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白屈菜的炮制加工生产提供参考。                                     中，精密加入盐酸-甲醇混合溶液（0.5 ∶ 100，V/V）20 mL，
        1 材料                                                称定质量，加热回流1 h，放冷，再次称定质量，用盐酸-甲
        1.1 主要仪器                                            醇混合溶液（0.5∶100，V/V）补足减失的质量，摇匀，滤过，
            本研究主要所用仪器有LC-2030型HPLC仪及配套                      精密量取续滤液10 mL，蒸干，残渣加50％甲醇使溶解，
        的四元梯度泵、紫外检测器、自动进样器、化学工作站                            转移至 10 mL 量瓶中，加入 50％甲醇至刻度，摇匀，滤
        （日本Shimadzu公司），HH-6型数显恒温水浴锅（常州市                     过，取续滤液，即得供试品溶液。
        江南实验仪器厂），MS-5 型炒货机（常州市金坛迈斯机                         2.3.4  阴性对照溶液的制备           以 50％甲醇为阴性对照
        械有限公司），DE-100型高速万能粉碎机（浙江红景天工                        溶液。
        贸 有 限 公 司），EL-204 万 分 之 一 型 电 子 分 析 天 平 、           2.3.5  系统适用性试验        取上述混合对照品溶液、供试
        AB135-S型十万分之一电子分析天平（瑞士Mettler Toledo                品溶液、阴性对照溶液各适量，按“2.3.1”项下色谱条件
        公司）等。                                               进样测定，记录色谱图，详见图 1。由图 1 可知，在该色
        1.2 药材与试剂                                           谱条件下，各成分色谱峰分离度均大于1.5，理论板数均
            白屈菜饮片（批号C18112303）购自河北仁心药业有                     大于3 000，且阴性对照对待测成分的测定无干扰。
        限公司，经长春中医药大学药学院姜大成教授鉴定为                                                    2
                                                                200
        C. majus L. 的 干 燥 全 草 ；白 屈 菜 碱 对 照 品（批 号                150
        DST190911-079）、盐酸黄连碱对照品（批号DST190913-                   mAU  100          1       3  4         5
                                                                50
        003）、血根碱对照品（批号 191115-002）、小檗碱对照品                        0
        （批 号 DST180603-009）、白 屈 菜 红 碱 对 照 品（批 号                   0    5   10   15  20   25   30  35   40
                                                                                    t，min
        34316-15-9）均购自成都德思特生物技术有限公司，纯度                                          A.混合对照品溶液
                                                                                   2
        均不低于 98％；椴树蜂蜜（批号 SC12622242612379）购                     250
        自吉林汪氏蜜蜂园有限公司；乙腈为色谱纯，其余试剂                                200                      3
                                                                150
        均为分析纯，水为超纯水。                                           mAU  100           1         4         5
                                                                50
        2 方法与结果                                                  0
                                                                  0    5   10   15  20   25   30  35   40
        2.1  炼蜜的制备                                                                  t，min
            取蜂蜜适量，用中火加热至微沸后再用文火加热，                                                B.供试品溶液
        使温度达116～118 ℃；加热至满锅起鱼眼泡、手捻有黏                            200
                                                                150
        性、两指间尚无长白丝出现，即得炼蜜。每 10.00 g 蜂蜜                         mAU  100
                      [25]
        可得炼蜜8.01 g 。                                            50
                                                                 0
        2.2  白屈菜蜜炙品的制备
                                                                  0    5   10   15  20   25   30  35   40
            取“2.1”项下所得炼蜜，用适量沸水稀释后，加入白                                               t，min
                                                                                C.阴性对照品溶液
        屈菜饮片 50.0 g，拌匀，闷润 20 min，待蜜汁渗入饮片组                      注：1.白屈菜碱；2.盐酸黄连碱；3.血根碱；4.小檗碱；5.白屈菜红碱
        织内部后，置于炒货机内炒至颜色变深、不粘手时取出，                              Note：1. chelidonine；2. coptisine hydrochloride；3. sanguinarine；4.
        放晾，即得白屈菜蜜炙品。                                        berberine；5. chelerythrine
        2.3  白屈菜蜜炙品中白屈菜碱等5种成分的含量测定                          图1   白屈菜蜜炙品中白屈菜碱等5种成分的高效液相
        2.3.1  色谱条件      以 Waters T 3-C 18 （250 mm×4.6 mm，5      色谱图
        μm）为色谱柱，以乙腈（A）-1％三乙胺溶液（用磷酸调节                        Fig 1 HPLC chromatograms of 5 components as cheli-
        pH 至 3.0，B）为流动相进行梯度洗脱（0～5 min，19％A；                       donine in honey-stir-fried C. majus
        5～15 min，19％A→23％A；15～45 min，23％A→25％A），            2.3.6  线性关系考察        取“2.3.2”项下混合对照品溶液
        柱温为 40 ℃，流速为 1.0 mL/min，检测波长为 269 nm，               1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL，分别置于10 mL量瓶中，加
        进样量为5 μL。                                           甲醇定容，摇匀，制得系列质量浓度的线性关系溶液，按
        2.3.2  混合对照品溶液的制备            取白屈菜碱、盐酸黄连            “2.3.1”项下色谱条件进样，以各待测成分质量浓度（x，
        碱、血根碱、小檗碱、白屈菜红碱对照品各适量，精密称                           μg/mL）为横坐标、峰面积（y）为纵坐标进行线性回归，结
        定，加甲醇溶解并定容至25 mL量瓶中，摇匀，制得上述                         果见表1。
        5 种 成 分 质 量 浓 度 分 别 为 501.00、1 163.80、200.60、       2.3.7  精密度试验       精密吸取“2.3.2”项下混合对照品
        50.10、100.50 μg/mL的混合对照品溶液。                         溶液适量，加甲醇稀释4倍后，按“2.3.1”项下色谱条件连
        2.3.3  供试品溶液的制备          取“2.2”项下所得白屈菜蜜             续进样测定6次，记录峰面积。结果，白屈菜碱、盐酸黄
        炙品粉末（过三号筛），约 1 g，精密称定，置于圆底烧瓶                        连碱、血根碱、小檗碱、白屈菜红碱峰面积的RSD分别为


        ·1474 ·  China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 12                                 中国药房    2021年第32卷第12期
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