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has the strongest scavenging ability on superoxide anion radical and reducing ability on Fe .
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KEYWORDS Amomum tsao-ko;Ethanol extract;Polar parts;Antioxidant activity;in vitro
草果(Amomum tsao-ko Crevost et Lemarie)是姜科 (60~90 ℃)、乙酸乙酯、正丁醇、浓盐酸、三羟甲基氨基
豆蔻属多年生草本植物,主要分布于我国云南、广西、贵 甲烷(Tris)等其他试剂均购自成都市科隆化学品有限公
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州等省区 。草果是药食两用中药材大宗品种之一,主 司;水为蒸馏水。
要作为香料应用于食品加工领域,也应用于中药和其他 2 方法
领域,其主要成分有挥发油、醇类、醛类、酮类、蛋白质以 2.1 草果醇提物不同极性部位的提取
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及微量元素等 。干燥成熟的草果果实既是生活中常见 参照文献方法 ,称取草果粗粉 5 kg,加入 3 倍量
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的调味香料,也是一种传统中药,具有燥湿健脾、除痰截 95%乙醇(L/kg)加热回流提取,重复提取3次,每次2 h;
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疟的功能 。在民间,草果主要用于治疗疟疾、咽喉感 过滤,合并滤液,在约 50 ℃下旋转蒸发浓缩,再水浴蒸
染、腹痛、胃功能失调、消化不良、恶心呕吐、腹泻等,还 干 至 无 醇 味 后 ,得 醇 取 物 浸 膏 623.2 g(得 率 为
具有降血糖、抗氧化、抗肿瘤等功效 [4-6] 。近年来,随着对 12.46%)。取该醇提物浸膏适量,加入 1 倍量水(mL/g)
草果研究的深入,其药用价值日益受到国内外学者的重 分散制成混悬液,再依次加入石油醚、乙酸乙酯、正丁醇
视,其提取方法、化学成分和抗氧化活性已经成为了研 (每次均按体积比1∶1加入溶剂,多次萃取至上层有机层
究热点。 接近澄清无色后继续加入下一种溶剂提取)进行萃取。
目前,国内外关于草果化学成分的研究主要集中于 分别合并不同上层有机溶剂萃取液,并收集下层水相,
其挥发油成分 [7-9] ,关于其抗氧化活性研究则多见于草果 在约50 ℃下旋转蒸发浓缩,再水浴蒸干,分别得到石油
精油、挥发油以及醇提取物 [6,10-12] ,而草果不同溶剂提取 醚部位浸膏23.05 g(得率为3.69%)、乙酸乙酯部位浸膏
物的抗氧化活性的比较研究报道较少。基于此,本文将 18.83 g(得率为 3.02%)、正丁醇部位浸膏 12.34 g(得率
以草果干燥果实醇提物的石油醚部位、乙酸乙酯部位、 为1.98%)、水部位浸膏39.94 g(得率为6.41%)。
正丁醇部位和水部位为研究对象,通过1,1-二苯基-2-三 2.2 草果醇提物不同极性部位的抗氧化活性测定
硝基苯肼(DPPH)自由基、超氧阴离子自由基清除试验, 2.2.1 工作溶液的配制 分别称取“2.1”项下制备的 4
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以及三价铁离子(Fe )还原试验,考察草果醇提物不同 种不同极性部位浸膏以及 BHT(阳性对照)各 0.05 g,用
极性部位的体外抗氧化活性,筛选草果中具有抗氧化活 甲醇溶解并定容至50 mL,制得石油醚部位、乙酸乙酯部
性的部位,为该植物抗氧化活性成分的开发研究奠定 位、正丁醇部位、水部位以及BHT质量浓度均为1 g/L的
基础。 母液;取上述母液各适量,加甲醇分别稀释成质量浓度
1 材料 均为 0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 μg/mL 的系列工作溶液,于
1.1 仪器 4 ℃低温保存,备用。
FA1204B 型电子天平(上海天美天平仪器有限公 2.2.2 不同极性部位对 DPPH 自由基的清除能力测定
司);SHB-B88型循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸 参照文献方法 并作部分调整后,取“2.2.1”项下 4 种
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有限公司);RE-3000A 型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪 极性部位以及 BHT 工作溶液分别进行 DPPH 自由基的
器厂);DZF-6020 型真空干燥箱(广州市星烁仪器有限 清除试验。每种极性部位样品及BHT均设置11个具塞
公司);HH-Z4型数显恒温水浴锅(金坛市城东光芒仪器 比色管,编为 0~10 号:在 0 号比色管中加入 0.1 mmol/L
厂);L-530 型多管架自动平衡离心机(湖南湘仪离心机 DPPH工作溶液2 mL和无水乙醇2 mL,作为空白管;在
仪器有限公司);N4S型紫外-可见分光光度计(上海仪电 1~5 号比色管中分别加入 0.1 mmol/L DPPH 工作溶液
分析仪器有限公司)。 2 mL 和相应药物的系列工作液(0.5、1.0、2.0、3.0、4.0
1.2 药品与试剂 μg/mL)各 2 mL,作为试验管;在 6~10 号管中分别加入
草果药材购自广西玉林市,经右江民族医学院民族 无水乙醇 2 mL 和相应药物的系列工作液(0.5、1.0、2.0、
医教研室覃道光副教授鉴定为姜科豆蔻属多年生草本 3.0、4.0 μg/mL)各2 mL,作为对照管。各比色管混匀后,
植物草果(A. tsao-ko Crevost et Lemarie)的干燥果实。 在 30 ℃下避光反应 30 min。以无水乙醇进行调零,采
将其粉碎成粗粉,于通风干燥条件下贮存,备用。 用紫外-可见分光光度计在517 nm波长处测定各反应溶
2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT,上海晶纯试剂有 液的吸光度(A)值,按公式计算 DPPH 自由基清除率:
限公司,优级纯);DPPH(上海金穗生物科技有限公司); DPPH 自由基清除率(%)=[1-(A 试 验-A 对 照)]/A 空 白×
FeCl3 ·6H2O(上海实意化学试剂有限公司);邻苯三酚 100%。每种样品均重复测定3次。
(津市福晨化学试剂厂);95%乙醇、无水乙醇、石油醚 2.2.3 不同极性部位对超氧阴离子自由基的清除能力
·954 · China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 8 中国药房 2020年第31卷第8期