Page 44 - 《中国药房》2022年2期
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艺筛选的关键       [11－12] 。熵权法是一种从实际数据出发，利               560、75、50 μL，置于同一 1 mL 量瓶中，用甲醇定容，混
        用指标值来反映客观信息，从而确定权重的客观赋权                             匀，制得上述成分质量浓度分别为840、150、50 μg/mL的
        法 [13－14] 。基于此，本研究采用高效液相色谱（high perfor-             混合对照品溶液。
        mance liquid chromatography，HPLC）法测定了盐橘核中           2.1.2  线性工作溶液的制备           分别精密量取“2.1.1”项
        柠檬苦素、诺米林、黄柏酮的含量；采用色彩色差计对样                           下柠檬苦素单一对照品贮备液 360、460、560、660、760
        品的颜色进行客观、数字化处理；采用 DPPH 自由基清                         μL，诺米林单一对照品贮备液25、50、75、100、125 μL，黄
        除法测定样品的抗氧化活性；以水盐比例、闷润时间、炒                           柏酮单一对照品贮备液 10、30、50、70、90 μL，置于 1 mL
        制温度、炒制时间为考察因素，上述各成分含量、色差                            量瓶中，用甲醇定容，制得柠檬苦素质量浓度分别为
        值、抗氧化活性为指标，采用熵权法进行综合评价，结合                           540、690、840、990、1 140 μg/mL，诺米林质量浓度分别为
        星点设计-响应面法优化橘核的盐炙工艺，旨在为橘核                            50、100、150、200、250 μg/mL，黄柏酮质量浓度分别为
        炮制工艺探索及盐橘核的质量评价提供参考。                                10、30、50、70、90 μg/mL的线性工作溶液。
        1 材料                                                2.1.3  供试品溶液的制备          取盐橘核样品适量，粉碎，
        1.1 主要仪器                                            过三号筛（下同），取粉末1 g，置于50 mL具塞锥形瓶中，
            本研究所用主要仪器有 LC-20A 型 HPLC 仪及配备                   加甲醇 15 mL，称定质量，超声（功率 300 W，频率 50
        的 SPD-20A 型 检 测 器 、CTO-10ASVP 型 柱 温 箱 、LC           kHz）提取 40 min，取出，冷却，再次称定质量，用甲醇补
        Solution 1.26 色谱工作站（日本 Shimadzu 公司），R-410           足减失的质量，摇匀，静置，经0.45 μm微孔滤膜滤过，取
        型色彩色差计及配套的白色校正板、粉末测试盒（日本                            续滤液，即得。
        Konica Minolta 公司），FLUKE-63 型非接触红外测温仪               2.1.4  色谱条件     以中谱红RD-C18 （250 mm×4.6 mm，5
        （美国 Fluke 公司），1530 型 Multiskan SkyHigh 全波段微         μm）为色谱柱，以甲醇（A）-0.3％磷酸溶液（B）为流动相
        孔板酶标仪[赛默飞世尔科技（中国）有限公司]，JP-105A                      进行梯度洗脱（0～3.5 min，5％A→6％A；3.5～5 min，
        型高速多功能粉碎机（永康市久品工贸有限公司），                             6％ A；5～8 min，6％ A→12％ A；8～15 min，12％ A→
        JN18C1 型 电 陶 炉（浙 江 欧 奔 智 能 科 技 有 限 公 司），            45％A；15～30 min，45％A→65％A；30～40 min，65％A→
        KQ-300DE 型超声波清洗仪（上海凌科实业发展有限公                        70％A；40～45 min，70％A→95％A）；检测波长为 210
        司）等。                                                nm；流速为0.8 mL/min；柱温为30 ℃；进样量为20 μL。
        1.2  主要药品与试剂                                        2.1.5  系统适用性试验         精密吸取上述混合对照品溶
            橘核饮片（批号20191103）于2019年11月购自安国
                                                            液、供试品溶液、空白对照溶液（甲醇），按“2.1.4”项下色
        市药源商贸有限公司，经广东药科大学中药学院刘基柱
                                                            谱条件进样测定，记录色谱图，详见图 1。由图 1 可见，
        副教授鉴定为芸香科植物橘 C. reticulata Blanco 的干燥
                                                            各成分分离度均大于 1.5，理论板数按柠檬苦素峰计均
        成熟种子。
                                                            不低于3 000，空白对照溶液对测定无干扰。
            柠檬苦素对照品（批号CHB190219）、诺米林对照品
                                                              800 000                            1
        （批号 CHB180315）、黄柏酮对照品（批号 CHB190126）                   600 000
        均购自成都克洛玛生物科技有限公司，纯度均大于                               AU  400 000                            2   3
                                                              200 000
        98％；DPPH 试剂（批号 D807297）购自上海麦克林生化
                                                                 0
        科技有限公司；食盐购自广东省盐业集团广州有限公                                   0   5    10  15   20  25   30  35   40  45
                                                                                     t/min
        司；磷酸、甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为蒸                                                A.混合对照品溶液
                                                              800 000
        馏水。                                                                                      1
                                                              600 000
        1.3 盐橘核的炮制                                           AU  400 000
            按2020年版《中国药典》（四部）通则“0213盐炙法”                      200 000                               2   3
                                                                 0
        炮制：取橘核50 g，加食盐1 g，拌匀，闷透，置于锅内，用                            0   5    10  15   20  25   30  35   40  45
                                                                                     t/min
                                                [15]
        文火加热至微黄并有香气逸出时，取出，放凉 。共炮                                                B.供试品溶液（编号S6）
        制得10批盐橘核样品（编号S1～S10）。                                 800 000
                                                              600 000
        2 方法与结果                                              AU  400 000
        2.1 柠檬苦素、诺米林、黄柏酮的含量测定                                 200 000
                                                                 0
        2.1.1  混合对照品溶液的制备            精密称取柠檬苦素、诺                   0   5    10  15   20  25   30  35   40  45
                                                                                     t/min
        米林、黄柏酮对照品适量，加甲醇溶解并稀释，制成上述
                                                                                  C.空白对照溶液
        成分质量浓度分别为 1.500、2.000、1.000 mg/mL 的单一                  1：柠檬苦素；2：诺米林；3：黄柏酮
        对照品贮备液；分别精密量取上述各单一对照品贮备液                             图1 混合对照品、供试品、空白对照溶液的HPLC图


        ·166 ·  China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 2                                    中国药房    2022年第33卷第2期
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