Page 24 - 《中国药房》2020年22期

知母及其不同炮制品的指纹图谱建立与抗氧化活性的谱-效关系

研究 Δ

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贾毓欣 ，刘海帆 ，司明东 ，李新蕊 ，宋军娜 ，郑玉光 ，马东来 （1.河北中医学院/河北省中药炮制技术创新
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中心，石家庄 050091；2.中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所，北京 100193；3.河北省高校中药
组方制剂应用技术研发中心，石家庄 050200）
中图分类号 R282；R917 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2020）22-2706-07
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.22.04
摘 要 目的：建立知母及其不同炮制品乙醇提取物和丙酮提取物的指纹图谱，并考察其与抗氧化活性的谱-效关系。方法：分别
采用高效液相色谱法（HPLC）和高效液相色谱-蒸发光散射检测法（HPLC-ELSD），色谱条件分别为色谱柱 Thermo BDS Hypersil
C18、流动相乙腈-0.2％醋酸水溶液、流速 1.0 mL/min、柱温 30 ℃、检测波长 258 nm、进样量 10 μL 以及色谱柱 XDB-C18、流动相乙
腈-0.2％醋酸水溶液（梯度洗脱）、流速0.9 mL/min、柱温30 ℃、雾化器温度40 ℃、氮气流速1.6 mL/min、进样量10 μL。分别以芒果
苷、知母皂苷BⅡ为参照，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A版）》绘制20批知母及其炮制品乙醇提取物和丙酮提取
物的指纹图谱并进行相似度评价，标定共有峰。以1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除率为指标，考察20批知母及其炮
制品乙醇提取物和丙酮提取物的抗氧化活性。以DPPH自由基清除率为因变量、共有峰峰面积为自变量，采用偏最小二乘回归法
分别分析知母乙醇提取物和丙酮提取物与抗氧化活性的谱-效关系。结果：从20批知母炮制品乙醇提取物指纹图谱中标定出共有
峰8个（M1～M8），指认出芒果苷（色谱峰M7）；相似度为0.389～1.000；从丙酮提取物指纹图谱中标定出共有峰7个（S1～S7），指
认出知母皂苷 BⅡ（色谱峰 S5）；相似度为 0.044～0.999。20 批知母及其炮制品乙醇提取物的 DPPH 自由基清除率为 21.23％～
81.39％，生知母显著低于盐知母、酒知母（P＜0.001）；丙酮提取物的DPPH自由基清除率为49.73％～83.78％，生知母显著高于盐
知母、酒知母、炒知母（P＜0.001）。知母乙醇提取物图谱中峰M2～M7的标准化回归系数均大于0，与抗氧化活性成正相关；仅峰
M7 的变量重要性投影（VIP）值大于 1。知母丙酮提取物图谱中峰 S4～S7 的标准化回归系数均大于 0，与抗氧化活性成正相关；
VIP值大小排序依次为峰S5＞S6＞S4，且VIP值均大于1。结论：成功建立知母乙醇提取物和丙酮提取物的指纹图谱。芒果苷（峰
M7）可能是知母乙醇提取物抗氧化作用的主要药效物质；知母皂苷BⅡ（峰S5）、峰S6、峰S4可能是知母丙酮提取物抗氧化作用的
主要药效物质。
关键词 知母；乙醇提取物；丙酮提取物；抗氧化活性；谱-效关系；偏最小二乘回归法

Establishment of Fingerprint and Spectrum-effect Relationship Study on Anti-oxidantion Activity of
Anemarrhena asphodeloides and Its Different Processed Products
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JIA Yuxin ，LIU Haifan ，SI Mingdong ，LI Xinrui ，SONG Junna ，ZHENG Yuguang ，MA Donglai （1.Hebei
University of TCM/Traditional Chinese Medicine Processing Technology Innovation Center of Hebei Province，
Shijiazhuang 050091，China；2. Institute of Medicinal Plant Development，Peking Union Medical College of
Chinese Academy of Medical Sciences，Beijing 100193，China；3. Hebei Higher Education Institute Applied
Technology Research Center on TCM Formula Preparation，Shijiazhuang 050200，China）
ABSTRACT OBJECTIVE：To establish the fingerprint of ethanol extract and acetone extract from Anemarrhena asphodeloides
and its different processed products，and to investigate the spectrum-effect relationship between the fingerprint and the antioxidant
activity. METHODS：HPLC method and HPLC-ELSD method were adopted. The determination was performed on Thermo BDS
Hypersil C18 column with mobile phase consisted of acetonitrile-0.2％ acetic acid at the flow rate of 1.0 mL/min. The column
temperature was 30 ℃，and the detection wavelength was set at 258 nm. The sample size was 10 μL. The determination was
performed on XDB-C18 columnwith mobile phase consisted of
Δ 基金项目：国家自然科学基金资助项目（No.81803762）；河北省
acetonitrile-0.1％ acetic acid（gradient elution）at the flow rate
重点研发计划项目（No.19276414D）；河北省高校百名优秀创新人才支
of 0.9 mL/min. The column temperature was 30 ℃ . The
持计划（No.SLRC2019044）；河北省现代农业产业技术体系创新团队
temperature of atomizer was 40 ℃ and the flow rare of N2 was
项目（No.HBCT2018060205）；河北中医学院大学生创新创业训练计划
1.6 mL/min. The sample size was 10 μ L. Using mangiferin
立项项目（No.201814432009）
＊硕士研究生。研究方向：临床中药学。E-mail：499472038@qq. and timosaponin BⅡ as reference，Fingerprint Similarity Eva-
com luation System of TCM Chromatogram （2004A edition） was
# 通信作者：副教授，硕士生导师，博士。研究方向：中药质量分 adopted to draw the fingerprint of ethanol extract and acetone
析与控制。电话：0311-89926350。E-mail：mdl_hebei@aliyun.com extract from 20 batches of A. asphodeloidesand its different

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