Page 81 - 《中国药房》2025年13期
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serum were significantly increased (P<0.05); compared with the Model group, the pathological damage of the anal tissues in the
treatment groups was alleviated to varying degrees, and serum levels of IL-6 in CBZCS-H group, CBZCS-M group, and Positive
group as well as serum levels of TNF- α in CBZCS-H group were significantly reduced (P<0.05). The metabolomics results
showed that 34 differential metabolites were screened from the anal tissues of rats, and 22 of them showed a return after CBZCS
administration. The differential metabolites mainly enriched in arachidonic acid metabolism, histidine metabolism, and
glycerophospholipid metabolism. Through the network pharmacology, 138 intersection genes of CBZCS against hemorrhoids were
determined. The analysis results showed that differential metabolites and target proteins were mainly enriched in the arachidonic acid
metabolism pathway, and the regulation of this pathway might be related to cyclooxygenase-2 (COX-2), Myc proto-oncogene
protein (c-MYC), cytochrome P450 1B1 (CYP1B1), interleukin-1β (IL-1β), and IL-6 protein expression. The experimental
verification results showed that the expression levels of key proteins (COX-2, c-MYC, CYP1B1, IL-6, IL-1β) in the anal tissues
of the Model group were significantly higher than those in the NC group (P<0.05), and the levels of the above proteins in the
anal tissues of CBZCS-H group and Positive group were significantly lower than those in the Model group (P<0.05).
CONCLUSIONS The mechanism of CBZCS in treating hemorrhoids may be to inhibit the expression of COX-2, c-MYC and
CYP1B1 proteins, thereby inhibiting arachidonic acid metabolism and reducing the release of inflammatory factors IL-6 and IL-1β.
KEYWORDS Chanbao zhichuang suppository; hemorrhoids; arachidonic acid metabolism; cyclooxygenase-2; Myc proto-
oncogene protein; cytochrome P450 1B1; inflammatory reaction; metabolomics; network pharmacology
痔疮是一种全球范围内常见的慢性疾病,位于肛管 正置白光拍照显微镜(日本 Nikon 公司)、XEVO G2-XS
中的黏膜下血管组织的软垫,起始于齿状线的近侧,常 Q-TOF 型液质联用仪(美国 Waters 公司)、Chemi Scope
伴随肛门疼痛、灼热、瘙痒、排便困难、出血感染等症 5300型化学发光成像系统(上海勤翔科学仪器有限公司)、
[1]
状 。肛垫血管丛在长期静脉高压作用下出现内皮细胞 SVT-2型转印电泳仪(武汉赛维尔生物科技有限公司)。
[2]
紧密连接蛋白表达下调 ,导致血管通透性增加和血浆 1.2 主要药品与试剂
外渗,形成痔核膨大特征。炎症反应也在此过程中扮演 本研究所用的主要药品与试剂有:CBZCS(黑龙江
重要角色,尤其是在痔疮发展到脱垂或血栓形成阶段 省蟾宝生物科技发展有限公司,批号 220401,规格为每
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时 。目前痔疮有诸多治疗方式,其中保守治疗更受患 粒1.5 g),马应龙麝香痔疮栓(马应龙药业集团股份有限
[4]
者青睐 。但保守治疗多依赖于化学药来控制症状,难 公司,批号 2201011,规格为每粒 1.5 g),二甲苯、巴豆油
以实现疾病的根治,并且伴随诸多不良反应和肝肾 (上海阿拉丁生化科技股份有限公司),角叉菜胶(上海
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毒性 。 麦克林生化科技股份有限公司),苏木精-伊红(HE)染色
中药具有多靶点、多组分、活性成分稳定、价格低廉 剂(北京索莱宝科技有限公司),白细胞介素 6(interleu‐
以及在治疗和缓解疾病症状的同时还能增效减毒的作 kin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子 α(tumor necrosis factor-α,
用。蟾宝痔疮栓(CBZCS)是治疗痔疮的临床经验方,由 TNF-α)酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(上海酶联生
蟾酥、蟾蜍皮、冰片、紫草、三七、五倍子、白及和枯矾组 物 科 技 有 限 公 司 ,批 号 分 别 为 20230616-30219B、
成。本课题组前期研究发现,该方具有显著的抗炎、消 20230616-31063B),IL-1β 一抗、β-肌动蛋白(β-actin)一
肿、镇痛和止血等药理活性,但其确切的作用靶点及多 抗、辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗大鼠二抗、
药效成分的协同作用机制尚未明晰。代谢组学是一种 HRP标记的山羊抗兔二抗(武汉赛维尔生物科技有限公
研究机体内源性小分子代谢物构型及动态变化的科学 司 ,货 号 分 别 为 GB11113、GB15003、GB23302、
方法,可以揭示中药复杂成分在生物体内的生物学转化 GB23303),细胞色素 P450 1B1(cytochrome P450 1B1,
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过程 。网络药理学是基于系统生物学,通过多靶点网 CYP1B1)一 抗(美 国 Affinity Biosciences 公 司 ,货 号
络分析揭示药物与机体相互作用机制的学科,与中医的 DF6399),环氧合酶 2(cyclooxygenase-2,COX-2)、Myc
治疗理念相契合。因此,本研究采用巴豆油建立痔疮大 原癌基因蛋白(Myc proto-oncogene protein,c-MYC)一
鼠模型,运用代谢组学和网络药理学相结合的方法来探 抗(武汉三鹰生物技术有限公司,货号分别为 66351-1-
讨 CBZCS 治疗痔疮的作用机制,旨在为 CBZCS 的临床 lg、67447-1-Ig),IL-6一抗(沈阳万类生物科技有限公司,
应用提供科学依据。 货号WL02841)。
1 材料 1.3 动物
1.1 仪器 本研究所用动物为 60 只 SPF 级 SD 雌性大鼠,10 周
本研究所用的主要仪器有:KDC-160HR 型高速冷 龄,体重(240±20) g,购于辽宁长生生物技术股份有限
冻离心机(广州科大创新股份有限公司)、m200 pro型酶 公司[动物合格证号为 210726231102402046,生产许可
标仪(美国Thermo Fisher Scientific公司)、eclipseCi-L型 证号为 SCXK(辽)2020-0001]。饲养环境温度为(25±
中国药房 2025年第36卷第13期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 13 · 1623 ·