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such as licoflavone A，glycyrrhizin and glabridin and so on in G. uralensis were significantly increased（P＜0.05 or P＜0.01），
while the contents of 5 flavonoids components such as glycyrrhizinol， glycyrin A and 2 coumarins components such as
2′-4′-trihydroxy-5-methoxy-3-coumarim and hedysarimcoumestan B were significantly decreased （P＜0.05） after honey-fried
processing. CONCLUSIONS：Before and after processing，there are obvious differences between some flavonoids and coumarins，
which may be the main material basis for differential use of raw and honey-fried G. uralensis.
KEYWORDS Raw Glycyrrhiza uralensis； Fried Glycyrrhiza uralensis； UPLC-Q-TOF-MS； Principal component analysis；
Orthogonal partial least square method；Differential compounds

甘草为豆科植物甘草（Glycyrrhiza uralensis Fisch.）、 2.2 色谱条件
胀果甘草（G. inflata Bat.）或光果甘草（G. glabra L.）的干 参考文献方法 设置本研究的色谱条件。色谱柱：
[10]
燥根及根茎，始载于《神农本草经》，具有补脾益气、止咳 Agilent ZORBAX RRHD300 SB-C18 （100 mm×2.1 mm，
[1]
平喘、清热解毒、缓急止痛、调和诸药之功，被列为上品 。 1.8 μm）；柱温：30 ℃；流动相：0.1％甲酸水溶液（A）-乙
千百年来，因其在临床上使用频次较高、药效显著而被 腈（B），梯度洗脱（0～2 min，14％B→23％B；2～10 min，
[2]
称为“药之国老”。目前，甘草的临床应用主要是生甘 23％ B→30％ B；10～11.5 min，30％ B→34％ B；11.5～
草和炙甘草两种，两者的区别在于甘草经蜜炙后药性由 12.5 min，34％B→42％B；12.5～15 min，42％B→61％B；
平转温，药效由清转补 [3-4] 。《药性赋》记载：“甘草生则分 15～17.5 min，61％B→70％B；17.5～24 min，70％B→
身梢而泻火，炙则健脾胃而和中”；《本草约言》云：“诸痈 90％B；24～25 min，90％B→14％B）；流速：0.3 mL/min；
疽疮疡，红肿未溃者，宜生用。其已溃与不红肿者，宜蜜 进样量：10 μL；扫描范围：200～600 nm全波长扫描。
炙用”。以上记载均表明，自古以来生、炙甘草应用区别 2.3 质谱条件
[5]
明显，不可互相代用 。然而，这种差异性在临床应用上 参考文献方法 设置本研究的质谱条件。离子源：
[9]
是否具有科学依据，以及其物质基础如何，尚未见相关 电喷雾离子源（ESI），正、负离子全扫描模式；毛细管电
文献报道。超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱 压：3 500 V；喷嘴电压：1 000 V；干燥气温度：200 ℃，干
（UPLC-Q-TOF-MS）作为一种快速而有效的多成分分析 燥气体积流量：11.0 L/min；雾化气温度：350 ℃，雾化气
技术，具有灵敏度高、分离能力强、检测范围广等特点， 体积流量：12.0 L/min；扫描质量范围：质荷比（m/z）50～
已被广泛应用于中药的化学成分分析 [6-7] 。因此，本研究 1 200。
拟采用 UPLC-Q-TOF-MS 技术分析生、炙甘草的化学成 2.4 样品测定及数据处理
分差异，为阐明甘草炮制前后化学成分的变化规律以及 将“2.1”项下供试品溶液按“2.2”“2.3”项下条件进样
甘草生熟异用的物质基础提供参考。 分析，记录相关图谱数据。
1 材料 2.4.1 总离子流图的建立 采用 Agilent Mass Hunter
1.1 仪器 Profinder B.06.00 软件对正、负离子模式下生、炙甘草的
1290 Infinity 型 UPLC 仪 、iFunel 6550 型 Q-TOF- 质谱原始数据进行处理。结果显示，在正、负离子模式
LC/MS系统、1290型二极管阵列检测器均购自美国Agi- 下，生、炙甘草中化学成分间均存在明显差异，这表明蜜
lent公司；KQSOODE型超声仪（昆山市超声仪器有限公 炙对甘草的化学成分具有一定的影响。总离子流图见
司）。 图1。
1.2 药品与试剂 2.4.2 化合物的鉴定 结合 METLIN、安捷伦 Mass-
生甘草（批号：1906073）和炙甘草（同批生甘草的蜜 Hunter PCDL Manager 离线成分鉴定工作站等数据库以
炙品）均由北京市双桥燕京中药饮片厂提供，经解放军 及相关参考文献 [11-13] ，对各化合物的保留时间、相对分子
总医院第五医学中心中药研究所肖小河教授鉴定，均 量等相关信息进行识别后（数据过滤参数：质量范围为
符合2015年版《中国药典》（一部）甘草和炙甘草项下标 m/z 50～1 200，校正误差为 0.100，保留时间窗口为 0.3
[8]
准 ；乙腈、甲醇、甲酸均为色谱纯，其余试剂均为分析 min），初步鉴定出了31个共有化合物。生、炙甘草中共
纯，水为纯净水。 有化合物鉴定结果见表1。
2 方法与结果 2.4.3 多元统计分析 将从质谱中导出的原始数据经
2.1 供试品溶液的制备 过 Profinder 软件处理后，共得到 2 000 个化合物的相对
参考文献方法 制备供试品溶液。分别取生甘草和 峰面积以及保留时间等相关数据，将处理后的数据以峰
[9]
炙甘草适量，粉碎。精密称取各样品粉末 1.6 g，分别置 面积为变量导入 SIMCA-P 软件中进行无监督的主成分
于 50 mL 锥形瓶中，加入 50％甲醇 20 mL 后，精密称定 （PCA）分析。结果显示，在正、负离子模式下，生、炙甘
质量；超声（功率：250 W，频率：30 kHz）提取 30 min，冷 草样本均能得到较好的分离，这表明蜜炙对甘草的化学
却，再次称质量，并用 50％甲醇补足减失的质量，摇匀； 成分产生了显著影响。生、炙甘草的PCA得分散点图见
经0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。 图2。

·1050 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 9 中国药房 2020年第31卷第9期