Page 48 - 《中国药房》2025年14期

叶酸修饰的克班宁纳米粒联合超声辐照对 M109 细胞的体内外

靶向作用及抗肿瘤机制
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张海亮 1， 2＊ ，赵笑雨 ，梅佳华 ，潘 蕊 ，唐钧泽 ，喻 锟 ，薛 蕊 ，李晓飞 ，程 欣 1， 2， 5 # （1.云南中医药大学
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中药学院，昆明 650500；2.云南省傣医药与彝医药重点实验室，昆明 650500；3.云南中医药大学第一临床
医学院，昆明 650500；4.云南中医药大学科学技术处，昆明 650500；5.云南省高校外用给药系统与制剂技术
研究重点实验室，昆明 650500）
中图分类号 R944 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2025）14-1730-07
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2025.14.07

摘 要 目的 考察叶酸修饰的克班宁纳米粒（FA-Cre@PEG-PLGA NPs，以下简称“NPs”）联合超声辐照对M109细胞的体内外靶
向作用，初步探讨其抗肿瘤机制。方法 采用CCK-8法检测NPs联合超声辐照对M109细胞的增殖抑制作用，筛选最佳超声时间。
以肺癌A549细胞为对照，通过游离叶酸阻断实验和细胞摄取实验，评估NPs联合超声辐照对M109细胞的叶酸靶向性。利用细胞
划痕实验、Transwell小室实验和流式细胞术，检测给药后1 h联合超声辐照下，NPs对M109细胞迁移、侵袭、凋亡、周期及细胞内活
性氧（ROS）水平的影响；使用荧光倒置显微镜观察线粒体膜电位（MMP）变化。构建M109细胞的小鼠皮下瘤模型，通过小动物活
体成像技术考察NPs联合超声辐照的体内肿瘤靶向性。结果 NPs联合超声辐照能明显抑制M109细胞的增殖，最佳超声时间点
为给药后1 h。游离叶酸可以拮抗NPs 对M109细胞的增殖抑制作用，联合超声辐照能部分逆转这一拮抗作用。与A549细胞比
较，M109细胞对NPs的摄取能力更强（P＜0.01），超声辐照可以促进细胞摄取。NPs联合超声辐照可以抑制M109细胞的迁移与
侵袭，并将细胞阻滞于G0/G1和G2/M期。与对照组比较，NPs不同质量浓度（100、200、300 μg/mL）组M109细胞的凋亡率、ROS水
平均显著升高（P＜0.01），MMP均显著降低（P＜0.01）。与不超声组比较，给药后0 h超声组小鼠肿瘤部位的荧光强度及肿瘤靶向
指数均显著增加（P＜0.05或P＜0.01）。结论 NPs联合超声辐照对M109细胞具有较强的体内外靶向性，其抗肿瘤机制包括抑制
细胞迁移与侵袭、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡等。
关键词 叶酸修饰纳米粒；超声辐照；M109细胞；肿瘤靶向性；抗肿瘤机制

Targeting effect and anti-tumor mechanism of folic acid-modified crebanine nanoparticles combined with
ultrasound irradiation on M109 cells in vitro and in vivo
ZHANG Hailiang ，ZHAO Xiaoyu ，MEI Jiahua ，PAN Rui ，TANG Junze ，YU Kun ，XUE Rui ，LI Xiaofei ，
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CHENG Xin 1， 2， 5 （1. College of Traditional Chinese Medicine， Yunnan University of Chinese Medicine，
Kunming 650500， China；2. Yunnan Key Laboratory of Dai and Yi Medicines， Kunming 650500， China；3. First
Clinical Medical College， Yunnan University of Chinese Medicine， Kunming 650500， China；4. Science and
Technology Office， Yunnan University of Chinese Medicine， Kunming 650500， China；5. Key Laboratory of
External Drug Delivery System and Preparation Technology in University of Yunnan Province， Kunming
650500， China）
ABSTRACT OBJECTIVE To investigate the targeting effect of folic acid-modified crebanine nanoparticles （FA-Cre@PEG-
PLGA NPs， hereinafter referred to as “NPs”） combined with ultrasound irradiation on M109 cells in vitro and in vivo after
administration， and explore the anti-tumor mechanism. METHODS CCK-8 assay was used to detect the inhibitory effect of NPs
combined with ultrasound irradiation on the proliferation of M109 cells， and the best ultrasound time was selected. Using human
lung cancer A549 cells as a control， the targeting of NPs combined with ultrasound irradiation to M109 cells was evaluated by free
folic acid blocking assay and cell uptake assay. The effects of
Δ 基金项目 国家自然科学基金项目（No.82060723）；云南省科学 NPs combined with ultrasound irradiation on the migration，
技术厅-云南中医药大学应用基础研究联合专项（No.202001AZ07000
invasion， apoptosis， cell cycle and reactive oxygen species
1-008）；云 南 省 傣 医 药 与 彝 医 药 重 点 实 验 室 开 放 课 题（No.
（ROS） levels of M109 cells were detected by cell scratch test，
202210SS2206）；云南省教育厅科学研究基金项目（No.2024Y345）
Transwell chamber test and flow cytometry at 1 h after
＊第一作者 硕士研究生。研究方向：中药药剂学。E-mail：
958401536@qq.com administration； the changes of mitochondrial membrane
# 通信作者 副教授，硕士生导师，博士。研究方向：药物新剂型、 potential （MMP） were observed by fluorescence inverted
纳米医药。E-mail：chengxin920@126.com microscope. A mouse subcutaneous tumor model of M109 cells

· 1730 · China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 14 中国药房 2025年第36卷第14期