Page 36 - 《中国药房》2026年3期
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2.8 细胞中p-AMPK、AMPK、SREBP-1、GPAT蛋白表 0.11)% 、(2.06±0.14)% 、(2.43±0.11)% 、(3.55±
达检测 0.11)%]均显著降低(P<0.05)。
将 L02 细胞按“2.4”项下方法分组、造模与给药(接 3.2 BYHWD及其有效部位对细胞中TG及氧化应激、
种于6孔板中),干预24 h后,收集细胞。向细胞中加入 肝功能指标的影响
裂解液裂解 15 min 以提取细胞中总蛋白,采用 BCA 法 如表 2 所示,与对照组比较,模型组细胞中 TG、
测定蛋白浓度后,将蛋白进行变性处理,然后取变性蛋 ALT、AST、MDA 水平均显著升高(P<0.05),SOD 水平
白适量,上样进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电 显著降低(P<0.05);与模型组比较,各含药血清组细胞
泳;经转膜、封闭后,加入 p-AMPK、AMPK、SREBP-1、 中TG、AST、MDA水平均显著降低(P<0.05),辛伐他汀
GPAT、β-actin 一抗(稀释度分别为 1∶1 800、1∶1 200、1∶ 含药血清组、BYHWD含药血清组、CC含药血清组细胞
1 800、1∶1 000),于 4 ℃条件下孵育过夜;次日加入二抗 中 SOD 水平均显著升高(P<0.05);与 BYHWD 含药血
(稀释度为1∶5 000),室温孵育 2 h。滴加 ECL 发光液进 清组比较,75YC 含药血清组细胞中 TG 水平以及 CC 含
行显影,然后采用凝胶成像系统成像,并使用Image J软 药血清组、30YC 含药血清组、50YC 含药血清组、75YC
件分析蛋白条带灰度值。以目的蛋白与内参蛋白(β-actin) 含药血清组细胞中MDA水平均显著降低(P<0.05)。
条带的灰度值比值表示目的蛋白的表达水平;以 p- 表2 各组细胞中 TG 及氧化应激、肝功能指标水平比
AMPK与AMPK蛋白表达水平的比值,表示AMPK蛋白 较(x±s,n=3)
的磷酸化水平。 TG/ ALT/ AST/ SOD/ MDA/
组别
2.9 统计学方法 (μmol/g prot) (U/g prot) (U/g prot) (U/mg prot) (mmol/g prot)
对照组 49.43±3.75 3.01±0.66 24.48±2.97 8.33±0.34 1.29±0.06
采用SPSS 25.0软件对数据进行统计分析。数据以 模型组 116.05±7.75 a 5.60±0.96 a 28.34±1.49 a 6.89±0.06 a 6.99±0.32 a
x±s 表示,多组间比较采用单因素方差分析,进一步组 辛伐他汀含药血清组 70.66±12.58 b 3.95±0.61 16.39±2.96 b 7.70±0.17 b 3.51±1.43 b
BYHWD含药血清组 87.32±10.45 b 5.73±0.74 20.16±0.81 b 7.62±0.26 b 3.92±0.85 b
间两两比较采用Tukey’s检验。检验水准α=0.05。
CC含药血清组 83.78±5.52 b 5.83±0.41 21.46±1.20 b 7.73±0.12 b 0.85±0.12 bc
3 结果 30YC含药血清组 89.60±1.01 b 5.01±0.35 21.44±2.27 b 6.89±0.05 2.57±0.04 bc
50YC含药血清组 90.08±8.95 b 5.66±0.87 20.89±2.02 b 6.98±0.02 0.95±0.09 bc
3.1 BYHWD及其有效部位对细胞中脂质沉积的影响
75YC含药血清组 71.09±5.49 bc 3.88±0.49 21.84±2.78 b 7.14±0.07 0.53±0.13 bc
如图 1 所示,与对照组[脂滴面积占比为(1.80±
a:与 对 照 组 比 较 ,P<0.05;b:与 模 型 组 比 较 ,P<0.05;c:与
0.07)%]比较,模型组细胞脂肪变性严重,细胞中脂滴面 BYHWD含药血清组比较,P<0.05。
积占比[(10.64±0.13)%]显著升高(P<0.05);与模型组 3.3 BYHWD及其有效部位对细胞中AMPK、SREBP-
比较,辛伐他汀含药血清组、BYHWD 含药血清组、CC 1、GPAT mRNA表达的影响
含药血清组、30YC 含药血清组、50YC 含药血清组、 如表 3 所示,与对照组比较,模型组细胞中 AMPK
75YC 含药血清组细胞脂肪变性减轻,细胞中脂滴面积 mRNA 表达水平显著降低(P<0.05),SREBP-1、GPAT
占 比 [ 分 别 为(3.19±0.12)% 、(3.87±0.15)% 、(4.96± mRNA表达水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,
A.对照组 B.模型组 C. BYHWD含药血清组 D.辛伐他汀含药血清组
E. CC含药血清组 F. 30YC含药血清组 G. 50YC含药血清组 H. 75YC含药血清组
注:黑色箭头所指为脂滴形成。
图1 各组细胞中脂质沉积情况观察结果(油红O染色)
· 302 · China Pharmacy 2026 Vol. 37 No. 3 中国药房 2026年第37卷第3期

