Page 77 - 《中国药房》2021年12期
P. 77
管花肉苁蓉多糖水提物的分离及免疫活性研究 Δ
1
1 #
艾拉旦·麦麦提艾力 ,李 洋 ,姚 军 ,袁 洁(1.新疆医科大学药学院,乌鲁木齐 830011;2.新疆医科大
2
1*
学厚博学院,新疆 克拉玛依 834000)
中图分类号 R284.2;R285;O629.1 文献标志码 A 文章编号 1001-0408(2021)12-1479-06
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.12.12
摘 要 目的:分离管花肉苁蓉多糖水提物,考察分离物的体外免疫活性。方法:采用AB-8大孔吸附树脂法对管花肉苁蓉多糖进
行脱色,以多糖保留率和多糖脱色率为指标进行综合评分,以吸附速率、脱色时间、上样质量浓度为因素,采用正交实验优化脱色
工艺并验证。采用DEAE-650M离子交换柱层析柱对脱色后的管花肉苁蓉多糖水提物进行分离。采用CCK-8法检测不用质量浓
度(6.25~100 μg/mL)分离前、后各种多糖对小鼠巨噬细胞 RAW264.7 增殖率的影响,采用 Griess 法和酶联免疫吸附测定法检测
低、中、高质量浓度(12.5、25、50 μg/mL)分离前、后各种多糖对脂多糖(LPS)诱导 RAW264.7 细胞一氧化氮(NO)、白细胞介素 6
(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)释放量的影响。结果:AB-8大孔吸附树脂的最优脱色工艺为吸附流速1.2 BV/h,脱色时间9 h,上
样质量浓度25 mg/mL;3次验证实验的综合评分分别为63.43%、63.29%、63.34%,平均值为63.35%(RSD=0.11%,n=3)。从管
花肉苁蓉多糖水提物中分离出1种中性多糖(CTZ)和5种酸性多糖(CT1、CT2、CT3、CT4、CT5),含量分别为299.2、168.0、123.2、
121.6、54.4、11.2 mg/g。与对照组比较,6.25~100 μg/mL 的 CTZ(6.25 μg/mL 除外)、CT2、CT4、CT5 和 6.25 μg/mL 的 CTC(即分离
前的多糖)均可显著增加 RAW264.7 细胞的增殖率(P<0.05),6.25~100 μg/mL 的 CT1、CT3 和 50 μg/mL 的 CTC 均可显著降低
RAW264.7细胞的增殖率(P<0.05)。与LPS组比较,低、中、高质量浓度CTC、CT2、CT3、CT5组和低质量浓度CTZ组细胞的NO
释放量均显著降低(P<0.05),高质量浓度 CT1、CT4 组细胞的 NO 释放量均显著升高(P<0.05);低、中、高质量浓度各组细胞的
IL-6(高质量浓度CT1组和低质量浓度CT5组除外)、TNF-α释放量(中质量浓度CT1组除外)均显著降低(P<0.05)。结论:本研究
所优化的大孔吸附树脂脱色工艺稳定、可行;管花肉苁蓉多糖水提物中可分离出1种中性多糖、5种酸性多糖,其中酸性多糖CT2
的免疫活性较强。
关键词 管花肉苁蓉多糖;脱色;分离;免疫活性
Study on Separation and Immunocompetence of Water Extract of Polysaccharide from Cistanche tubulosa
Ailadan·Maimaitiaili ,LI Yang ,YAO Jun ,YUAN Jie(1. School of Pharmacy,Xinjiang Medical University,
1
1
1
2
Urumqi 830011,China;2. Collage of Houbo,Xinjiang Medical University,Xinjiang Klamayi 834000,China)
ABSTRACT OBJECTIVE:To isolate the water extract of polysaccharide from Cistanche tubulosa,and to investigate their
immunocompetence in vitro. METHODS:AB-8 macroporous adsorption resin was used to decolorize C. tubulosa polysaccharide.
The decolorization process was optimized by orthogonal test with retention rate and decolorization rate of polysaccharide as
comprehensive score,and using adsorption rate,decolorization time,sample concentration as factors. The verification tests were
conducted. DEAE-650M ion exchange column was used to separate the water extract of decolorized C. tubulosa polysaccharide.
工艺[J].中国药房,2016,27(10):1389-1392. 研究[J].中国实验方剂学杂志,2010,16(15):146-148.
[19] 吴弢,陈子珺,胡月娟,等.不同炮制方法的紫菀饮片祛痰 [22] 黄娟,欧小群,韩丽,等.蜂蜜的现代临床应用综述[J].中
作用的实验研究[J].上海中医药大学学报,2006,20(3): 国当代医药,2012,19(21):20-22.
55-57. [23] 李莉,张赛,何强,等.响应面法在试验设计与优化中的应
[20] 钟凌云,祝婧,龚千锋,等.炮制对麻黄发汗、平喘药效影 用[J].实验室研究与探索,2015,34(8):41-45.
响研究[J].中药药理与临床,2008,24(6):53-56. [24] 金晨,翟兴英,黄媛媛,等.金樱子蜜炙工艺优选及其质量
[21] 张村,殷小杰,李丽,等.白花前胡蜜炙前后的药效学比较 控制[J].中国实验方剂学杂志,2015,21(4):11-14.
[25] 刘波.中药炮制技术[M].北京:人民卫生出版社,2014:
Δ 基金项目:新疆维吾尔自治区科学技术厅天然药物活性组分与
释药技术重点实验室(No.CJDX1713);新疆维吾尔自治区研究生科研 176.
创 新 项 目(No.XJ2020G209);克 拉 玛 依 市 创 新 人 才 工 程 项 目 [26] 李筱玲,衡宁娟,邓寒霜.正交试验法优选蜜炙南五味子
(No.2019RC001A-02); 工艺条件研究[J].陕西农业科学,2017,63(12):1-3.
*硕士研究生。研究方向:药物分析。E-mail:2205118725@qq. (收稿日期:2021-02-02 修回日期:2021-05-24)
com
(编辑:陈 宏)
# 通信作者:教授,博士生导师,博士。研究方向:药物分析。
E-mail:xydyaojun@163.com
中国药房 2021年第32卷第12期 China Pharmacy 2021 Vol. 32 No. 12 ·1479 ·