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理盐水清洗、滤纸吸干后，称定其全心质量（HW，mg）和 差异均有统计学意义（P＜0.05）；而TQ低剂量组大鼠血
左心室质量（LVW，mg），并计算心脏质量指数（HW/ 清 IL-6、TNF-α含量差异均无统计学意义（P＞0.05），详
BW，mg/g）和左心室质量指数（LVW/BW，mg/g）。 见表2。
2.4 心肌组织的病理学观察 表1 PCR引物序列
随机选取“2.3”项下各组大鼠3只的心脏置于4％多 Tab 1 PCR primers
聚甲醛中，固定24 h；常规石蜡包埋、切片（约4～6 μm）、 基因名称 引物序列 扩增产物长度，bp
脱蜡、脱水，行常规 HE 染色。以中性树胶封片后，置于 Col-Ⅰ 上游：5′-CAGGGTTTCAGAGCACCATT-3′ 159
下游：5′-CGTTGGGTCATTTCCACAT-3′
光学显微镜下观察，每张切片（×200）随机取 10 个视野
Col-Ⅲ 上游：5′-GGCTCAAATGGCTCTCCAG-3′ 112
进行观察并拍照（经染色后，细胞核呈蓝色，细胞浆及其 下游：5′-GGCTCAAATGGCTCTCCAG-3′
他组织呈粉色）。 MMP-2 上游：5′-CACTGTGGGTGGAAATTCAGA-3′ 480
下游：5′-GTCCGCCAAATAAACCGATC-3′
2.5 心肌组织中氧化应激和心肌胶原指标的检测
MMP-9 上游：5′-CCCACTTACTTTG-GAAACGC-3′ 229
取各组大鼠心脏，以生理盐水清洗、滤纸吸干，取左 下游：5′-CGAAGATGAATGGAAATACGC-3′
心室近心尖1/2处心肌下部组织适量，研磨成组织匀浆， TGF-β1 上游：5′-TGCGCCTGCAGAGATTCAAG-3′ 82
下游：5′-AGGTAACGCCAGGAATTGTTGCTA-3′
检测大鼠心肌组织中氧化应激指标（MDA、SOD）和心
Smad3 上游：5′-GATGCTTCGTGACATTGGAACCTA-3′ 145
肌胶原指标（HYP、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ）的含量或活性：采用 下游：5′-TTCCCACGTTTAAATGCTGCTG-3′
化学分析法以紫外-可见分光光度计检测心肌组织中 β-actin 上游：5′-TTGTCACATGCCCTGCCAGGTC-3′ 560
下游：5′-GCTCCTTATGTCACGCAGATTC-3′
HYP、MDA含量，采用黄嘌呤氧化酶法以紫外-可见分光
表 2 TQ 对 MF 模型大鼠血清 IL-1β、IL-6、TNF-α含量
光度计检测SOD活性，采用ELISA法以酶标仪检测Col-
的影响（x±±s，n＝10）
Ⅰ、Col-Ⅲ含量，严格按照相关试剂盒说明书操作。
Tab 2 Effects of TQ on serum contents of IL-1β，IL-6
2.6 心肌组织中MF相关调控基因mRNA表达的检测
and TNF-α in MF model rats（x±±s，n＝10）
取“2.5”项下心肌下部组织适量，采用Trizol一步法
组别 IL-1β，pg/mL IL-6，pg/mL TNF-α，ng/L
提取大鼠心肌组织总 RNA，使用紫外-分光光度计测定
对照组 7.25±1.32 75.64±6.34 82.34±6.25
其纯度。将总 RNA 反转录为 cDNA，使用 Primer 5.0 软 模型组 25.48±3.11 ＊ 112.31±8.32 ＊ 125.26±8.34 ＊
件设计Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、MMP-3、MMP-9、TGF-β1、Smad3、 TQ低剂量组 12.59±1.52 # 107.23±7.44 121.36±8.56
TQ高剂量组 10.74±1.37 # 85.23±5.38 # 92.61±6.18 #
β-actin的PCR引物（其序列见表1），使用SYBR Green荧
＊
注：与对照组比较，P＜0.05；与模型组比较，P＜0.05
#
光定量PCR试剂盒、采用实时荧光定量PCR法以实时定
Note：vs. control group，P＜0.05；vs. model group，P＜0.05
#
＊
量PCR仪进行扩增。反应体系（共50 µL）：cDNA 1 µL，
3.2 TQ对MF模型大鼠心脏质量参数的影响
上、下游引物对（25 µmol/L）各 0.6 µL，2×PCR Buffer 25
与对照组比较，模型组大鼠 LVW/BW 显著增加，差
µL，20×SYBR green Ⅰ 0.3 µL，无 RNase 水 22.5 µL。反
异有统计学意义（P＜0.05）；其余指标差异均无统计学
应条件：94 ℃预变性 4 min；94 ℃变性 20 s，60 ℃退火
意义（P＞0.05）。与模型组比较，TQ高剂量组大鼠LVW/
30 s，72 ℃延伸30 s，共循环 35 次。以β-actin为内参，生
BW显著降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；其余指标
成各目的 mRNA 的标准曲线、扩增曲线及熔解曲线，采
差异均无统计学意义（P＞0.05），详见表3。
用相对比值法以 CFX Manager TM V2.1 软件计算各目的
表 3 TQ 对 MF 模型大鼠心脏质量参数的影响（x±±s，
mRNA 的相对表达量（即目的 mRNA 的 Ct 值与内参
n＝10）
mRNA的Ct值的比值，Ct值表示每个反应管内荧光信号
Tab 3 Effects of TQ on cardiac mass parameters in
强度达到设定阈值时所经历的循环数）。
MF model rats（x±±s，n＝10）
2.7 统计学方法
组别 HW/BW，mg/g LVW/BW，mg/g
采用SPSS 15.0软件对数据进行统计分析。计量资 对照组 3.85±0.12 3.02±0.16
料以 x±s 表示，采用双因素方差分析或 Dunnett-t 检验。 模型组 3.92±0.24 3.41±0.07 ＊
TQ低剂量组 3.91±0.15 3.31±0.16
检验水准α为0.05，P＜0.05为差异有统计学意义。
TQ高剂量组 3.93±0.17 3.08±0.12 #
3 结果 注：与对照组比较，P＜0.05；与模型组比较，P＜0.05
＊
#
3.1 TQ 对 MF 模型大鼠血清 IL-1β、IL-6、TNF-α含量 Note：vs. control group，P＜0.05；vs. model group，P＜0.05
#
＊
的影响 3.3 TQ对MF模型大鼠心肌组织病理变化的影响
与对照组比较，模型组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α 对照组大鼠心肌组织细胞排列整齐，横纹清晰，细
含量均显著升高，差异均有统计学意义（P＜0.05）。与 胞核大小一致；模型组大鼠心肌细胞肿胀，细胞核大小
模型组比较，TQ 低剂量组大鼠血清 IL-1β含量以及 TQ 不一，且排列紊乱，可见明显的纤维增生。与模型组比
高剂量组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量均显著降低， 较，TQ 各剂量组大鼠心肌细胞上述症状均呈不同程度
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