Page 22 - 2019年10月第30卷第19期

significant（P＜0.05）. Compared with model group，body weight，the levels of EF，FS and CO were increased significantly in
EPO group and HBSP group，while the contents of LVIDd and cTnI，NT-proBNP were decreased significantly；mRNA expression
of PI3K and Akt as well as protein expression of p-PI3K and p-Akt were increased significantly，above differences were statistical
significant（P＜0.05）. Compared with EPO group，the contents of cTnI and NT-proBNP were decreased significantly in HBSP
group，with statistical significance（P＜0.05）. CONCLUSIONS：HBSP can improve myocardial injury in rats as much as EPO，
and has less toxity. Their mechanism may be related to the activation of PI3K/Akt signaling pathway.
KEYWORDS Helix B surface peptide；Epirubicin；Myocardial injury；PI3K；Akt；Rat

表柔比星，又名表阿霉素，是蒽环类药物新的衍生 DH）兔单克隆抗体（上海生工生物工程有限公司，批号：
物，在临床上已成为多柔比星有效、实用的替代物。在 20180907）；磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶（Phosphoryla-
过去30年，蒽环类抗肿瘤药物的使用明显提高了肿瘤患 tion-phosphatidylinositol-3-kinase，p-PI3K）、磷酸化蛋白
者的生存率及预后 。然而，其心血管副作用限制了在 激酶 B（Phosphorylation-protein kinase B，p-Akt）兔单克
[1]
临床实践中的应用。长期使用蒽环类药物会使心肌纤 隆抗体（美国Cell signaling公司，批号：4292、9611S）；辣
[2]
维化和重塑，导致心功能障碍 。促红细胞生成素 根过氧化物酶标记山羊抗兔二抗（美国Bioworld公司）；
（Erythropoietin，EPO）对心、肾、肝、脑及视网膜等受损组 增强化学发光（ECL）液试剂盒（美国 Sigma 公司）；其余
织可发挥重要的保护作用 。然而，EPO 的红细胞生成 试剂均为分析纯，水为双蒸水。
[3]
作用可导致血栓形成、中风和高血压等副作用，明显限 1.3 动物
制了EPO的临床应用 。螺旋B表面肽（Helix B surface SPF 级 Wistar 大鼠 40 只，♂，6～8 周龄，体质量
[4]
peptide，HBSP）是衍生自 EPO 的螺旋 B 结构域的小肽， （280±20）g，购于济南朋悦实验动物繁育有限公司，实
具有与EPO相同的药动学特性，发挥相似的组织保护作 验动物生产许可证号：SCXK（鲁）20140007。本实验方
用，但其对骨髓造血系统无明显影响，无促红细胞生成 案已通过滨州医学院动物实验伦理审查。
活性，避免了 EPO 可引起的相关副作用，但其心肌保护 2 方法
的具体作用机制仍不明确 。本实验通过建立表柔比星 2.1 大鼠分组及处理
[5]
致心肌损伤模型大鼠，并给予表柔比星致心肌损伤模型 将大鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、
大鼠 EPO 及 HBSP 进行治疗，进一步验证 EPO 及 HBSP EPO 组和 HBSP 组，每组 10 只。除对照组外，其余各组
对表柔比星诱发的心肌损伤的保护作用，并初步探讨其 大鼠均腹腔注射表柔比星2.5 mg/kg，每周1次，连续6周
可能的作用机制。 复制心肌损伤模型 。EPO组和HBSP组大鼠分别腹腔
[6]
1 材料 注射rhEPO 5 000 u/kg或HBSP 60 μg/kg，每周3次，给药
1.1 仪器 时间分别为表柔比星给药前 1 天、给药后第 1 天以及给
－80 ℃低温冰箱（美国 Thermo Fisher Scientific 公 药后第3天，连续6周；对照组和模型组大鼠均以等量生
司）；SW-CJ-2FD型超净工作台（南京贝登医疗股份有限 理盐水腹腔注射6周。rhEPO和HBSP的给药剂量依据
公司）；VividE9 型彩色多普勒超声诊断仪（北京市瑞强 文献[7-8]以及预实验结果确定。
兴达医疗设备公司）；5417R 型超速离心机（德国 Eppen- 2.2 一般情况
dorf 公 司）；T-100 型 聚 合 酶 链 反 应（PCR）仪 和 Jel- 观察记录各组大鼠存活情况、体质量变化、饮水量、
doc2000型凝胶影像分析仪（美国Bio-Rad公司）。 毛色及活动情况，于第11周处死大鼠。
1.2 药品与试剂 2.3 超声心动图检测心功能
注射用盐酸表柔比星（以下简称表柔比星，海正辉 在大鼠处死前，腹腔注射水合氯醛（3 mL/kg）麻醉
瑞制药有限公司，批号：20180810，规格：10 mg）；注射用 大鼠，仰卧位固定于固定台上，使用动物剃毛器剔除大
重组人促红细胞生成素（rhEPO，昂德生物药业有限公 鼠胸毛，充分暴露胸部。采用VividE 9型彩色多普勒超
司，批号：20180802，规格：5 000 u）；HBSP（上海科肽生 声诊断仪，高频探头（12 MHz），设置深度 2 cm，取大鼠
物科技有限公司，批号：20180804，纯度：＞98％）；大鼠 胸骨旁左室短轴切面测量左室舒张末期内径（LVIDd）、
心肌肌钙蛋白 I（cTnI）、血清氨基末端 B 型利钠肽原 射血分数（EF）、缩短分数（FS）及心输出量（CO）。
（NT-proBNP）试剂盒（上海酶联生物科技有限公司，批 2.4 酶联免疫吸附法测定血清中cTnI、NT-proBNP含量
号：ML1003202、ML1003039）；总 RNA 提取试剂盒（上 在大鼠处死前，内眦静脉采血 2 mL，静置 30 min，
海生工生物工程有限公司，批号：20180617）；逆转录试剂 3 000 r/min（离心半径为3 cm）离心5 min，采用酶联免疫
盒（日本 Takara 公司，批号：RR047A）；甘油醛-3-磷酸脱 吸附法测定各组大鼠血清中 cTnI、NT-proBNP 含量，具
氢 酶（Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAP- 体检测方法严格按照试剂盒说明书进行操作。

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