Page 39 - 2019年2月第30卷第4期

0.05），while SOD activity was decreased significantly（P＜0.05）. Compared with model group，the degree of myocardial fibrosis
was improved in TQ groups to different extents；serum content of IL-1β and the contents of MDA，HYP and Col-Ⅰ in cardiac
tissue in TQ low-dose group，serum contents of IL-1β，IL-6 and TNF-α，LVW/BW and the contents of MDA，HYP，Col-Ⅰ and
Col-Ⅲ in cardiac tissue of TQ high-dose group as well as mRNA expression of Col-Ⅰ，Col -Ⅲ，TGF-β 1 in TQ groups were
decreased significantly（P＜0.05）. The activities of SOD in cardiac tissue were increased significantly in TQ groups（P＜0.05）.
There was no statistical significance in other indexes among groups （P＞0.05）. CONCLUSIONS：TQ can protect against MF
model rats to certain extent，the mechanism of which may be associated with the inhibition of inflammation reaction and oxidant
stress reaction，and down-regulation of mRNA expression of Col-Ⅰ，Col-Ⅲ and TGF-β1.
KEYWORDS Thymoquinone；Lipopolysaccharide；Myocardial fibrosis；Inflammatory reaction；Oxidative stress；Regulation
genes；Rat

心肌纤维化（MF）是高血压、病毒性心肌炎、糖尿病 1.2 药品与试剂
心肌病、心力衰竭等众多心血管疾病发展至终末期的病 TQ 原料药（批号：117M3245F，纯度：＞98％）、LPS
理表现，可导致患者心肌僵硬度增加、心室舒张功能减 （批号：113M4068V）均购自美国 Sigma Aldrich 公司；
退，并引发心律失常，甚至导致猝死，是影响心血管疾病 IL-1β、IL-6、TNF-α酶联免疫吸附测定（ELISA）检测试剂
患者预后极为重要的因素之一 [1-2] 。MF的形成与转化生 盒（美 国 eBioscience 公 司 ，批 号 分 别 为 76851243、
长因子β（TGF-β）的产生和分泌、基质金属蛋白酶（MMP） 76645023、76756032）；羟脯氨酸（HYP）、SOD、MDA 检
测试剂盒，苏木精-伊红（HE）染色液、Trizol总RNA抽提
及金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP）的失衡、肾素-血管紧
试剂（南京建成生物工程研究所，批号分别为20170219、
张素-醛固酮系统（RAAS）以及炎症反应、氧化应激反应
20170105、20170213、20170806、20170103）；大鼠Ⅰ型胶
的调控等诸多机制关系密切，其中炎症反应和氧化应激
原蛋白（Col-Ⅰ）、Col-Ⅲ ELISA检测试剂盒（上海恪敏生
反应在 MF 的形成过程中发挥着极其重要的作用 [3-4] 。
物科技有限公司，批号分别为 20170223、20170125）；
此外，高脂膳食、吸烟、消耗性疾病、2型糖尿病等均可诱
SYBR Green 荧光定量 PCR 试剂盒（含 SYBR green Ⅰ、
发代谢性内毒素血症 ，而体循环中低剂量内毒素或脂
[5]
PCR Buffer、无RNase水等试剂，日本TOYOBO公司，批
多糖（LPS）的慢性刺激又可进一步诱发炎症反应和氧化
号：QPK-201T）；其余试剂均为分析纯，水为超纯水。
应激反应，造成心肌胶原纤维的过量积聚，最终导致MF 1.3 动物
的发生 。 清洁级雄性 Wistar 大鼠 40 只，4～8 月龄，体质量
[6]
黑种草（Nigella glandulifera Freyn）为毛茛科多年生 250～300 g，由成都达硕实验动物有限公司提供[生产许
草本植物。黑种草籽油是采用冷压萃取法从该植物中 可证号：SCXK（川）2015-030]。
提取的油类物质，可用于烹饪、医疗和美容，百里香醌 2 方法
（Thymoquinone，TQ）是其中的主要活性成分。近年来 2.1 分组、造模和给药
研究发现，TQ 具有抗炎和抑制氧化应激反应的药理活 将 40 只大鼠适应性喂养 1 周后，随机分为对照组、
性，可降低实验动物体内白细胞介素 1β（IL-1β）、IL-6、 模型组[LPS 1 mg/（kg·d）]和TQ低、高剂量组[LPS 1 mg/
IL-18、肿 瘤 坏 死 因 子 α（TNF-α）、超 氧 化 物 歧 化 酶 （kg·d）+TQ 5、10 mg/（kg·d），TQ 剂量设置参考文献[9]
（SOD）、丙二醛（MDA）和谷胱甘肽的含量或活性 [7-8] ，具 和本课题组前期预试验结果]，每组 10 只。除对照组大
有抗纤维化的药理基础。鉴于此，本研究通过LPS诱导 鼠腹腔注射与模型组等体积的生理盐水外，其余各组大
复制大鼠MF模型，初步探讨TQ对模型大鼠的保护作用 鼠均腹腔注射 LPS[1 mg/（kg·d）]复制 MF 模型，每天 1
次，连续3周 。自造模第1天起，各给药组大鼠均腹腔
[10]
及可能机制，以期为阐明其抗 MF 的药理作用机制提供
注射相应药物（以生理盐水为溶剂），每天 1 次，连续
参考。
3周。
1 材料
2.2 血清炎症因子的检测
1.1 仪器
末次给药后，所有大鼠均禁食 24 h，用 10％水合氯
BH-2 型光学显微镜（日本 Olympus 公司）；U-2000
醛（0.3 mL/kg）进行麻醉，于右心室取血5 mL，3 000 r/min
型紫外-可见分光光度计（日本Hitachi公司）；BS223S型
离心 10 min，分离上层血清于 EP 管中，置于 4 ℃冰箱保
电子天平[赛多利斯科学仪器（北京）有限公司]；CFX 存。采用ELISA法以酶标仪检测各组大鼠血清中IL-1β、
TM
Connect 型实时定量聚合酶链反应（PCR）仪（美国 IL-6、TNF-α含量，严格按照相关试剂盒说明书操作。
Bio-Rad 公司）；SpectraMaxM3 型酶标仪（美国 MDS 公 2.3 心脏质量参数的检测
司）；Centrifuge 5427R型台式高速冷冻离心机（德国Ep- 取血后，称定所有大鼠的体质量（BW，g）；随后将其
pendorf公司）。 处死，开胸取出心脏，除去大血管、心外膜等组织，用生

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