Page 84 - 《中国药房》2026年10期

RESULTS The linear ranges of LTG， LEV and PER were 0.15-24 μg/mL （R ＞0.993）， 0.312 5-50 μg/mL （R ＞0.997） and 6.25-
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1 000 ng/mL （R ＞0.997）， respectively. The lower limits of quantification were 0.15 μg/mL， 0.312 5 μg/mL and 6.25 ng/mL，
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respectively. RSDs of intraday and interday precision tests of the three drugs were no more than 9.83%， and the accuracies （relative
errors） were between －9.33% and 13.72%（n＝6 or n＝18）； the average extraction recovery rates were 86.4%-97.9%， and the
average matrix effects were 86.9%-110.0% （n＝6）. The absolute values of the relative errors in the stability tests were all below
15%. The steady-state trough concentrations of LTG， LEV and PER were （5.64±4.03）μg/mL， （10.67±8.78）μg/mL and（450.20±
251.27）ng/mL， respectively； the rates of achieving target trough concentrations were 71.4%， 37.5% and 84.6%， respectively.
CONCLUSIONS The established UPLC-MS/MS method is specific， rapid and suitable for the plasma concentration monitoring in
epileptic children receiving combination therapy.
KEYWORDS lamotrigine； levetiracetam； perampanel； epilepsy； children； therapeutic drug monitoring； UPLC-MS/MS method

癫痫是一类由于脑部神经元异常放电引起的反复 谱的高灵敏度、高特异性，能区分待测物与其代谢物、结
发作的慢性脑病，以儿童和老年人为主要发病人群。我 构类似物，无交叉反应，且单次进样可同时检测多种待
国癫痫患者约有 900 万例，其中儿童占 70%～80% [1―2] 。 测物，是联合用药患者血药浓度监测的理想选择 [9―10] 。
临床实践显示，50%的癫痫患者首次单用一种抗癫痫药 基于此，本研究拟建立一种同时测定癫痫患儿血浆中
物（antiepileptic drugs，AEDs）难以控制其病情发作，故 PER、LTG 和 LEV 质量浓度的 UPLC-MS/MS 法，并将其
中华医学会神经病学分会相关指南推荐在首种AEDs治 应用于临床，以期为癫痫患儿的个体化精准用药提供技
[3]
疗失败后，临床需立即考虑合理的多药联合治疗 。吡 术支撑。
仑帕奈（perampanel，PER）是一种高选择性、非竞争性α- 1 材料
氨基-3-羟基-5-甲基-4-异噁唑丙酸型谷氨酸受体拮抗 1.1 主要仪器
剂，可用于≥4 岁儿童及成人伴或不伴继发全面发作的 本研究所用主要仪器包括UPLC-Xevo TQ-S型超高
[4]
部分性发作癫痫的治疗 。PER 作用机制独特，在难治 效液相色谱-串联三重四极杆质谱仪（美国 Waters 公
[5]
性癫痫治疗中常作为添加药物与其他AEDs联合使用 。
司）、Milli-Q Advantage 型超纯水仪（美国 Millipore 公
在针对儿童患者的治疗方案中，常见的联用方案包括
司）、AB-204-N 型电子天平（瑞士 Mettler Toledo 公司）、
PER 联合左乙拉西坦（levetiracetam，LEV）、拉莫三嗪
995 型超低温冰箱（美国 Thermo Fisher Scientific 公司）、
（lamotrigine，LTG）等。研究指出，12岁以下儿童对LEV
Vortex Genie 2 型涡旋振荡仪（美国 Scientific Industries
的清除率高于成人，其血药浓度也可能异于成人，因此
公司）、Allegra 64R型高速低温离心机（美国Beckman公
当儿童患者联合使用 LEV 时，临床应密切关注 LEV 血 司）等。
药浓度以保障疗效及安全性 [6―7] ；LTG因可能引发危及生
1.2 主要药品与试剂
命的皮疹、多器官超敏反应等严重不良反应，与 PER 联
PER对照品（批号P126771，纯度98%）、LEV对照品
用时可竞争性结合血浆蛋白而导致血药浓度升高，加之
（批 号 B1528010，纯 度 99%）、LTG 对 照 品（批 号
LTG 在小于 7 岁儿童体内的血药浓度与给药剂量无
H2217428，纯度 98%）均购自上海阿拉丁生化科技股份
关 ，故临床应对儿童患者体内 LTG 的血药浓度进行实
[8]
有限公司；吡仑帕奈-D5 （PER-D5 ）对照品（内标，批号
时监测。
C20221028，纯度 100%）购自加拿大 TRC 公司；甲酸、乙
多药联合监测可提高临床检测效率、减少样本采集
腈、甲醇均为色谱纯，水为实验室自制超纯水。
量，特别是对于采血困难的儿童患者，开发能同时检测
1.3 空白血浆
多种常用 AEDs 血药浓度的方法具有一定的临床意义。
人空白血浆由苏州市吴江区儿童医院血库提供。
目前，血药浓度的检测方法主要有均相酶免疫法、荧光
免疫法、化学发光免疫法、液相色谱法和超高效液相色 2 方法与结果
谱-串联质谱（ultra-high performance liquid chromatography- 2.1 色谱与质谱条件
tandem mass spectrometry，UPLC-MS/MS）法等。其中， 以 ACQUITY UPLC HSS T3 C18 （2.1 mm×100 mm，
免疫法依靠抗体与药物的特异性结合，通过荧光、化学 1.8 μm）为色谱柱，以含0.1%甲酸的5 mmol/L乙酸铵溶
发光信号定量，待测物易受结构类似物干扰而导致检测 液为流动相 A（水相）、乙腈为流动相 B（有机相）进行梯
结果呈假阳性，加之多数试剂盒每次只能用于检测1种 度洗脱（0～1 min，5%B；1～3.5 min，5%B→95%B；3.5～
待测物，故在联合用药患者血药浓度监测中的应用受 4.5 min，95%B；4.5～4.6 min，95%B→5%B；4.6～5 min，
限；液相色谱固定相种类多、流动相选择范围广，具有较 5%B）；流速为 0.3 mL/min；柱温为 40 ℃；进样量为 5
好的选择性和重复性，但检测结果易受内源性物质干 μL；分析时间为5 min。
扰；UPLC-MS/MS法同时具备液相色谱的高分离度和质 采用电喷雾离子源，以多反应监测（multiple reac‐

· 1314 · China Pharmacy 2026 Vol. 37 No. 10 中国药房 2026年第37卷第10期