Page 76 - 《中国药房》2025年13期

颅内动脉瘤（intracranial aneurysm，IA）是指脑动脉 技有限公司，批号分别为 R23261、T15877、H26475），血
内腔的局限性异常扩大，造成动脉壁的一种瘤状突出， 管性血友病因子（von Willebrand factor，vWF）、血管细胞
是一种严重的脑血管疾病，具有潜在的破裂风险，进而 黏附分子 1（vascular cell adhesion molecule-1，VCAM-
引起蛛网膜下腔出血，具有较高的发病率和病死率，严 1）、内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide syn‐
[1]
重威胁患者生命健康 。目前临床尚无能够稳定 IA 病 thase，eNOS）、磷酸化NF-κB（p-NF-κB）、NF-κB、NLRP3
情并预防其破裂的疗法，一般采用保守治疗，只有对动 和β-肌动蛋白（β-actin）一抗及辣根过氧化物酶标记的山
脉瘤破裂风险较高的患者（取决于动脉瘤大小及所处位 羊抗兔免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）（英国Ab‐
置）才会进行闭塞手术，但会引起多种并发症，且复发率 cam 公司，批号分别为 ab174290、ab181315、ab300071、
较高 。IA发生机制复杂，包括内皮组织损伤、血管壁缺 ab288751、ab239882、ab270449、ab179467、ab302644）。
[2]
[3]
失、炎症及细胞凋亡等 。因此，开发新的药物以抑制瘤 1.3 实验动物
体形成、降低血管内皮组织损伤对 IA 的治疗具有重要 本研究所用动物为SPF级雄性SD大鼠，共60只，体
意义。 重 210～230 g，购自中山大学实验动物中心，生产许可
黄芪甲苷（astragaloside，AST）是从中药黄芪中提取 证号为SCXK（粤）2024-0072。购入后，将大鼠饲养在温
的活性成分，具有增强免疫、抗炎、抗凋亡、治疗心血管 度（22±2） ℃、相对湿度（60±5）%、光照时间为 12 h
[4]
疾病的功效 。研究显示，AST 可减轻氧化应激引起的
（7：00－19：00）的动物房内，饲养期间使其自由摄食和
血管内皮细胞损伤，促进血管形成，改善细胞骨架破坏； 饮水。本研究动物实验已获本院伦理委员会批准（编号
此外，AST 还可减轻肺动脉高压大鼠的炎症，促进其肺 为202404005）。
动脉内皮细胞增殖 [5―6] 。因此，笔者推测 AST 对血管内 2 方法
皮细胞损伤具有一定改善作用。IA 的发生发展与炎症
2.1 造模、分组与给药
密切相关，而核因子κB（nuclear factor-κB，NF-κB）/核苷
选取50只大鼠建立IA模型：用3%戊巴比妥钠将大
酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域 鼠麻醉，剃去大鼠背部毛发并消毒后，在其背部双侧肋
受体 3（nucleotide-binding domain leucine-rich repeat and
缘处作1.5～2 cm纵向切口，分离皮下和肌肉层，至肾脏
pyrin domain-containing receptor 3，NLRP3）作为一条炎
症相关信号通路，被激活后可促进炎症因子释放，进而 暴露出来，分离肾动脉和静脉，用0-3丝线结扎双侧肾动
[7]
促进炎症损伤 。研究显示，降低 NF-κB 表达水平可抑 脉后支，然后将肾脏复位，缝合伤口；7 d后，在手术显微
制 IA 形成，减轻氧化应激 。基于此，本研究拟对 AST 镜下用丝线结扎其左颈总动脉，并用 2% 盐水替代饮用
[8]
水3个月。造模成功标志：大鼠轻度偏瘫、颅内压和体温
改善IA大鼠动脉血管内皮组织损伤的作用进行考察，并
[9]
升高、眼神经麻痹 。造模成功的大鼠共有 43 只，取其
基于 NF-κB/NLRP3 信号通路探讨其可能的机制，为
中 40 只随机分为 IA 组、AST 低剂量组（AST-L 组）、AST
AST的临床应用提供参考。
高剂量组（AST-H 组）和 AST-H+HY-N2485 组（联用 NF-
1 材料
κB/NLRP3信号通路激活剂HY-N2485），每组10只。将
1.1 主要仪器
剩余 10 只大鼠作为假手术组（Sham 组），背部切口后即
本研究所用的主要仪器有：HD-SY96B 型酶标仪
缝合。
（山东霍尔德电子科技有限公司）、CX43型显微镜[门季
AST-L组和AST-H组大鼠分别灌胃40、80 mg/kg的
（上海）生物科技有限公司]、LD-ZQP-86 型组织切片机
AST ，AST-H+HY-N2485 组大鼠灌胃 80 mg/kg 的 AST
[6]
（山东海卓尔光电科技有限公司）、165-8001型小型垂直
[10]
电泳仪（济南欧莱博技术有限公司）。 并腹腔注射25 mg/kg的HY-N2485 ，Sham组和IA组大
1.2 主要药品与试剂 鼠灌胃并腹腔注射等体积生理盐水；每天给药 1 次，连
本研究所用的主要药品与试剂有：AST 对照品（云 续8周。
南四吉生物有限公司，批号 84687-43-4，纯度 98%），NF- 2.2 样本采集
κB/NLRP3信号通路激活剂HY-N2485（美国MCE公司， 干预结束后 12 h，将大鼠麻醉后腹主动脉取血 3
批号 33626-08-3，纯度 99.48%），肿瘤坏死因子 α（tumor mL，将新鲜血液置于离心机中，以 3 000 r/min 离心 10
necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素 18（interleukin- min，取上清液保存备测。取血后，以颈椎脱臼法处死大
18，IL-18）、IL-6、血管内皮生长因子（vascular endothelial 鼠，开颅取脑，剥离右嗅动脉和脑前动脉分叉，备测；另
growth factor，VEGF）、内皮肽（endothelin，ET）酶联免疫 取IA血管组织，冷冻待测。
吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA） 2.3 IA形态学评估
试剂盒（广州奥瑞达生物科技有限公司，批号分别为 将“2.2”项下右嗅动脉和脑前动脉分叉冷冻、切片
ARD11895、 ARD801323、 ARD801271、 SLB80076、 （厚度 5 μm），用 4 ℃预冷的丙酮固定 8 min，以 Elastica
SLB40019），弹性纤维染色液 Elastica van Gieson、苏木 van Gieson 染色，使用 BZ 软件分析动脉瘤大小、内部弹
精-伊红（HE）染色试剂和BCA试剂盒（上海尚宝生物科 性层破裂的大小和壁厚比。动脉瘤大小＝（最大内腔的

· 1618 · China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 13 中国药房 2025年第36卷第13期