Page 79 - 《中国药房》2025年14期

350 2.1.7 相对校正因子的计算
300
250 8 10 取“2.1.4”项下6个不同质量浓度的系列对照品工作
mAU 200 2 6 溶液，按“2.1.3”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。
150
100 1 3 4 5 9
50 7 11 12 以槲皮素为内参物，计算没食子酸、原儿茶酸、鞣花酸、
0
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 异槲皮苷、紫云英苷、芹菜素的相对校正因子（ƒ）；以熊
t/min 果酸为内参物，计算野鸦椿酸、齐墩果酸、豆甾醇、β-谷
A.混合对照品溶液
350 10 ρ ´ A
300 8 甾醇的f。f = i s ，式中ρs和ρi为内参物和其他成分的
250 2 ρ ´ A i
s
mAU 200 4 6 9 质量浓度，As和 Ai为内参物和其他成分的峰面积 。结
[11]
150
100 1 3 5 7
50 11 12 果显示，没食子酸、原儿茶酸、鞣花酸、异槲皮苷、紫云英
0 苷、芹菜素、野鸦椿酸、齐墩果酸、豆甾醇、β-谷甾醇的 ƒ
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
t/min 分别为1.503 7、1.040 5、1.202 3、1.094 8、1.368 9、1.243 5、
B.供试品溶液（编号S1）
1：没食子酸；2：原儿茶酸；3：鞣花酸；4：异槲皮苷；5：紫云英苷；6： 0.852 7、0.840 2、1.434 4、1.338 7，RSD 均 小 于 2.0%
槲皮素；7：芹菜素；8：野鸦椿酸；9：齐墩果酸；10：熊果酸；11：豆甾醇； （n＝6）。
12：β-谷甾醇。 2.1.8 不同仪器和色谱柱对ƒ的影响
图1 野鸦椿供试品溶液和混合对照品溶液的HPLC图 精密量取“2.1.2”项下混合对照品溶液，按“2.1.3”项

表2 没食子酸等12个成分的回归方程与线性范围 下色谱条件，以不同色谱柱（Hypersil Gold C18、Luna C18、
成分 回归方程 线性范围/（µg/mL） r ZORBAX RX-C18 ）在不同 HPLC 仪（Waters 2690/5-2998
没食子酸 y＝3.681 9×10 x+2 710.5 0.58～29.00 0.999 4 型 和 Agilent 1200 型）中 进 样 测 定 ，记 录 峰 面 积 ，按
6
6
原儿茶酸 y＝5.305 8×10 x－351.4 2.95～147.50 0.999 3 “2.1.7”项下方法计算 ƒ。结果显示，没食子酸、原儿茶
鞣花酸 y＝4.628 7×10 x+1 836.6 1.54～77.00 0.999 6
6
6
异槲皮苷 y＝5.067 6×10 x－1 967.1 2.08～104.00 0.999 4 酸、鞣花酸、异槲皮苷、紫云英苷、芹菜素、野鸦椿酸、齐
6
紫云英苷 y＝4.071 9×10 x－248.6 0.92～46.00 0.999 6 墩果酸、豆甾醇、β-谷甾醇的平均ƒ分别为1.505 3、1.040 0、
槲皮素 y＝5.522 5×10 x+2 045.5 2.35～117.50 0.999 3 1.201 9、1.095 4、1.361 0、1.242 1、0.856 7、0.841 9、1.437 8、
6
6
芹菜素 y＝4.459 4×10 x+1 039.6 1.06～53.00 0.999 4
6
野鸦椿酸 y＝5.720 4×10 x－2 122.3 3.18～159.00 0.999 6 1.336 8，RSD均小于2.0%（n＝6）。
6
齐墩果酸 y＝5.751 4×10 x+411.1 2.59～129.50 0.999 3 2.1.9 不同仪器和色谱柱对各成分相对保留时间的
6
熊果酸 y＝4.862 2×10 x－2 822.4 4.15～207.50 0.999 5 影响
豆甾醇 y＝3.375 6×10 x+775.9 0.23～11.50 0.999 4 记录“2.1.8”项下没食子酸等 12 个成分色谱峰的保
6
β-谷甾醇 y＝3.625 9×10 x－389.0 0.36～18.00 0.999 5
6
留时间，以槲皮素为内参物，计算没食子酸、原儿茶酸、
4、8、12、16、20、24 h时进样测定，记录峰面积，考察稳定 鞣花酸、异槲皮苷、紫云英苷、芹菜素的相对保留时间；
性；另取同一批野鸦椿样品（编号 S1）适量，按“2.1.1”项 以熊果酸为内参物，计算野鸦椿酸、齐墩果酸、豆甾醇和
下方法制备供试品溶液，共6份，进样测定，记录峰面积 β-谷甾醇的相对保留时间。结果显示，没食子酸、原儿
[10]
并按外标法（external standard method，ESM） 计算含 茶酸、鞣花酸、异槲皮苷、紫云英苷、芹菜素、野鸦椿酸、
量，考察重复性。结果显示，没食子酸等12个成分在精 齐墩果酸、豆甾醇、β-谷甾醇的平均相对保留时间分别
密度、稳定性和重复性试验中峰面积或含量的RSD均小 为 0.450 3、0.541 3、0.628 3、0.736 6、0.854 6、1.040 9、
于2.0%（n＝6或n＝7）。 0.793 3、0.875 5、1.073 7、1.132 2，RSD 均 小 于 2.0%
2.1.6 加样回收率试验 （n＝6）。
2.1.10 样品含量测定
取已知成分含量的野鸦椿样品（编号S1）粉末，共9
取18批野鸦椿样品，按“2.1.1”项下方法制备供试品
份，每份约 0.25 g，精密称定，按已知成分含量的 80%、
溶液，按“2.1.3”项下色谱条件进样测定，分别按 ESM [12]
100%、120%加入混合对照品溶液，再按“2.1.1”项下方法
和QAMS法计算各成分的含量，每批样品测定3次。运
制备供试品溶液，每个比例制备3份，按“2.1.3”项下色谱
用 SPSS 26.0 软件，采用 t 检验对数据进行分析，检验水
条件进样测定，记录峰面积并计算加样回收率。结果显
准α＝0.05。结果（表3）显示，以槲皮素和熊果酸为内参
示，没食子酸、原儿茶酸、鞣花酸、异槲皮苷、紫云英苷、
物时，18 批野鸦椿样品中 10 个成分采用 QAMS 法与
槲皮素、芹菜素、野鸦椿酸、齐墩果酸、熊果酸、豆甾醇和 ESM 测定的结果差异不显著（P＞0.05），但不同批次样
β-谷甾醇的平均加样回收率分别为 97.59%、99.65%、 品的含量差异较大，以豆甾醇和野鸦椿酸含量差异最显
99.12%、100.03%、97.75%、99.70%、97.89%、100.13%、 著，其中重庆奉节县（S16）产野鸦椿中槲皮素、原儿茶
98.84%、100.02%、97.33%、96.98%，RSD 均 小 于 2.0% 酸、紫云英苷、野鸦椿酸、齐墩果酸的含量均最高，但没
（n＝3）。 食子酸和异槲皮苷含量最低；江西崇义县（S12）产野鸦

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