Page 41 - 《中国药房》2025年14期
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tumor protein p53, AKT serine/threonine kinase 1, IL-6, and tumor necrosis factor (TNF). IL-17, TNF and phosphatidylinositol-3-
          kinase-serine/threonine  protein  kinase (PI3K/Akt)  signaling  pathways  were  identified  as  crucial  pathways.  Compared  with  IL-17
          intervention  group,  the  cell  migration  rate,  B-cell  lymphoma  2 (Bcl-2)  protein  expression,  the  levels  of  IL-6  and  TNF-α  in  the
          supernatant,  mRNA  expression  of  IL-17  receptor A (IL-17RA), TNF-α,  and  IL-6,  as  well  as  the  protein  expression  of  IL-17RA
          and  nuclear  factor  kappa-B  p65  subunit (p65),  and  phosphorylated (p)-p65/p65  ratio  in  IL-17+SQGB  low-  and  high-  quality
          concentration  groups  were  all  significantly  decreased  or  down-regulation (P<0.05);  the  apoptosis  rate,  expression  levels  of  Bcl-2
          associated X protein (Bax) and cleaved caspase-3 protein, the ratio of Bax/Bcl-2, the expression level of p-p38 protein, and the p-
          p38/p38  ratio  were  all  significantly  increased  or  up-regulated (P<0.05).  Moreover,  the  improvement  effects  of  these  indicators
          were  mostly  better  in  the  high-quality  concentration  groups  compared  to  the  low-quality  concentration  groups (P<0.05).
          CONCLUSIONS  SQGB  ameliorates  CRF  by  regulating  the  IL-17  signaling  pathway,  inhibiting  the  expression  of  inflammatory
          factors, and activating p38 MAPK-dependent apoptosis pathway.
          KEYWORDS    Shenqi guben formula; network pharmacology; cancer-related fatigue; cellular experiments


              癌因性疲乏(cancer-related fatigue,CRF)被定义为          1.2 主要药品与试剂
          持续存在的、与活动量不匹配的疲乏感,是恶性肿瘤患                               参芪固本方冻干粉(1 g 冻干粉相当于 1 g 生药,于
                          [1]
          者的常见症状之一 。CRF 无法通过休息缓解,可影响                         4 ℃保存)由广州中医药大学深圳医院(福田)中药房
          患者的身心健康及日常功能。研究显示,20%~46% 的                        自制。
          恶性肿瘤患者会在治疗过程中或接受治疗后出现不同                                青-链霉素溶液(100×,批号 15140-122)、胎牛血清
          程度的 CRF,且持续疲劳者的死亡风险比无疲劳者高                         (批号 10099-141)均购自美国 Life Technologies 公司;
          2.56 倍 [2―3] 。虽然 CRF 在恶性肿瘤患者中的高发性已得                RPMI-1640培养基(批号C11875500BT)购自美国Gibco
          到学界广泛关注,但目前尚无特异性药物被批准用于治                           公司;CCK-8 试剂盒(批号 GH802)购自东仁化学科技
          疗该病。已有研究者尝试使用抗炎药物、抗抑郁药物和                          (上海)有限公司;白细胞介素 6(interleukin-6,IL-6)、肿
                                     [4]
          兴奋剂来缓解CRF,但疗效不佳 。例如,抗炎药物虽然                         瘤坏死因子 α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)试剂盒
          能够减少慢性炎症对疲乏的影响,但并未在所有患者中                          (批号分别为 CB10373-Hu、CB11762-Hu)均购自上海科
                                                             艾博生物技术有限公司;重组人 IL-17 蛋白(纯度>
          表现出显著疗效,且长期使用可能引发免疫抑制或其他
                                                             98%,批 号 ab9567)购 自 英 国 Abcam 公 司 ;Annexin
                  [5]
          不良反应 。
                                                             Ⅴ-FITC/PI凋亡检测试剂盒(批号A211-01)购自南京诺
              参芪固本方是国医大师周岱翰教授的临床经验方,
                                                             唯赞生物科技股份有限公司;甘油醛-3-磷酸脱氢酶
          由党参、黄芪、白术、茯苓等中药组成,具有健脾益肾、滋
                                                            (GAPDH)抗体(兔抗,批号 10494-1-AP)购自武汉三鹰
          阴补阳的功效。该方已在临床广泛用于术后恢复、化疗
                                                             生物技术有限公司;β-肌动蛋白(β-actin)抗体(批号
          及免疫治疗的恶性肿瘤患者            [6―7] 。本团队前期的临床观
                                                             AF7018)、IL-17 受体 A(IL-17 receptor A,IL-17RA)抗体
          察研究显示,参芪固本方可降低 CRF 患者的炎症指标,
                                                            (批 号 DF3602)、p38 丝 裂 原 活 化 的 蛋 白 激 酶(p38
          改善其体力和生存质量(另文待发),但具体机制尚不明
                                                             mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)抗体(批号
          确。基于此,本研究拟通过网络药理学分析及细胞实
                                                             AF6456)、核 因 子 κB  p65 亚 基(nuclear  factor  kappa-B
          验,初步揭示参芪固本方改善CRF的药效物质及作用机
                                                             p65  subunit,p65)抗 体(批 号 AF5006)、磷 酸 化 p38
          制,以期为该药的临床使用提供参考。
                                                             MAPK(phosphorylated p38 MAPK,p-p38 MAPK)抗体
          1 材料
                                                            (批号 AF4001)、磷酸化 p65(phosphorylated p65,p-p65)
          1.1 主要仪器                                           抗体(批号 AF2006)、B 细胞淋巴瘤 2(B-cell lymphoma
              本研究所用主要仪器包括 NanoDrop One/OneC 型                2,Bcl-2)抗体(批号 BF9103)、Bcl-2 关联 X 蛋白(Bcl-2
          微量核酸蛋白浓度测定仪和 QuantStudio 5 型荧光定量                   associated X protein,Bax)抗体(批号AF0120)、切割型胱
          聚合酶链式反应(PCR)仪[赛默飞世尔科技(中国)有限                        天蛋白酶 3(cleaved-caspase 3,cleaved-CASP3)抗体(批
          公司]、PowerPac Basic 164-5050 型电泳仪和 Mini Trans-      号 AF7022)均购自美国 Affinity Biosciences 公司(以上
          Blot 170-3930 型转印槽(美国 Bio-Rad 公司)、Synergy-         一抗仅Bcl-2是鼠抗,其余均为兔抗);逆转录试剂(批号
          HT 型酶标仪(美国 BioTek 公司)、1300NovoCyte 型流式             K1622)购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司;IRDye
          细胞仪(美国ACEA Biosciences Inc.)、BDS400型倒置生            680RD 标记的山羊抗兔免疫球蛋白 G 二抗(批号 925-
          物显微镜(重庆奥特光学仪器有限责任公司)、L3-5K型                        68071)、IRDye 800CW标记的山羊抗小鼠免疫球蛋白G
          冷冻离心机(湖南可成仪器设备有限公司)等。                              二抗(批号925-32210)均购自美国LI-COR公司;PCR所


          中国药房  2025年第36卷第14期                                              China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 14    · 1723 ·
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