Page 26 - 《中国药房》2020年22期

2 方法与结果 2.1.4 精密度试验 取同一批次的知母乙醇提取物供
2.1 知母乙醇提取物HPLC指纹图谱的建立 试品溶液（编号：Z4）适量，按“2.1.3”项下色谱条件连续

2.1.1 知母乙醇提取物供试品溶液的制备 参考 2020 进样6次，记录色谱图。结果，以芒果苷峰为参照，计算
年版《中国药典》（一部）方法 ，精密称取知母或其炮制 得各共有峰相对保留时间和相对峰面积的 RSD 分别为
[1]
0.23％和1.03％（n＝6），表明方法精密度良好。
品饮片粉末（过60目筛，下同）0.1 g，置于具塞锥形瓶中，
2.1.5 稳定性试验 取同一批次的知母乙醇提取物供
加入 70％乙醇 50 mL，称定质量，超声（功率：400 W，频
试品溶液（编号：Z4）适量，分别于室温下放置0、2、4、8、
率：40 kHz）处理30 min，放冷至室温，再次称定质量，用
16、24 h 时按“2.1.3”项下色谱条件进样测定，记录色谱
70％乙醇补足减失的质量，混匀，过 0.45 μm 滤膜，即得
图。结果，以芒果苷峰为参照，计算得各共有峰相对保
知母乙醇提取物供试品溶液。
留时间和相对峰面积的 RSD 分别为 0.19％和 1.94％
2.1.2 对照品溶液的制备 取芒果苷对照品适量，精密 （n＝6），表明知母乙醇提取物供试品溶液在室温下放置
称定，用 70％乙醇定容于 50 mL 量瓶中，制成质量浓度 24 h的稳定性良好。
为50.2 μg/mL的对照品溶液。 2.1.6 重复性试验 取同一批次样品（编号：Z4）粉末
2.1.3 色谱条件与系统适用性考察 色谱柱：Thermo 1.0 g，共 6 份，精密称定，按“2.1.1”项下方法制备乙醇提
BDS Hypersil C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙 取物供试品溶液，再按“2.1.3”项下色谱条件进样测定，
腈-0.2％冰醋酸水溶液（15 ∶ 85，V/V）；流速：1.0 mL/min； 记录色谱图。结果，以芒果苷峰为参照，计算得各共有
柱温：25 ℃；检测波长：258 nm；进样量：10 μL。取芒果 峰相对保留时间和相对峰面积的 RSD 分别为 0.20％和
苷对照品溶液、知母乙醇提取物供试品溶液（编号：Z4） 2.27％（n＝6），表明方法重复性良好。
2.1.7 知母乙醇提取物的指纹图谱研究 取 20 批知母
和阴性对照溶液（70％乙醇），按上述色谱条件进样测
及其炮制品适量，按“2.1.1”项下方法制备乙醇提取物供
定，记录色谱图。结果显示，芒果苷色谱峰与相邻色谱
试品溶液，再按“2.1.3”项下色谱条件进样测定，记录色
峰间的分离度均大于 1.50，拖尾因子介于 0.95～1.05 之
谱图。将所得色谱图导入《中药色谱指纹图谱相似度评
间；按芒果苷峰计理论板数均大于6 000，且阴性对照无
价系统（2004A版）》中，以Z1图谱为参照图谱，设置时间
干扰，详见图1。
窗口为 0.1 min，对指纹图谱中的共有峰进行多点校正，
600 匹配生成 20 批知母及其炮制品乙醇提取物的叠加指纹
500 1
400 图谱；并采用平均数法生成对照指纹图谱（R1），详见图
mAU 300 2。从20批知母及其炮制品乙醇提取物的HPLC指纹图
200
100 谱中标定出共有峰 8 个（M1～M8）；与芒果苷对照品的
0
HPLC分析结果（见图1A）对比，指认峰M7为芒果苷。
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
t，min
A.对照品溶液
180
160
140 411 M7
120 1 M3 M5
mAU 100
80
60
40 308
20
0 M2
M1 M4 M6 M8
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 R1
Z20
t，min mAU 204 Z19
Z18
B.供试品溶液 Z17
Z16
Z15
600 Z14
Z13
500 Z12
Z11
400 101 Z10
Z9
mAU 300 Z8
Z7
Z6
200 Z5
Z4
Z3
100 Z2
－1.56 Z1
0
0 2.17 4.35 6.52 8.69 10.87 13.04 15.21
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 t，min
t，min 图2 20批知母及其炮制品乙醇提取物的叠加指纹图谱
C.阴性对照溶液
注：1.芒果苷 与对照指纹图谱
Note: 1. mangiferin Fig 2 Superimposed fingerprint and control finger-
图1 HPLC图 print of ethanol extract from 20 batches of A.
Fig 1 HPLC chromatograms asphodeloides and its processed products
·2708 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 22 中国药房 2020年第31卷第22期