Page 34 - 《中国药房》2026年3期
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increased proportion of lipid droplet area, as well as the elevated levels of TG, ALT, AST, and MDA in cells, along with
significantly up-regulated mRNA and protein expression levels of SREBP-1 and GPAT (P<0.05). The level of SOD, mRNA
expression of AMPK, as well as the protein phosphorylation level of AMPK were decreased significantly (P<0.05). Compared
with the model group, cellular steatosis was alleviated in all drug-containing serum groups, and the levels of most of the
aforementioned quantitative indicators were significantly reversed (P<0.05). CONCLUSIONS BYHWD and its active fractions
can exert a therapeutic effect on improving non-alcoholic fatty liver disease by regulating the AMPK/SREBP-1/GPAT signaling
pathway, inhibiting oxidative stress responses, and reducing lipid deposition.
KEYWORDS Buyang huanwu decoction; non-alcoholic fatty liver disease; lipid deposition; AMPK/SREBP-1/GPAT signaling
pathway; oxidative stress
非 酒 精 性 脂 肪 性 肝 病(non-alcoholic fatty liver 通路发挥改善 NAFLD 的作用尚不明确。基于此,本研
disease,NAFLD)是全球最常见的慢性肝病之一,其发 究拟先制备 BYHWD 及其醇沉有效部位(即 CC 有效部
病机制涉及多种代谢途径的紊乱,包括脂质代谢异常、 位)和 30%、50%、75% 乙醇洗脱部位(即 30YC、50YC、
胰岛素抵抗等 [1―2] 。当肝脏脂质蓄积达到一定程度时, 75YC 有效部位),并以此制备相应的含药血清;然后以
NAFLD可进展为非酒精性脂肪性肝炎、肝纤维化、肝硬 人 L02 肝细胞为研究对象,基于 AMPK/SREBP-1/GPAT
化等更为严重的病理状态,甚至会诱发部分患者进展至 信号通路探讨BYHWD及其有效部位对NAFLD的改善
[3]
肝癌,严重威胁人类健康 。然而,目前临床尚无专门针 作用及机制,以期为临床应用 BYHWD 治疗 NAFLD 提
对NAFLD的特效药物。 供实验基础。
中医认为,NAFLD 的形成与脾失健运、肝失疏泄、 1 材料
肾气亏虚密切相关;脾失健运则痰湿内生,肝失疏泄则 1.1 主要仪器
气滞血瘀,肾气亏虚则清浊不分,三者共同构成NAFLD 本研究所用主要仪器有 IX73 型倒置显微镜(日本
[4]
的核心病机 。中药因其多成分、多靶点的特点和较少 Olympus公司)、CO2培养箱[力新仪器(上海)有限公司]、
的副作用,在NAFLD治疗中表现出巨大的应用潜力,其 Infinite 200 PRO型酶标仪(瑞士Tecan公司)、HT7700型
中中药复方也在 NAFLD 治疗中日益受到关注 [5―6] 。补 透射电子显微镜(日本 Hitachi 公司)、HYQ-2121A 型涡
阳还五汤(Buyang huanwu decoction,BYHWD)是一种 旋器(美国Crystal公司)、MIKRO 220R型低温高速离心
经典的传统中药复方,出自清代《医林改错》,由黄芪、当 机(德国 Hettich 公司)、Amersham Imager 600 型凝胶成
归、赤芍、红花、川芎、桃仁和地龙组成,具有益气活血、 像系统(美国 General Electric 公司)、CFX384 型聚合酶
[7]
祛瘀通络等功效 。相关研究表明,BYHWD 对代谢性 链式反应(PCR)仪(美国Bio-Rad公司)。
[9]
[8]
疾病有潜在的益处 ,如其对脂肪肝具有改善作用 。本 1.2 主要药品与试剂
课题组前期研究也发现,BYHWD及其有效部位对高胆 黄芪、当归、川芎、赤芍、桃仁、红花、地龙药材(批号
固醇血症小鼠的脂质水平具有改善作用 。 分 别 为 220101-X、231201、20220902、230801、230301、
[10]
AMP 活 化 的 蛋 白 质 激 酶(AMP-activated protein 240301、20230801)均购自黑龙江中医药大学附属第一
kinase,AMPK)作为关键能量传感器,其被激活后可通 医院,经黑龙江中医药大学药学院吴军凯副教授鉴定均
过双重机制调控脂质代谢稳态:一方面可抑制哺乳动物 为真品。辛伐他汀片(批号 T020243,规格 20 mg)购自
雷帕霉素靶蛋白信号通路,降低脂肪细胞定向分化因子 杭州默沙东制药有限公司;RPMI 1640 培养基(批号
固 醇 调 节 元 件 结 合 蛋 白 1(sterol regulatory element- MA0215-NOV-04H)购自大连美仑生物技术有限公司;
binding protein-1,SREBP-1)的表达,减少 SREBP-1 与甘 TG、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二
油-3-磷酸酰基转移酶(glycerol-3-phosphate acyltransfer‐ 醛(malondialdehyde,MDA)、丙氨酸氨基转移酶(ala‐
ase,GPAT)基因启动子区固醇调节元件的结合,从而抑 nine amino-transferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(as‐
制脂肪酸合成和甘油三酯(triglyceride,TG)生成;另一 partate amino-transferase,AST)试 剂 盒(批 号 分 别 为
方面可直接磷酸化 SREBP-1,抑制其核转移及转录活 20221020、20240124、20240125、20231205、20231204)均
性,从而减少肝脏脂质沉积 [11―13] 。研究发现,AMPK/ 购自南京建成生物工程研究所有限公司;油红O染色试
SREBP-1/GPAT信号通路在脂质代谢平衡中发挥重要作 剂盒(批号 20220720)购自北京索莱宝科技有限公司;
用 ,与 NAFLD 的 发 病 机 制 密 切 相 关 [14―15] 。 然 而 , Serviceio 动 物 组 织/细 胞 总 RNA 提 取 试 剂 盒(批 号
BYHWD 是否可通过调控 AMPK/SREBP-1/GPAT 信号 MPC2308027)购自武汉塞维尔生物科技有限公司;兔抗
· 300 · China Pharmacy 2026 Vol. 37 No. 3 中国药房 2026年第37卷第3期

