Page 44 - 2019年2月第30卷第4期

ABSTRACT OBJECTIVE：To establish the method for simultaneous determination of main drug contents in Nilestriol tablet and

Diethylstilbestrol tablet. METHODS：HPLC method was adopted. The determination was performed on Waters Symmetry C18
column with mobile phase consisted of 0.02 mol/L ammonium acetate water solution-acetonitrile（40 ∶ 60，V/V）at a flow rate of 1.0
mL/min. The detection wavelength was set at 280 nm，and column temperature was 35 ℃. The sample size was 20 μL. RESULTS：
The linear range of nilestriol and diethylstilbestrol were 0.01-0.5 mg/mL（r＝0.999 9）；the limits of quantitation were 187 and 192
ng/mL，and the limits of detection were 56 and 58 ng/mL. RSDs of precision，stability and reproducibility tests were all lower than
1％（n＝6）. The recoveries of them were 99.13％-100.80％（RSD＝0.52％，n＝9）and 99.20％-100.90％（RSD＝0.58％，n＝9）.
CONCLUSIONS：The method is more sensitive and reproducible，and suitable for simultaneous determination of nilestriol content
in estrogenic hormone drug Nilestriol tablets and diethylstilbestrol content in Diethylstilbestrol tablets.
KEYWORDS HPLC；Estrogenic drugs；Nilestriol；Diethylstilbestrol；Content determination

尼尔雌醇（Nilethylenol）又名戊炔雌三醇，化学名为 2 方法与结果
3-（环戊氧基）-19-去甲基-17α-孕甾-1，3，5（10）-三烯-20- 2.1 色谱条件
炔-16α，17-二醇，属于雌三醇衍生物；己烯雌酚（Diethyl- 色谱柱：Waters Symmetry C18 （250 mm ×4.6 mm，5
stilbestrol）又名丙酸己烯雌酚，化学名为（E）-4，4′-（1，2- μm）；流动相：0.02 mol/L 乙酸铵水溶液-乙腈（40 ∶ 60，
二乙基-1，2-亚乙烯基）双苯酚，是人工合成的非甾体雌 V/V）；流速：1.0 mL/min；检测波长：280 nm；柱温：35 ℃；
进样量：20 μL。
激素类药物；两者均为雌激素类处方药，临床均用于雌
2.2 溶液的制备
激素缺乏引起的绝经期或更年期综合征，其主要不良反
2.2.1 对照品溶液 精密称取尼尔雌醇对照品、己烯雌
应均为突破性出血、子宫出血等。因此，有必要严格、有
酚对照品各 100 mg，分别置于 10 mL 量瓶中，加流动相
效、精准地控制尼尔雌醇片和己烯雌酚片的质量。虽然
溶解并稀释至刻度，摇匀，即得质量浓度均为10 mg/mL
尼尔雌醇片和己烯雌酚片的现行质量标准均已收载于
的尼尔雌醇对照品贮备液和己烯雌酚对照品贮备液。
[1]
2015年版《中国药典》（二部） ，尼尔雌醇片采用紫外-可
精密量取上述对照品贮备液各 1 mL，分别置于 100 mL
见分光光度法测定含量，己烯雌酚片采用高效液相色谱
量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得尼尔雌醇对照
法（HPLC）测定含量，且与2005年版《中国药典》（二部） 品溶液和己烯雌酚对照品溶液。
完全相同 ，但其标准项目的设置及检测方法等多方面 2.2.2 供试品溶液 取尼尔雌醇片 20 片，研细，精密称
[2]
仍有待提高。为此，笔者参考相关文献 [3-12] ，建立了采用 取细粉（约相当于尼尔雌醇 10 mg）适量，置于 10 mL 量
HPLC法同时测定雌激素类药物尼尔雌醇片中尼尔雌醇 瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤
和己烯雌酚片中己烯雌酚的含量，旨在为该类药物的质 液作为尼尔雌醇供试品贮备液；精密量取上述尼尔雌醇
量控制及同类药物的一测多评提供参考。 供试品贮备液 1 mL，置于 10 mL 量瓶中，加流动相稀释
1 材料 至刻度，摇匀，即得尼尔雌醇供试品溶液。另取己烯雌

1.1 仪器 酚片 20 片，研细，精密称取细粉（约相当于己烯雌酚 10
mg）适量，置于10 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻
Waters 2695 型 HPLC 仪，包括 2489 紫外检测器、
度，摇匀，滤过，取续滤液作为己烯雌酚供试品贮备液；
e2695 四元梯度输液泵、Waters 色谱工作站（美国 Waters
精密量取上述己烯雌酚供试品贮备液1 mL，置于10 mL
公司）；XS205 型电子分析天平（瑞士 Mettle-Toledo 公
量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得己烯雌酚供试
司）。
品溶液。
1.2 药品与试剂
2.2.3 阴性样品溶液 按处方工艺分别制备缺尼尔雌
尼 尔 雌 醇 对 照 品（批 号 ：100239-200702，纯 度 ：
醇和己烯雌酚的阴性样品，并按“2.2.2”项下方法分别制
99.4％；使用前需 80 ℃减压干燥 2 h）、己烯雌酚对照品
备阴性样品溶液。
（批号：100033-200607，纯度：99.9％；使用前不需要干燥
2.2.4 系统适用性溶液 精密称取尼尔雌醇对照品、己
处理）均由中国食品药品检定研究院提供；尼尔雌醇片 烯雌酚对照品 5 mg，分别置于 10 mL 量瓶中，加 30％过
（批号：170103、170104、170105，规格：1 mg/片）、己烯雌 氧化氢溶液5 mL，于70 ℃加热10 min，分别制得尼尔雌
酚片（批号：170201、170202、170203，规格：1 mg/片）均 醇系统适用性溶液和己烯雌酚系统适用性溶液。
由 A 公司提供；乙腈为色谱纯（Fisher，美国 Scientific 公 2.3 系统适用性试验
司）；其余试剂均为分析纯，水为超纯水。 分别精密量取“2.2”项下对照品溶液、供试品溶液、

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