Page 36 - 《中国药房》2026年3期
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2.8 细胞中p-AMPK、AMPK、SREBP-1、GPAT蛋白表                  0.11)% 、(2.06±0.14)% 、(2.43±0.11)% 、(3.55±
          达检测                                                 0.11)%]均显著降低(P<0.05)。
              将 L02 细胞按“2.4”项下方法分组、造模与给药(接                    3.2 BYHWD及其有效部位对细胞中TG及氧化应激、
          种于6孔板中),干预24 h后,收集细胞。向细胞中加入                         肝功能指标的影响
          裂解液裂解 15 min 以提取细胞中总蛋白,采用 BCA 法                         如表 2 所示,与对照组比较,模型组细胞中 TG、
          测定蛋白浓度后,将蛋白进行变性处理,然后取变性蛋                            ALT、AST、MDA 水平均显著升高(P<0.05),SOD 水平
          白适量,上样进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电                            显著降低(P<0.05);与模型组比较,各含药血清组细胞
          泳;经转膜、封闭后,加入 p-AMPK、AMPK、SREBP-1、                   中TG、AST、MDA水平均显著降低(P<0.05),辛伐他汀
          GPAT、β-actin 一抗(稀释度分别为 1∶1 800、1∶1 200、1∶           含药血清组、BYHWD含药血清组、CC含药血清组细胞
          1 800、1∶1 000),于 4 ℃条件下孵育过夜;次日加入二抗                  中 SOD 水平均显著升高(P<0.05);与 BYHWD 含药血
         (稀释度为1∶5 000),室温孵育 2 h。滴加 ECL 发光液进                   清组比较,75YC 含药血清组细胞中 TG 水平以及 CC 含
          行显影,然后采用凝胶成像系统成像,并使用Image J软                        药血清组、30YC 含药血清组、50YC 含药血清组、75YC
          件分析蛋白条带灰度值。以目的蛋白与内参蛋白(β-actin)                      含药血清组细胞中MDA水平均显著降低(P<0.05)。
          条带的灰度值比值表示目的蛋白的表达水平;以 p-                            表2 各组细胞中 TG 及氧化应激、肝功能指标水平比
          AMPK与AMPK蛋白表达水平的比值,表示AMPK蛋白                              较(x±s,n=3)
          的磷酸化水平。                                                           TG/    ALT/   AST/   SOD/   MDA/
                                                              组别
          2.9 统计学方法                                                      (μmol/g prot)  (U/g prot)  (U/g prot)  (U/mg prot) (mmol/g prot)
                                                              对照组         49.43±3.75  3.01±0.66  24.48±2.97  8.33±0.34  1.29±0.06
              采用SPSS 25.0软件对数据进行统计分析。数据以                      模型组        116.05±7.75 a  5.60±0.96 a  28.34±1.49 a  6.89±0.06 a  6.99±0.32 a
          x±s 表示,多组间比较采用单因素方差分析,进一步组                          辛伐他汀含药血清组   70.66±12.58 b  3.95±0.61  16.39±2.96 b  7.70±0.17 b  3.51±1.43 b
                                                              BYHWD含药血清组  87.32±10.45 b  5.73±0.74  20.16±0.81 b  7.62±0.26 b  3.92±0.85 b
          间两两比较采用Tukey’s检验。检验水准α=0.05。
                                                              CC含药血清组     83.78±5.52 b  5.83±0.41  21.46±1.20 b  7.73±0.12 b  0.85±0.12 bc
          3 结果                                                30YC含药血清组   89.60±1.01 b  5.01±0.35  21.44±2.27 b  6.89±0.05  2.57±0.04 bc
                                                              50YC含药血清组   90.08±8.95 b  5.66±0.87  20.89±2.02 b  6.98±0.02  0.95±0.09 bc
          3.1 BYHWD及其有效部位对细胞中脂质沉积的影响
                                                              75YC含药血清组   71.09±5.49 bc  3.88±0.49  21.84±2.78 b  7.14±0.07  0.53±0.13 bc
              如图 1 所示,与对照组[脂滴面积占比为(1.80±
                                                                 a:与 对 照 组 比 较 ,P<0.05;b:与 模 型 组 比 较 ,P<0.05;c:与
          0.07)%]比较,模型组细胞脂肪变性严重,细胞中脂滴面                        BYHWD含药血清组比较,P<0.05。
          积占比[(10.64±0.13)%]显著升高(P<0.05);与模型组                 3.3 BYHWD及其有效部位对细胞中AMPK、SREBP-
          比较,辛伐他汀含药血清组、BYHWD 含药血清组、CC                         1、GPAT mRNA表达的影响
          含药血清组、30YC 含药血清组、50YC 含药血清组、                            如表 3 所示,与对照组比较,模型组细胞中 AMPK
          75YC 含药血清组细胞脂肪变性减轻,细胞中脂滴面积                          mRNA 表达水平显著降低(P<0.05),SREBP-1、GPAT
          占 比 [ 分 别 为(3.19±0.12)% 、(3.87±0.15)% 、(4.96±       mRNA表达水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,













                    A.对照组                    B.模型组               C. BYHWD含药血清组           D.辛伐他汀含药血清组












                  E. CC含药血清组              F. 30YC含药血清组            G. 50YC含药血清组            H. 75YC含药血清组
             注:黑色箭头所指为脂滴形成。
                                    图1 各组细胞中脂质沉积情况观察结果(油红O染色)


          · 302 ·    China Pharmacy  2026 Vol. 37  No. 3                               中国药房  2026年第37卷第3期
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