2.9、 （n＝5，mg/g）
1.6、1.1、2.1、2.6 mL，按“2.2.1”项下方法制备供试品溶 编号 马钱苷酸 马钱子苷 当药苷 林生续断苷Ⅰ 续断苷B 续断苷A 川续断皂苷Ⅵ 总含量
液，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并计 S-01 147.4 21.4 28.0 7.2 4.4 17.2 32.6 258.2
S-02 223.0 28.3 112.9 13.5 8.3 34.2 54.5 474.7
算加样回收率，结果见表3。 S-03 190.6 16.0 47.2 35.8 4.9 19.7 8.8 323.0
表3 马钱苷酸等成分的加样回收率试验结果（n＝6） S-04 280.6 49.0 82.4 25.4 11.3 44.8 32.7 526.2
S-05 142.5 5.5 30.7 19.9 15.0 79.3 12.6 305.5
称样量/ 已知量/ 加入量/ 测得量/ 加样回收率/ 平均加样回收率/ RSD/ S-06 222.8 26.5 57.3 10.9 16.9 72.4 0.8 407.6
待测成分
g mg mg mg ％ ％ ％
平均值 201.2 24.5 59.8 18.8 10.1 44.6 23.7 382.5
马钱苷酸 0.251 3 37.041 6 36.597 0 75.508 7 105.11 104.43 0.63
0.252 8 37.262 7 36.597 0 75.755 4 105.18 3 讨论
0.252 7 37.248 0 36.597 0 75.246 6 103.83 本课题组采用二极管阵列检测器在190～800 nm波
0.253 1 37.306 9 36.597 0 75.649 6 104.77
0.252 9 37.277 5 36.597 0 75.294 4 103.88 长范围内对7个待测成分进行扫描后发现，马钱苷酸、马
0.253 5 37.365 9 36.597 0 75.364 6 103.83 钱子苷、当药苷、林生续断苷Ⅰ、续断苷 B、续断苷 A、川
马钱子苷 0.251 6 5.384 2 5.231 2 10.676 6 101.17 101.74 1.11 续断皂苷Ⅵ的最大吸收波长分别为 236、238、246、237、
0.250 5 5.360 7 5.231 2 10.737 3 102.78
0.250 5 5.360 7 5.231 2 10.689 7 101.87 236、237、212 nm；为了检测方便并能有效反映各成分含
0.251 5 5.382 1 5.231 2 10.787 0 103.32 量，暂定川续断皂苷Ⅵ的检测波长为 212 nm；马钱苷酸
0.250 2 5.354 3 5.231 2 10.628 4 100.82 等其余 6 个成分的检测波长为 237 nm。预实验结果显
0.253 4 5.422 8 5.231 2 10.678 0 100.46
当药苷 0.251 8 7.050 4 6.994 8 14.022 1 99.67 100.76 1.06 示，与在相应最大吸收波长条件下所得结果比较，在上
0.252 3 7.064 4 6.994 8 14.040 3 99.73 述波长条件下所得各成分含量均无显著差异，故选择川
0.253 3 7.092 4 6.994 8 14.134 8 100.68 续断皂苷Ⅵ的检测波长为212 nm，马钱苷酸等其余6个
0.251 0 7.028 0 6.994 8 14.149 4 101.81
0.249 8 6.994 4 6.994 8 14.018 6 100.42 成分的检测波长为237 nm。系统适用性试验结果显示，
0.250 8 7.022 4 6.994 8 14.175 3 102.26 在该条件下，各色谱峰分离度良好、基线平稳。同时，本
林生续断苷Ⅰ 0.250 7 1.805 0 1.728 0 3.516 3 99.03 98.00 1.58 课题组考察了乙腈-水、乙腈-0.1％磷酸溶液 2 种流动相
0.250 3 1.802 2 1.728 0 3.515 8 99.17
0.252 4 1.817 3 1.728 0 3.505 2 97.68 体系的分离效果。结果显示，以乙腈-水为流动相时，续
0.251 7 1.812 2 1.728 0 3.492 5 97.24 断苷B、续断苷A的色谱峰峰形欠佳且分离度较差；以乙
0.252 2 1.815 8 1.728 0 3.534 9 99.48 腈-0.1％磷酸溶液为流动相时，马钱苷酸等 7 个成分均
0.252 9 1.820 9 1.728 0 3.469 7 95.42
续断苷B 0.251 0 1.104 4 1.067 0 2.127 1 95.85 99.03 2.31 能较好地分离，且出峰时间稳定，故选择乙腈-0.1％磷酸
0.251 0 1.104 4 1.067 0 2.190 2 101.76 溶液为流动相。此外，本课题组前期通过单因素实验比
0.251 9 1.108 4 1.067 0 2.147 6 97.39 较了不同体积分数（10％、20％、30％、40％、50％、75％、
0.251 9 1.108 4 1.067 0 2.156 4 98.22
0.251 7 1.107 5 1.067 0 2.172 0 99.77 95％）乙醇超声和回流的提取效果及对方法学考察的影
0.251 2 1.105 3 1.067 0 2.184 9 101.18 响。结果显示，当以 10％乙醇为溶剂时，方法的重复性
续断苷A 0.250 3 4.305 2 4.267 2 8.740 5 103.94 102.93 2.26 较差；当以 20％乙醇为溶剂时，马钱苷酸等 7 个成分含
0.249 9 4.298 3 4.267 2 8.772 9 104.86
0.252 1 4.336 1 4.267 2 8.742 4 103.26 量和方法稳定性均较优。同时，笔者发现，超声提取和
0.251 6 4.327 5 4.267 2 8.672 0 101.81 回流提取的效果相当，从操作的简便性和方法的重复性
0.250 2 4.303 4 4.267 2 8.781 0 104.93 考虑，本研究选择超声提取。在此基础上，本课题组还
0.252 1 4.336 1 4.267 2 8.552 1 98.80
川续断皂苷Ⅵ 0.250 3 8.159 8 8.205 6 16.524 6 101.94 102.31 1.00 考察了不同超声处理方式（浸泡 30 min 后超声处理、直
0.250 3 8.159 8 8.205 6 16.528 7 101.99 接超声处理）、提取时间（50、40、30、20 min）对提取效果
0.250 8 8.176 1 8.205 6 16.485 9 101.27 的影响。结果发现，将药材浸泡30 min后再超声处理的
0.251 7 8.205 4 8.205 6 16.598 1 102.28
0.251 0 8.182 6 8.205 6 16.739 4 104.28 提取率和方法的重复性均优于直接超声处理；提取20～
0.249 7 8.140 2 8.205 6 16.517 3 102.09 50 min 时，马钱苷酸等 7 个成分的含量无显著差异。综

中国药房 2022年第33卷第6期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 6 ·683 ·