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钩吻总碱抑制人结肠癌细胞增殖及血管新生的作用研究 Δ

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王文义 ，檀兴慧，张萍萍，杨宇珂，黄梓泓，李德森 ，吴水生 （福建中医药大学药学院，福州 350122）
中图分类号 R285.5 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2020）08-0957-06
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.08.11

摘 要 目的：探讨钩吻总碱（TAG）抑制人结肠癌细胞增殖及血管新生的作用。方法：体外培养人结肠癌细胞HT-29和人脐静脉
内皮细胞（HUVEC），经低、中、高剂量TAG（40、80、120 μg/mL）干预后，使用倒置荧光显微镜观察两种细胞的形态，采用CCK-8法
检测两种细胞的存活率，采用流式细胞术检测HT-29细胞的周期变化情况，采用划痕试验、Transwell侵袭试验和管腔形成试验检
测HUVEC的迁移率、侵袭率和管腔数量。结果：与空白组比较，TAG各剂量组HT-29细胞和HUVEC均有不同程度的减少，并可
见死亡细胞，两者存活率均显著降低（P＜0.05或P＜0.01）；TAG各剂量组G2/M期HT-29细胞比例以及中剂量组G0/G1期细胞比例
均显著升高，而TAG各剂量组S期细胞比例以及高剂量组G0/G1期细胞比例均显著降低（P＜0.05或P＜0.01）；TAG各剂量组HU-
VEC的存活率、迁移率、侵袭率均显著降低，4～24 h各时间点管腔数量均显著减少（P＜0.01）。结论：TAG可抑制人结肠癌HT-29
细胞和HUVEC的增殖，可改变HT-29细胞的周期，并抑制HUVEC的迁移、侵袭及管腔形成。
关键词 钩吻总碱；结肠癌；HT-29细胞；人脐静脉内皮细胞；增殖；迁移；侵袭；血管新生
Study on Inhibitory Effects of Total Alkaloids of Gelsemium elegans on the Proliferation and Angiogenesis
of Human Colon Cancer Cells
WANG Wenyi，TAN Xinghui，ZHANG Pingping，YANG Yuke，HUANG Zihong，LI Desen，WU Shuisheng
（School of Pharmacy，Fujian University of TCM，Fuzhou 350122，China）

ABSTRACT OBJECTIVE： To investigate the inhibitory effects of total alkaloids of Gelsemium elegans （TAG） on the
proliferation and angiogenesis of human colon cancer cells. METHODS：Human colon cancer cell line HT-29 and HUVEC were
cultured in vitro. After the intervention of low-，medium-，high-dose TAG（40，80，120 μg/mL），the morphology of the two cells
was observed by fluorescence inversion microscope. The survival rate of HT-29 cells and HUVEC was detected by CCK-8 assay.
Flow cytometry was used to detect HT-29 cell cycle. The migration rate，invasion rate and tube number of HUVEC were observed
by scratching test，Transwell invasion experiment and tube formation experiment. RESULTS：Compared with blank group，HT-29
cells and HUVEC were decreased to different extents in TAG groups；dead cells were observed，and the survival rate of both
decreased significantly（P＜0.05 or P＜0.01）. The proportion of HT-29 cells at G2/M phase in TAG groups as well as those at G0/G1
phase in medium-dose group were increased significantly；the proportion of HT-29 cells at S phase in TAG groups as well as those
at G0/G1 phase in high-dose group were decreased significantly（P＜0.05 or P＜0.01）. Survival rate，migration rate and invasion
rate of HUVEC were decreased significantly in TAG groups，and tube number was also decreased significantly at each time point
during 4-24 h（P＜0.01）. CONCLUSIONS：TAG have inhibitory effect on the proliferation of human colon cancer HT-29 cells and
HUVEC，can change HT-29 cell cycle，inhibit the migration，invasion and tube formation of HUVEC.
KEYWORDS Total alkaloid of Gelsemium elegans；Colon cancer；HT-29 cells；HUVEC；Proliferation；Migration；Invasion；
Angiogenesis

结肠癌（Colon cancer，CRC）是常见的胃肠道恶性 Benth.]为马钱科胡蔓藤属植物，又名断肠草、大茶药、野
肿瘤，2018 年全球 CRC 患者病死率和发病率分别位列 葛以及胡蔓藤等，其具有良好的抗肿瘤、镇静、镇痛、调
[1]
恶性肿瘤的第 2、3 位 ，且目前仍无有效防治 CRC 的措 节免疫功能等多种药理活性，在肿瘤患者镇痛和肝癌患
施。中药防治 CRC 具有低毒、有效的特点，有一定的开 者生存期延长等方面具有独特的优势 [5-7] 。钩吻总碱
发价值 [2-4] 。钩吻[Gelsemium elegans（Gardn. et Champ.） （TAG）是钩吻的主要成分之一，其既为活性成分，也是
Δ 基金项目：福建省自然科学基金项目（No.2019J01342） 毒性成分。本课题组前期研究表明，TAG 能抑制 CRC
＊硕士研究生。研究方向：中药药效物质基础及其作用机制。 细胞的增殖，并可抑制人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的
E-mail：1158900410@qq.com 增殖与迁移，但具体作用及其机制尚不明确 [8-10] 。有研
# 通信作者 a：副教授，硕士。研究方向：中药药效物质基础及其 [11]
究指出，肿瘤细胞的存活与增殖依赖于血管生成 ，而
作用机制。E-mail：32134753@qq.com
钩吻及其活性成分能否影响CRC细胞的血管生成、且通
# 通信作者b：教授，博士生导师，博士。研究方向：中药药效物质
基础及其作用机制。E-mail：wushuishengwss@163.com 过何种形式调控这一个过程，尚未见相关研究报道。鉴

中国药房 2020年第31卷第8期 China Pharmacy 2020 Vol. 31 No. 8 ·957 ·