Page 21 - 《中国药房》2025年18期
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3.1.2 骨化三醇对模型小鼠血清中炎症细胞因子水平 表2 各组细胞上清液中 TNF-α 和 IL-6 水平比较（x±
的影响 s，n＝5，pg/mL）
与假手术组比较，CLP 组小鼠血清中 TNF-α、IL-6 组别 TNF-α IL-6
Medium组 139.39±9.63 41.81±12.03
水平均显著升高（P＜0.05），IL-1β水平无显著变化（P＞ LPS组 6 262.16±288.58 a 7 007.09±558.24 a
0.05）。与 CLP 组比较，骨化三醇组小鼠血清中 TNF-α、 LPS耐受组 1 744.80±145.61 b 3 323.90±188.99 b
骨化三醇组 5 183.82±112.62 c 6 362.72±427.49 c
IL-6、IL-1β水平均显著升高（P＜0.05）。结果见表1。
a：与Medium组比较，P＜0.05；b：与LPS组比较，P＜0.05；c：与LPS
表1 各组小鼠血清中 TNF-α、IL-6、IL-1β 水平比较 耐受组比较，P＜0.05。
（x±s，n＝8，pg/mL） 3.2.3 骨化三醇对 LPS 耐受细胞中焦亡相关基因表达
组别 TNF-α IL-6 IL-1β 的影响
假手术组 32.72±1.71 121.31±15.70 55.77±0.81
CLP组 62.92±21.23 a 2 072.98±188.75 a 56.13±2.88 与 Medium 组比较，LPS 组细胞中 IL-1β、NLRP3、
骨化三醇组 139.18±52.54 b 3 694.58±765.38 b 74.45±17.20 b IL-18和caspase-1 mRNA表达量均显著升高（P＜0.05）。
a：与假手术组比较，P＜0.05；b：与CLP组比较，P＜0.05。
与 LPS 组比较，LPS 耐受组细胞中 IL-1β、NLRP3、IL-18
3.1.3 骨化三醇对模型小鼠肺组织形态学的影响 和 caspase-1 mRNA 表达量均显著降低（P＜0.05）。与
假手术组小鼠肺组织形态规则，肺泡结构清晰完 LPS 耐受组比较，骨化三醇组细胞中 IL-1β、NLRP3、IL-
整。CLP组小鼠肺组织出现不同程度的水肿、肺泡壁和 18和caspase-1 mRNA表达量均显著升高（P＜0.05）。结
肺泡间隔增厚以及炎症细胞浸润。骨化三醇组小鼠的 果见表3。
肺组织损伤较CLP组明显减轻。结果见图2。 表3 各组细胞焦亡相关基因表达比较（x±s，n＝5）
组别 IL-1β mRNA NLRP3 mRNA IL-18 mRNA caspase-1 mRNA
Medium组 1.00±0.05 1.00±0.14 1.00±0.04 1.00±0.03
LPS组 21.39±1.49 a 14.21±0.31 a 2.91±0.12 a 2.92±0.05 a
LPS耐受组 5.78±0.20 b 5.45±0.48 b 1.58±0.07 b 1.76±0.18 b
骨化三醇组 19.38±0.65 c 21.11±1.35 c 2.39±0.26 c 2.50±0.11 c
a：与Medium组比较，P＜0.05；b：与LPS组比较，P＜0.05；c：与LPS
A.假手术组 B. CLP组 C.骨化三醇组
耐受组比较，P＜0.05。
蓝色箭头：炎症细胞浸润。
图2 各组小鼠肺组织形态学显微图（HE染色） 3.2.4 骨化三醇对LPS耐受细胞焦亡相关指标的影响
与 Medium 组比较，LPS 组细胞的 PI 阳性率、cas‐
3.2 体外实验结果
pase-1 活性和 LDH 漏出率均显著升高（P＜0.05）。与
3.2.1 骨化三醇使用浓度的选择
LPS 组比较，LPS 耐受组细胞的 PI 阳性率、caspase-1 活
10、100 nmol/L和1、2、5 μmol/L骨化三醇处理组细
性和LDH漏出率均显著降低（P＜0.05）。与LPS耐受组
胞 活 性 分 别 为（96.20±2.93）% 、（96.14±2.87）% 、
比较，骨化三醇组细胞的 PI 阳性率、caspase-1 活性和
（98.01±1.61）%、（97.68±4.51）%、（96.16±2.63）%（n＝
LDH 漏 出 率 均 显 著 升 高（P＜0.05）。 结 果 见 表 4
5），与 Medium 组（细胞活性为 100%）比较，差异均无统
和图3。
计学意义（P＞0.05）；10和50 μmol/L骨化三醇处理组细
表4 各组细胞焦亡相关指标比较（x±s，n＝5）
胞活性分别为（93.20±0.45）%和（17.14±0.11）%（n＝
组别 PI阳性率/% caspase-1活性/% LDH漏出率/% Ca 荧光强度
2+
5），均显著低于 Medium 组（P＜0.05）。后续研究采用 5 Medium组 3.08±1.75 100.00 100.00 0
μmol/L骨化三醇处理RAW264.7细胞，考察其对LPS耐 LPS组 45.50±1.87 a 349.25±15.93 a 388.66±6.91 a 7.40±0.33 a
LPS耐受组 16.30±1.24 b 204.34±14.88 b 266.40±13.01 b 4.51±0.31 b
受细胞的影响。
骨化三醇组 36.71±2.03 c 257.38±21.26 c 341.12±20.66 c 6.57±0.31 c
3.2.2 骨化三醇对LPS耐受细胞上清液中TNF-α和IL- a：与Medium组比较，P＜0.05；b：与LPS组比较，P＜0.05；c：与LPS
6水平的影响 耐受组比较，P＜0.05。
2+
与 Medium 组比较，LPS 组细胞上清液中 TNF-α 和 3.2.5 骨化三醇对LPS耐受细胞中Ca 水平的影响
2+
IL-6水平均显著升高（P＜0.05）。与LPS组比较，LPS耐 与Medium组比较，LPS组细胞中Ca 荧光强度显著
受组细胞上清液中 TNF-α 和 IL-6 水平均显著降低（P＜ 升高（P＜0.05）。与LPS组比较，LPS耐受组细胞中Ca 2+
0.05），表明 LPS 耐受细胞建模成功。与 LPS 耐受组比 荧光强度显著降低（P＜0.05）。与 LPS 耐受组比较，骨
2+
较，骨化三醇组细胞上清液中TNF-α和IL-6水平均显著 化三醇组细胞中 Ca 荧光强度显著升高（P＜0.05）。结
升高（P＜0.05）。结果见表2。 果见表4和图4。
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