Page 36 - 《中国药房》2025年14期
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thymic  stromal  lymphopoietin （TSLP），  and Toll-like  receptor  4 （TLR4），  as  well  as  protein  expressions  of TSLP  and TLR4  were
          determined in lung tissue. RESULTS Compared with model group， the lung tissue damage of rats was relieved significantly； Raw，
          FRC， the contents and mRNA expression levels of IL-6， IL-13 and TNF-α， as well as the mRNA and protein expressions of TSLP
          and  TLR4  were  significantly  decreased （P＜0.05），  while  the  contents  and  mRNA  expressions  of  PEF，  EF50  %  and  IFN-γ  were
          significantly  increased  in  the  dexamethasone  group  and  Ephedra-Cinnamomum  medium-  and  high-dose  groups （P＜0.05）.
          Moreover，  only  a  few  rats  in  the  two  groups  exhibited  typical  symptoms  of  asthma.  CONCLUSIONS  Ephedra-Cinnamomum
          couplet medicinals improve respiratory function and ameliorate airway inflammation in asthma rats with cold-fluid retention in lung
          syndrome，  the  mechanism  of  which  may  be  associated  with  inhibiting  TSLP/TLR4  signaling  pathway  and  modulating  Th1/Th2
          imbalance.
          KEYWORDS     Ephedra-Cinnamomum  couplet  medicinals；  bronchial  asthma；  cold-fluid  retention  in  lung  syndrome；  thymic
          stromal lymphopoietin； Toll-like receptor 4


              支气管哮喘是多因素共同诱发的复杂异质性疾病，                          荧光定量聚合酶链式反应（PCR）仪（美国 Bio-Rad 公
          发病率呈逐年攀升趋势，其特征为气道高反应性，伴有                            司）、DS-U3 型成像系统和 Eclipse E10 型正置光学显微
                      [1]
          慢性气道炎症 。寒饮蕴肺证是由于机体尤其是肺部同                            镜（日本Nikon公司）。
          时受到“形寒、饮冷”的外邪刺激，出现机体阳虚寒盛、肺                          1.2 主要药品与试剂
          气宣发和下降异常、水饮内停伏肺的一种病证。研究表                                麻黄饮片（产地内蒙古，批号 201224072）购自安国
          明，寒饮蕴肺证是支气管哮喘证型中的严重类型，但其                            润德药业有限公司；桂枝饮片（产地广西，批号 210401）
                              [2]
          发病机制尚未完全明确 。                                        购自安徽三和堂药业有限公司；麻黄、桂枝饮片经山东
              麻黄-桂枝药对来源于经典名方小青龙汤，该方出                          中医药大学药学院赵东升副教授鉴定，分别为麻黄科植
          自《伤寒论》，临床上常用于治疗哮喘等呼吸系统疾病。                           物草麻黄Ephedra sinica Stapf的干燥草质茎以及樟科植
          方中麻黄具有发汗解表、宣肺平喘、利水消肿的功效；桂                           物肉桂Cinnamomum cassia Presl的干燥嫩枝。
          枝则能发汗解肌、温通经脉、助阳化气。笔者前期研究                                氢 氧 化 铝（ 批 号 SJ000389）、二 甲 苯（ 批 号
          已初步证实，麻黄-桂枝药对具有拮抗哮喘寒饮蕴肺证                            10023418）、中性树胶（批号 10004160）、三氯甲烷（批号
          气道炎症及平喘作用。                                          10006818）、异丙醇（批号 80109218）均购自国药集团化
              在哮喘的发病过程中，寒冷刺激通过气道上皮细胞                          学试剂有限公司；地塞米松磷酸钠注射液（规格2 mg/mL，
          和肥大细胞上的瞬时受体电位阳离子通道亚家族 M 成                           批号 7211055）购自辰欣药业股份有限公司；OVA（批号
          员 8（transient receptor potential cation channel subfamily   9006-59-1）购自北京索莱宝生物科技有限公司；肿瘤坏
          M member 8，TRPM8）受体，促使气道发生炎症反应，增                    死因子 α（tumor necrosis factor-alpha，TNF-α）、干扰素 γ
          加胸腺基质淋巴细胞生成素（thymic stromal lymphopoie-            （interferon-gamma，IFN- γ）、IL-6 酶 联 免 疫 吸 附 测 定
          tin，TSLP）、白细胞介素 6（interleukin-6，IL-6）等炎症因          （ELISA）试 剂 盒（ 批 号 分 别 为 9680014130921、
                                 [3]
          子的分泌，从而加重哮喘 。此外，Toll 样受体 4（Toll-                    9680003060721、9680011070921）均购自英国 Abcam 公
          like receptor 4，TLR4）信号通路在哮喘发病中也发挥重                 司；IL-13 ELISA 试剂盒（批号 54517261228）、兔源 β-肌
          要作用，如卵清蛋白（ovalbumin，OVA）激动 TLR4 信号                  动蛋白（β-actin）抗体（批号 BM0627）、兔源 TSLP 抗体
          通路可导致辅助型T细胞2（T helper 2 cell，Th2）介导的               （批号 A01096）均购自武汉博士德生物工程有限公司；
                                                    [4]
          相关炎症恶化，IL-13等炎症因子的含量显著增加 。在                         苏木素染液（批号G1004）、伊红染液（批号G1001）、Ser‐
          寒冷刺激下，TSLP与TLR4信号通路的协同作用可显著                         vicebio  第一链 cDNA 合成试剂盒（批号 G3330）、2×
                                                                    ®
          加剧哮喘的症状及呼吸功能损害 。基于此，本研究拟                            SYBR Green qPCR预混液（无ROX）（批号G3320）、兔源
                                       [5]
          从 TSLP/TLR4 信号通路角度出发，探讨麻黄-桂枝药对                      TLR4 抗体（批号 GB11519-100）、辣根过氧化物酶标记
          对哮喘寒饮蕴肺证大鼠呼吸功能、气道炎症的影响及机                            的山羊抗兔免疫球蛋白 G 二抗（批号 GB23303）均购自
          制，旨在为麻黄-桂枝药对的临床开发提供实验依据。                            武汉赛维尔生物科技有限公司。
          1 材料                                                1.3 实验动物
          1.1 主要仪器                                                SPF 级 Wistar 大鼠 60 只，6 周龄，雄性，体重 180～
              本研究所用主要仪器包括 W001 型雾化仪（江苏富                       200 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，动物
          林医疗设备有限公司）、Finepointe NAM 型动物无创肺                    生产许可证号为 SCXK（京）2016-0011。所有动物均饲
          功能检测系统（美国 DSI 公司）、Rt-2100C 型酶标仪（深                   养于温度（22±2）℃、相对湿度 40%～60%、昼夜 12 h 光
          圳雷杜生命科学股份有限公司）、EPS型电泳仪和Tanon-                       暗交替的环境中，自由摄食饮水，适应性饲养1周后开展
          600 型凝胶成像系统（上海天能科技有限公司）、CFX 型                       后续实验。实验动物的使用与操作均符合山东中医药


          · 1718 ·    China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 14                            中国药房  2025年第36卷第14期
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