Page 77 - 《中国药房》2025年13期
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最大高度+最大宽度）/2；壁厚比＝动脉瘤壁的最小宽度/
          正常动脉壁的平均厚度。
          2.4 血管组织形态观察
              采用HE染色法观察。取“2.2”项下IA血管组织，置
          于 4% 多聚甲醛中固定 8 h，脱水后常规制备石蜡切片                             A. IA组        B. AST-H组    C. AST-H+HY-N2485组
         （厚度 3 μm），烤片后脱蜡，然后常规行 HE 染色，封片，                     图1 大鼠 IA（大脑前动脉-嗅动脉分叉处）显微图
          在显微镜下观察血管组织形态。                                          （Elastica van Gieson染色）
          2.5 血清中炎症因子和VEGF、ET水平检测
                                                              表1 各组大鼠IA形态学相关参数比较（x±s，n＝10）
              取“2.2”项下血清50 μL，采用ELISA法检测血清中
                                                              组别             动脉瘤/μm   内部弹性层破裂/μm     壁厚比
          炎症因子（TNF-α、IL-18、IL-6）和 VEGF、ET 水平，具体
                                                              Sham组            0           0
          操作严格按照相应试剂盒说明书进行。                                   IA组           80.56±9.14 a  58.74±5.31 a  0.28±0.04
          2.6 血管组织中vWF、VCAM-1、eNOS及NF-κB/NLRP3                AST-L组        69.73±7.68 b  45.36±4.28 b  0.51±0.07 b
          信号通路相关蛋白表达检测                                        AST-H组        54.82±6.27 bc  31.48±3.69 bc  0.74±0.06 bc
                                                              AST-H+HY-N2485组  73.94±8.51 d  48.23±5.07 d  0.46±0.05 d
              采用 Western blot 法检测。取“2.2”项下 IA 血管组
                                                                a：与Sham组比较，P＜0.05；b：与IA组比较，P＜0.05；c：与AST-L组
          织，提取组织中总蛋白，以 BCA 法分析蛋白浓度，采用
                                                             比较，P＜0.05；d：与AST-H组比较，P＜0.05。
          100 ℃热水浴处理5 min，电泳（100 V）60 min分离蛋白，
                                                             轻；AST-H+HY-N2485组大鼠相较于AST-H组血管内皮
          转至 PVDF 膜（电流 400 mA，时间 100 min），以 5% 脱脂
                                                             组织损伤程度明显加重。结果见图 2（图 2 中仅展示 IA
          奶粉封闭2 h；加入vWF、VCAM-1、eNOS、p-NF-κB、NF-
          κB、NLRP3和β-actin一抗（稀释比例均为1∶5 000），4 ℃              组、AST-H 组、AST-H+HY-N2485 组的结果，完整图片可
                                                             扫 描 本 文 首 页 二 维 码 ，进 入“ 增 强 出 版 ”页 面 查 看
          下孵育过夜；以磷酸盐缓冲液洗膜，加入二抗（稀释比例
                                                             附图2）。
          1∶1 500），室温下孵育 2 h；以 ECL 显影，使用 Image J 软
          件分析条带灰度值。以 vWF、VCAM-1、eNOS、NLRP3
          蛋白条带与内参蛋白（β-actin）条带灰度值的比值表示
          vWF、VCAM-1、eNOS、NLRP3蛋白的相对表达水平，以
          p-NF-κB 蛋白条带与 NF-κB 蛋白条带灰度值的比值表
          示NF-κB蛋白的磷酸化水平。
          2.7 统计学方法
              使用 GraphPad Prism 8.0.1 软件对数据进行统计分
          析。计量资料以x±s表示，多组间比较采用单因素方差
          分 析 ，组 间 两 两 比 较 采 用 SNK-q 检 验 。 检 验 水 准
          α＝0.05。
          3 结果                                                     A. IA组        B. AST-H组    C. AST-H+HY-N2485组
                                                               图2 各组大鼠IA血管形态观察显微图（HE染色）
          3.1 AST对大鼠IA形态学的影响
              Sham 组大鼠动脉形态正常；与 Sham 组比较，IA 组                 3.3 AST对IA大鼠血清中炎症因子水平的影响
          大鼠颅底动脉环有明显突起，动脉瘤、内部弹性层破裂                               与 Sham 组比较，IA 组大鼠血清中 TNF-α、IL-18 和
          均增大（P＜0.05）；与IA组比较，AST-L组和AST-H组大                  IL-6 水平均显著升高（P＜0.05）；与 IA 组比较，AST-L
          鼠颅底动脉环凸起缩小，动脉瘤、内部弹性层破裂均缩                           组、AST-H 组大鼠血清中 TNF-α、IL-18 和 IL-6 水平均显
          小（P＜0.05），壁厚比升高（P＜0.05），且 AST-H 组大鼠                著降低（P＜0.05），且 AST-H 组大鼠血清中上述指标水
          的上述指标变化均较 AST-L 组更明显（P＜0.05）；与                     平较 AST-L 组降低得更明显（P＜0.05）；与 AST-H 组比
          AST-H 组比较，AST-H+HY-N2485 组大鼠动脉瘤、内部                 较，AST-H+HY-N2485组大鼠血清中TNF-α、IL-18和IL-
          弹性层破裂均增大（P＜0.05），壁厚比降低（P＜0.05）。                    6水平均显著升高（P＜0.05）。结果见表2。
          结果见图 1（图 1 中仅展示 IA 组、AST-H 组、AST-H+HY-             3.4 AST对IA大鼠血清中VEGF和ET水平的影响
          N2485 组的结果，完整图片可扫描本文首页二维码，进                            与Sham组比较，IA组大鼠血清中VEGF、ET水平均
          入“增强出版”页面查看附图1）、表1。                                显著升高（P＜0.05）；与 IA 组比较，AST-L 组、AST-H 组
          3.2 AST对大鼠IA血管形态的影响                                大鼠血清中 VEGF、ET 水平均显著降低（P＜0.05），且
              Sham 组大鼠血管组织形态正常；IA 组大鼠动脉血                     AST-H 组大鼠血清中上述指标水平较 AST-L 组降低得
          管内皮细胞出现空泡样变性，平滑肌细胞厚度和动脉壁                           更明显（P＜0.05）；与 AST-H 组比较，AST-H+HY-N2485
          厚度变薄，弹性纤维断裂，伴有大量炎症细胞浸润；AST-                        组大鼠血清中 VEGF、ET 水平均显著升高（P＜0.05）。
          L 组和 AST-H 组大鼠血管内皮组织损伤程度有明显减                       结果见表3。


          中国药房  2025年第36卷第13期                                              China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 13    · 1619 ·
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