Page 39 - 《中国药房》2022年2期
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are stable and feasible. Established QAMS method is accurate and rapid. HPLC fingerprint combined with QAMS can be used for
        the quality control for Yinhuang solution for inhalation．
        KEYWORDS     Yinhuang solution for inhalation； high performance liquid chromatography； fingerprint； phenolic acids；
        quantitative analysis multi-components by single marker；content determination


            银黄制剂主要由金银花提取物和黄芩提取物组成，                         02，编号依次为 S1～S10]；黄芩苷对照品（批号 110715-
        具有疏风解表、清热解毒之功效，可用于临床治疗外感                           201821，纯 度 95.4％）、绿 原 酸 对 照 品（批 号 110753-
        风热和肺胃热盛所致的咽干、咽痛、喉核肿大、口渴、发热、                        201817，纯度 96.8％）、3，5-二-O-咖啡酰奎宁酸对照品
        急慢性扁桃体炎、急慢性咽炎、上呼吸道感染等                  [1－2] 。该药   （批号111782-201807，纯度94.3％）、4，5-二-O-咖啡酰奎
        主要含有酚酸类和黄酮类成分，其中酚酸类成分新绿原                           宁酸对照品（批号 111894-201102，纯度 94.1％）均购自
        酸、绿原酸、隐绿原酸为金银花的主要活性成分，具有抗                          中国食品药品检定研究院；新绿原酸对照品（批号
        炎、抑菌等药理作用        [3－4] ；黄酮类成分黄芩苷为黄芩的主              DST200521-015，纯度 97.6％）、隐绿原酸对照品（批号
        要活性成分，具有抗过敏、抗炎、解热、抗肿瘤等药理作                          DST200521-035，纯度97.5％）均购自成都乐美天医药科
        用 [5－6] 。                                          技有限公司；异绿原酸 B 对照品（批号 000319-201912，
            现有银黄制剂的剂型包括颗粒剂、片剂、胶囊剂、口                        纯度 98.3％）购自江西佰草源生物科技有限公司；黄芩
        服液、注射液等      [7－8] 。相比上述传统剂型，雾化吸入制剂                提取物[盈科瑞（横琴）药物研究院有限公司实验室自
        具有起效剂量低、生物利用度高等优势，应用前景广                            制，批号2-Z-201121-01]；乙腈、磷酸均为色谱纯，其余试
          [9]
        阔 。目前，关于银黄制剂的质量标准研究多涉及指纹                           剂均为分析纯，水为超纯水。
        图谱的建立及以绿原酸为指标的含量测定                   [1－2] 。由于中    2 方法与结果
        药制剂成分复杂，仅以单一成分作为指标无法全面反映                           2.1  HPLC指纹图谱的建立
        制剂的质量。银黄吸入溶液由国内某药物研究院有限                            2.1.1  色谱条件      以 Welch Ultimate XB-C18 （250 mm×
                                                                                           ®
        公司首次研发，其工艺与银黄口服液、注射液不尽相同，                          4.6 mm，5 µm）为色谱柱，以乙腈（A）-0.4％磷酸溶液（B）
        且尚未有相关雾化吸入产品上市，因此亟需建立银黄吸                           为流动相进行梯度洗脱（0～14 min，8％A→15％A；14～
        入溶液的质量标准。指纹图谱具有特征性强、重现性好                           20 min，15％A→16％A；20～22 min，16％A→26％A；
        和可操作性强的特点，可全面系统地表征中药中各化学                           22～30 min，26％A→28％A；30～40 min，28％A→60％A）；
                         [10]
        成分及其相对含量 。一测多评（quantitative analysis               检测波长为 240 nm；柱温为 30 ℃；流速为 1.0 mL/min；
        multi-components by single marker，QAMS）法可通过单       进样量为10 μL。
        一对照品来实现对多个成分的同步测定，含量测定结果                           2.1.2  对照品溶液的制备          精密称取黄芩苷对照品适
        准确度高，还具有节约实验耗材、简化操作步骤、节省测                          量，加甲醇溶解并稀释，摇匀，制得黄芩苷质量浓度为
        定时间等优点      [11－12] 。考虑到银黄吸入溶液中新绿原酸、               0.2 mg/mL 的指纹图谱对照品溶液。另取新绿原酸、绿
        隐绿原酸对照品难以获取，检测成本较高，故本研究建                           原酸、隐绿原酸、异绿原酸 B、3，5-二-O-咖啡酰奎宁酸、
        立了银黄吸入溶液的高效液相色谱（high performance                   4，5-二-O-咖啡酰奎宁酸对照品适量，加 50％甲醇溶解
        liquid chromatography，HPLC）指纹图谱，并采用 QAMS           并稀释，摇匀，制成上述成分质量浓度分别为40、40、40、
        法同时测定了制剂中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸的含                           10、5、10 µg/mL的单一对照品溶液。
        量，旨在为银黄吸入溶液的质量控制及后续药效学研究                           2.1.3  供试品溶液的制备           精密量取银黄吸入溶液 1
        提供参考。                                              mL，置于 10 mL 棕色量瓶中，加 50％甲醇稀释并定容，
        1 材料                                               摇匀，经0.22 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
        1.1 主要仪器                                           2.1.4  精密度试验       取“2.1.3”项下供试品溶液（编号
            本研究所用主要仪器有1260 Infinity Ⅱ型HPLC仪                S2），按“2.1.1”项下色谱条件连续进样测定6次，以16号
        及配备的OpenLab CDS2.3网络版工作站、G7117A型检                  峰（黄芩苷）为参照，记录各共有峰的相对保留时间和相
        测器、G7014A 型液相泵、G7129B 型进样器、G7116B 型                对峰面积。结果显示，18个共有峰相对保留时间的RSD
        柱温箱（美国Agilent公司），SQP型十万分之一电子分析                     为 0～0.18％（n＝6），相对峰面积的 RSD 为 0.04％～
        天平[赛多利斯科学仪器（北京）有限公司]，Master-s15型                   1.19％（n＝6），表明方法精密度良好。
        纯水机（上海和泰仪器有限公司）等。                                  2.1.5  重复性试验       取银黄吸入溶液（编号 S2），共 6
        1.2 主要药品与试剂                                        份，按“2.1.3”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”项
            银黄吸入溶液[盈科瑞（横琴）药物研究院有限公                         下色谱条件进样测定，以16号峰（黄芩苷）为参照，记录
        司，批号分别为CP-201229-01、CP-201231-01、CP-210106-        各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果显示，18
        01、CP-201204-01、CP-201205-02、CP-201214-01、CP-      个共有峰相对保留时间的 RSD 为 0.05％～0.26％（n＝
        200805-05、CP-200805-06、CP-200814-04、CP-201127-     6），相对峰面积的 RSD 为 0.54％～2.31％（n＝6），表明


        中国药房    2022年第33卷第2期                                               China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 2  ·161 ·
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