Page 29 - 《中国药房》2020年22期

5 000 r/min离心5 min，取上清液，用紫外-可见分光光度 提示其与抗氧化活性成正相关 ；仅色谱峰 M7（芒果
[15]
计在517 nm波长处测定吸光度（A1 ）。另用水2 mL替换 苷）的 VIP 值大于 1，提示其对抗氧化活性具有重要贡
[16]
样品溶液，与 DPPH 乙醇溶液混合后，同法测定吸光度 献 ，详见图5。
（A0 ）。用水1 mL替换DPPH乙醇溶液，与样品溶液混合
后，同法测定吸光度（A2 ）。上述试验均平行操作3次，取 1.0
平均值，并按下列公式计算DPPH自由基清除率：DPPH 0.5
自由基清除率＝（A1－A2 ）/A0×100％，结果见表4。 标准化回归系数 0
表4 20批知母及其炮制品乙醇提取物和丙酮提取物的 －0.5
抗氧化活性测定结果（％％） －1.0
Tab 4 Antioxidant activity of ethanol extract and ace-
M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8
tone extract from 20 batches of A. asphodeloi- 共有峰
A.标准化回归系数图
des and its processed products（％％）
编号 知母乙醇提取物 知母丙酮提取物 编号 知母乙醇提取物 知母丙酮提取物 3.0
Z1 36.52 ＊#Δ 81.25 ＊#Δ Z11 60.89 63.51 2.5
Z2 79.09 58.83 Z12 21.23 62.75 2.0
Z3 69.55 68.31 Z13 22.50 ＊# 79.13 ＊#Δ VIP值 1.5
Z4 65.91 61.44 Z14 74.39 68.72 1.0
Z5 27.53 ＊# 83.78 ＊#Δ Z15 69.00 67.09 0.5
Z6 76.99 59.34 Z16 31.73 62.31 0
Z7 71.73 68.36 Z17 37.51 ＊# 77.62 ＊#Δ －0.5
Z8 34.57 61.42 Z18 81.39 49.73 M7 M2 M1 M3 M5 M8 M4 M6
Z9 27.53 ＊# 80.59 ＊#Δ Z19 72.04 66.27 共有峰
Z10 81.36 60.97 Z20 34.02 61.92 B.VIP贡献图
图5 知母及其炮制品乙醇提取物的PLSR标准化回归
注：与同一来源的盐知母比较，P＜0.001；与同一来源的酒知母
＊
系数图和VIP贡献图
比较，P＜0.001；与同一来源的炒知母比较，P＜0.001
#
Δ
Fig 5 PLSR standardized regression coefficient dia-
＊
Note：vs. salt-processed A. asphodeloides from same source， P＜
gram and VIP contribution diagram of ethanol
#
0.001；vs. wine-processed A. asphodeloides from same source， P＜
Δ
0.001；vs. fired A. asphodeloides from same source，P＜0.001 extract from A. asphodeloides and its processed
由表4可知，20批知母及其炮制品乙醇提取物和丙 products
酮提取物均具有清除 DPPH 自由基的能力。乙醇提取 2.4.2 丙酮提取物的谱-效关系 知母及其炮制品丙酮
物中，盐知母的清除能力最强，酒知母的清除能力其次， 提取物图谱中，峰 S4～S7 的标准化回归系数均大于 0，
[15]
盐知母和酒知母的清除能力均高于炒知母和生知母，经 提示其与抗氧化活性成正相关 ；VIP 值排序为色谱峰
单因素方差分析发现，生知母的DPPH自由基清除率均 S5（知母皂苷BⅡ）＞S6＞S4，且VIP值均大于1，提示其
显著低于盐知母、酒知母（P＜0.001）；除了仁医堂中医 对抗氧化活性具有重要贡献 ，详见图6。
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馆的生知母和炒知母，其他来源的生知母与炒知母清除 3 讨论
DPPH 自由基的清除率比较差异无统计学意义（P＞ 知母中富含多种药效成分，本文以 2020 年版《中国
0.05）。丙酮提取物中，生知母的清除DPPH自由基能力 药典》（一部）规定的知母乙醇提取物和丙酮提取物为对
最强；经单因素方差分析发现，生知母的 DPPH 自由基 象，建立了其指纹图谱，并对其相似度进行了评价。结
清除率均显著高于盐知母、酒知母、炒知母（P＜0.001）。 果显示，20批知母及其炮制品乙醇提取物和丙酮提取物
2.4 谱-效关系分析 指纹图谱中分别标定出共有峰 8、7 个，相似度分别为
[14]
参考文献方法 ，利用SIMCA 14.1软件，以20批知 0.389～1.000、0.044～0.999，表明知母及其炮制品中化
母及其炮制品乙醇提取物或丙酮提取物的 DPPH 清除 学成分有显著差异，因此在临床应区别使用。
率为因变量，共有峰的峰面积为自变量，采用PLSR法分 本文以 DPPH 自由基的清除率为抗氧化活性的药
析，计算标准化回归系数和变量重要性投影（VIP）值，评 效学指标，分析了知母及其不同炮制品乙醇提取物和丙
价知母及其炮制品乙醇提取物和丙酮提取物与抗氧化 酮提取物的抗氧化活性。结果显示，知母不同炮制品的
活性的谱-效关系。 乙醇提取物和丙酮提取物的抗氧化能力存在显著差异，
2.4.1 乙醇提取物的谱-效关系 知母及其炮制品乙醇 盐知母乙醇提取物的抗氧化能力最强，而生知母丙酮提
提取物图谱中，峰M2～M7的标准化回归系数均大于0， 取物的抗氧化能力最强。

中国药房 2020年第31卷第22期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 22 ·2711 ·