Page 78 - 《中国药房》2025年4期

1 250 阿魏酸 入阿魏酸对照品 0.1 mg、藁本内酯对照品 0.4 mg，按
1 000
藁本内酯 “2.7.1（2）”项下方法制备供试品溶液；取上述供试品溶
mAU 750 液，分别按“2.7.4”“2.7.5”项下色谱条件进样测定，记录
500
250
0 峰面积，计算加样回收率。结果显示，尿苷、阿魏酸、藁
0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 本内酯的平均加样回收率分别为98.74%（RSD＝1.48%，
时间/min
A.混合对照品溶液 n＝6）、98.65%（RSD＝1.43%，n＝6）、99.15%（RSD＝
350 1.53%，n＝6），表明该方法准确度良好。
300
250 藁本内酯 2.7.12 样品含量测定
mAU 200 阿魏酸
150
100 按“2.4.4”项下最优工艺制备3批鸡内金当归褥疮软
50
0 膏，按“2.7.1”项下方法制备供试品溶液，分别按“2.7.4”
0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0
时间/min “2.7.5”项下色谱条件进样测定，记录峰面积并按标准曲
B.阿魏酸、藁本内酯供试品溶液 线法计算含量。结果显示，尿苷、阿魏酸、藁本内酯的平
800
700 均含量分别为0.081 2、0.100 0、0.396 9 mg/g。根据文献
600
500
mAU 400 [15]确定各成分的含量限度（不得低于平均含量的
300
200 80%），即以阿魏酸和藁本内酯含量总和计每克样品含
100
0 当归不得少于 0.397 5 mg，以尿苷计每克样品含鸡内金
0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0
时间/min 不得少于0.065 0 mg。结果见表8。
C.当归阴性样品溶液 表8 3批样品含量测定结果
图5 阿魏酸、藁本内酯的HPLC图
样品编号 尿苷/（mg/g） 阿魏酸/（mg/g） 藁本内酯/（mg/g）
表7 尿苷等3种成分的回归方程与线性范围 1 0.081 5 0.098 0 0.400 4
待测成分 回归方程 r 线性范围 2 0.081 9 0.101 3 0.399 7
尿苷 y＝26.542x+1.099 6 0.999 9 1.6～25.6 μg/mL 3 0.080 1 0.100 6 0.390 7
阿魏酸 y＝4 489 505x－26 647 0.999 6 0.003 15～0.100 8 mg/mL 平均含量/（mg/g） 0.081 2 0.100 0 0.396 9
藁本内酯 y＝1 584 673x－4 723.5 0.999 8 0.006～0.192 mg/mL RSD/% 1.17 1.72 1.37
2.7.8 精密度试验 3 讨论
精密吸取“2.7.7”项下尿苷标准曲线溶液（质量浓度 本研究得到的最优制备工艺为白凡士林4.0 g、液体
为 25.6 μg/mL）、“2.7.2”项下阿魏酸及藁本内酯的混合 石蜡 7.0 g、羊毛脂 5.0 g、三乙醇胺 0.44 g、乳化温度
对照品溶液，分别按“2.7.4”“2.7.5”项下色谱条件连续进 78 ℃。经验证，得到鸡内金当归褥疮软膏的平均总分为
样测定6次，记录峰面积。结果显示，尿苷、阿魏酸、藁本 9.833分，表明该工艺稳定、可行，重复性良好，可用于实
内酯峰面积的RSD分别为0.10%、0.24%、0.59%（n＝6）， 际生产。含量测定结果显示，按最优工艺制备的鸡内金
表明仪器精密度良好。 当归褥疮软膏中尿苷、阿魏酸、藁本内酯的平均含量分别
2.7.9 稳定性试验 为0.081 2、0.100 0、0.396 9 mg/g。
取“2.7.1”项下供试品溶液，分别于室温下放置0、2、 在鸡内金的薄层色谱鉴别中，由于 2020 年版《中国
6、8、12、24 h 时按“2.7.4”“2.7.5”项下色谱条件进样测 药典》（一部）未记载鸡内金的薄层色谱鉴别方法，本课
[16]
定，记录峰面积。结果显示，尿苷、阿魏酸、藁本内酯峰 题组通过查阅相关文献 ，将样品采用正丁醇饱和水溶
面积的 RSD 分别为 0.40%、0.31%、0.26%（n＝6），表明 2 液处理，再以三氯甲烷-丙酮-甲酸（9.5∶0.5∶0.1，V/V/V）作
种供试品溶液在室温下放置24 h内稳定性良好。 为展开剂，喷以含 5% 对二甲氨基苯甲醛的 10% 硫酸乙
2.7.10 重复性试验 醇溶液后，于 105 ℃加热，发现样品并未显现与对照药
精密称取按最优工艺制备的鸡内金当归褥疮软膏， 材相同的斑点；而采用“2.5.1”项下薄层色谱条件时，斑
每份 10.0 g，共 6 份，按“2.7.1”项下方法制备供试品溶 点清晰可见，分离效果良好，且无干扰。
液，再按“2.7.4”“2.7.5”项下色谱条件进样测定，记录峰 本课题组前期发现，以乙腈-0.085%磷酸为流动相，
面积并按标准曲线法计算含量。结果显示，尿苷、阿魏 采用梯度洗脱法可成功分离藁本内酯，但未能检测到阿
酸、藁本内酯含量的 RSD 分别为 0.77%、0.76%、0.11% 魏酸；进一步优化色谱条件后，将磷酸溶液浓度由
（n＝6），表明方法重复性良好。 0.085% 提升至 0.1%，成功提高了阿魏酸和藁本内酯的
2.7.11 加样回收率试验 分离度。此外，本课题组前期分别采用 30% 甲醇、50%
取已知含量的按最优工艺制备的鸡内金当归褥疮 甲醇、70% 甲醇 50 mL 为溶剂制备尿苷供试品溶液，得
软膏，每份8.0 g，共6份，精密称定，置于具塞锥形瓶中， 到尿苷的含量分别为 69.838、62.831、21.406 μg/g，表明
加入尿苷对照品 0.8 mg，按“2.7.1（1）”项下方法制备供 随着甲醇体积分数升高，尿苷含量逐步下降；分别提取
试品溶液；另取已知含量的按最优工艺制备的鸡内金当 60、90、120 min 时 ，得 到 尿 苷 的 含 量 分 别 为 39.713、
归褥疮软膏，每份 1.0 g，共 6 份，置于具塞锥形瓶中，加 81.413、77.606 μg/g，表明随着提取时间延长，尿苷含量

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