Page 41 - 《中国药房》2025年14期
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tumor protein p53, AKT serine/threonine kinase 1, IL-6, and tumor necrosis factor (TNF). IL-17, TNF and phosphatidylinositol-3-
kinase-serine/threonine protein kinase (PI3K/Akt) signaling pathways were identified as crucial pathways. Compared with IL-17
intervention group, the cell migration rate, B-cell lymphoma 2 (Bcl-2) protein expression, the levels of IL-6 and TNF-α in the
supernatant, mRNA expression of IL-17 receptor A (IL-17RA), TNF-α, and IL-6, as well as the protein expression of IL-17RA
and nuclear factor kappa-B p65 subunit (p65), and phosphorylated (p)-p65/p65 ratio in IL-17+SQGB low- and high- quality
concentration groups were all significantly decreased or down-regulation (P<0.05); the apoptosis rate, expression levels of Bcl-2
associated X protein (Bax) and cleaved caspase-3 protein, the ratio of Bax/Bcl-2, the expression level of p-p38 protein, and the p-
p38/p38 ratio were all significantly increased or up-regulated (P<0.05). Moreover, the improvement effects of these indicators
were mostly better in the high-quality concentration groups compared to the low-quality concentration groups (P<0.05).
CONCLUSIONS SQGB ameliorates CRF by regulating the IL-17 signaling pathway, inhibiting the expression of inflammatory
factors, and activating p38 MAPK-dependent apoptosis pathway.
KEYWORDS Shenqi guben formula; network pharmacology; cancer-related fatigue; cellular experiments
癌因性疲乏(cancer-related fatigue,CRF)被定义为 1.2 主要药品与试剂
持续存在的、与活动量不匹配的疲乏感,是恶性肿瘤患 参芪固本方冻干粉(1 g 冻干粉相当于 1 g 生药,于
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者的常见症状之一 。CRF 无法通过休息缓解,可影响 4 ℃保存)由广州中医药大学深圳医院(福田)中药房
患者的身心健康及日常功能。研究显示,20%~46% 的 自制。
恶性肿瘤患者会在治疗过程中或接受治疗后出现不同 青-链霉素溶液(100×,批号 15140-122)、胎牛血清
程度的 CRF,且持续疲劳者的死亡风险比无疲劳者高 (批号 10099-141)均购自美国 Life Technologies 公司;
2.56 倍 [2―3] 。虽然 CRF 在恶性肿瘤患者中的高发性已得 RPMI-1640培养基(批号C11875500BT)购自美国Gibco
到学界广泛关注,但目前尚无特异性药物被批准用于治 公司;CCK-8 试剂盒(批号 GH802)购自东仁化学科技
疗该病。已有研究者尝试使用抗炎药物、抗抑郁药物和 (上海)有限公司;白细胞介素 6(interleukin-6,IL-6)、肿
[4]
兴奋剂来缓解CRF,但疗效不佳 。例如,抗炎药物虽然 瘤坏死因子 α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)试剂盒
能够减少慢性炎症对疲乏的影响,但并未在所有患者中 (批号分别为 CB10373-Hu、CB11762-Hu)均购自上海科
艾博生物技术有限公司;重组人 IL-17 蛋白(纯度>
表现出显著疗效,且长期使用可能引发免疫抑制或其他
98%,批 号 ab9567)购 自 英 国 Abcam 公 司 ;Annexin
[5]
不良反应 。
Ⅴ-FITC/PI凋亡检测试剂盒(批号A211-01)购自南京诺
参芪固本方是国医大师周岱翰教授的临床经验方,
唯赞生物科技股份有限公司;甘油醛-3-磷酸脱氢酶
由党参、黄芪、白术、茯苓等中药组成,具有健脾益肾、滋
(GAPDH)抗体(兔抗,批号 10494-1-AP)购自武汉三鹰
阴补阳的功效。该方已在临床广泛用于术后恢复、化疗
生物技术有限公司;β-肌动蛋白(β-actin)抗体(批号
及免疫治疗的恶性肿瘤患者 [6―7] 。本团队前期的临床观
AF7018)、IL-17 受体 A(IL-17 receptor A,IL-17RA)抗体
察研究显示,参芪固本方可降低 CRF 患者的炎症指标,
(批 号 DF3602)、p38 丝 裂 原 活 化 的 蛋 白 激 酶(p38
改善其体力和生存质量(另文待发),但具体机制尚不明
mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)抗体(批号
确。基于此,本研究拟通过网络药理学分析及细胞实
AF6456)、核 因 子 κB p65 亚 基(nuclear factor kappa-B
验,初步揭示参芪固本方改善CRF的药效物质及作用机
p65 subunit,p65)抗 体(批 号 AF5006)、磷 酸 化 p38
制,以期为该药的临床使用提供参考。
MAPK(phosphorylated p38 MAPK,p-p38 MAPK)抗体
1 材料
(批号 AF4001)、磷酸化 p65(phosphorylated p65,p-p65)
1.1 主要仪器 抗体(批号 AF2006)、B 细胞淋巴瘤 2(B-cell lymphoma
本研究所用主要仪器包括 NanoDrop One/OneC 型 2,Bcl-2)抗体(批号 BF9103)、Bcl-2 关联 X 蛋白(Bcl-2
微量核酸蛋白浓度测定仪和 QuantStudio 5 型荧光定量 associated X protein,Bax)抗体(批号AF0120)、切割型胱
聚合酶链式反应(PCR)仪[赛默飞世尔科技(中国)有限 天蛋白酶 3(cleaved-caspase 3,cleaved-CASP3)抗体(批
公司]、PowerPac Basic 164-5050 型电泳仪和 Mini Trans- 号 AF7022)均购自美国 Affinity Biosciences 公司(以上
Blot 170-3930 型转印槽(美国 Bio-Rad 公司)、Synergy- 一抗仅Bcl-2是鼠抗,其余均为兔抗);逆转录试剂(批号
HT 型酶标仪(美国 BioTek 公司)、1300NovoCyte 型流式 K1622)购自赛默飞世尔科技(中国)有限公司;IRDye
细胞仪(美国ACEA Biosciences Inc.)、BDS400型倒置生 680RD 标记的山羊抗兔免疫球蛋白 G 二抗(批号 925-
物显微镜(重庆奥特光学仪器有限责任公司)、L3-5K型 68071)、IRDye 800CW标记的山羊抗小鼠免疫球蛋白G
冷冻离心机(湖南可成仪器设备有限公司)等。 二抗(批号925-32210)均购自美国LI-COR公司;PCR所
中国药房 2025年第36卷第14期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 14 · 1723 ·