Page 58 - 《中国药房》2026年10期

醇色谱峰为参照峰，计算得到各共有峰相对保留时间的 140 16
130
RSD 为 0.04%～0.14%（n＝6），相对峰面积的 RSD 为 120
110 3
0.82%～2.90%（n＝6），表明该方法精密度良好。 100 6
90 13
（2）稳定性试验：取金刚藤胶囊粉末（编号 S1）2 g， 80 15
按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，分别于室温下放置 U/mV 70 5 12
60
50
0、2、4、6、8、10、12 h 时按“2.1”项下色谱条件进样测定， 40
30
记录色谱图。以13号氧化白藜芦醇色谱峰为参照峰，计 20
10
算得到各共有峰相对保留时间的RSD为0.04%～0.19% 0
0 5 10 15 20 25
（n＝7），相对峰面积的RSD 为0.54%～3.93%（n＝7），表 t/min
明供试品溶液在室温下放置12 h内稳定性良好。 3：绿原酸；5：M1；6：咖啡酸；12：落新妇苷；13：氧化白藜芦醇；
15：槲皮苷；16：白藜芦醇。
（3）重复性试验：取金刚藤胶囊粉末（编号 S1）2 g，
图2 混合对照品溶液色谱图
共 6 份，分别按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，按
“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图。以 13 号氧 离法进行 HCA，并绘制树状图。结果（图 3）显示，当平
化白藜芦醇色谱峰为参照峰，计算得到各共有峰相对保 方欧氏距离为 6 时，10 批样品聚为 4 类，第 1 类为 S1～
留时间的 RSD 为 0.01%～0.14%（n＝6），相对峰面积 S4，第 2 类为 S5、S6，第 3 类为 S7、S8、S10，第 4 类为 S9。
RSD为0.78%～4.52%（n＝6），表明该方法重复性良好。 这表明10批金刚藤胶囊的指纹图谱相似度较好，但化学
2.3.2 指纹图谱建立及相似度评价 成分含量可能存在一定差异。
取 10 批金刚藤胶囊粉末各 2 g，分别按“2.2.2”项下 平方欧氏距离
0 5 10 15 20 25
方法制备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样测 S7
定，记录色谱图。将所得图谱导入《中药色谱指纹图谱 S8
S10
相似度评价系统（2012版）》，以S1号样品的色谱图为参 S1
照图谱，采用中位数法，设置时间窗宽度为0.1 min，经多 S2
S3
点校正后进行 Mark 峰匹配，生成 10 批样品的叠加指纹
S4
图谱及对照图谱（图1）。结果显示，10批样品共标记出 S9
17 个共有峰。通过与混合对照品溶液色谱图（图 2）比 S5
S6
对，共指认出其中7个成分，分别为绿原酸、M1、咖啡酸、
图3 10批样品的HCA树状图
落新妇苷、氧化白藜芦醇、槲皮苷、白藜芦醇。采用《中
药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012 版）》对 10 批样 2.4.2 OPLS-DA
品进行相似度评价，结果显示，10 批样品的相似度分别 以10批样品指纹图谱中17个共有峰的峰面积为变
为 0.910、0.970、0.934、0.957、0.888、0.820、0.962、0.957、 量，采用SIMCA 14.1软件进行OPLS-DA，以探究样品间
2
0.901、0.985，各批次样品与对照图谱的相似度均大于 的差异性。结果显示，模型对X和Y矩阵的解释率（R X、
2
2
0.8，其中有8批样品的相似度大于0.9，表明大多数样品 R Y）及模型预测有效性指标（Q ）分别为 0.994、0.981、
具有较高相似度。 0.755，均大于0.5，表明该模型具有良好的解释和预测能
2 11 力，可用于不同批次金刚藤胶囊的有监督判别分析。
800 3 OPLS-DA 得分图（图 4）结果显示，10 批样品分可为 4
700 5
4 类，其中S1～S4为一类，S5、S6为一类，S7、S8、S10为一
600 7 12 13 15 16
1 9 14 17
6 8 10
500 R 类，S9为一类，与HCA结果相同。
U/mV 400 S10 1
S9
S8
300 S7 6 2
S6 4 3
200 S5 2 4
S4 0
100 S3 1.000 55＊t[2]
S2 －2
0 S1 －4
0 5 10 15 20 25 30 －6
t/min －8
－8 －6 －4 －2 0 2 4 6
图1 指纹图谱的叠加指纹图谱及对照图谱R t
图4 OPLS-DA得分图
2.4 指纹图谱的化学模式识别分析
2.4.1 HCA OPLS-DA 模型中的变量重要性投影（variable im‐
以10批样品指纹图谱中17个共有峰的峰面积为变 portance projection，VIP）值可用于筛选具有统计学意义
[12]
量，采用SPSS 22.0软件，运用组间联接法和平方欧氏距 的差异标志物。以 VIP 值＞1 为标准 ，从 17 个共有峰
· 1292 · China Pharmacy 2026 Vol. 37 No. 10 中国药房 2026年第37卷第10期