Page 26 - 《中国药房》2024年10期

内标 盐酸艾司氯胺酮 浓度的质控溶液和内标溶液，制备与前者质量浓度一致
450 420
的样品，每个浓度平行 6 份，再按“2.1”项下条件进样分
440 410
析，记录盐酸艾司氯胺酮和内标的峰面积比值（A3）。
counts 430 counts 400 按如下公式计算基质因子和提取回收率：基质因子＝
420 390
A3/A2×100%，提取回收率＝A1/A3×100%。结果见表1。
410 380 表1 盐酸艾司氯胺酮的基质因子与提取回收率结果
0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 2.4 2.8 3.2 3.6 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 2.4 2.8 3.2 3.6
t/min t/min （n＝6）
A.空白血浆
基质因子/% 提取回收率/%
质量浓度/（ng/mL）
600 内标 x±s RSD x±s RSD
400 盐酸艾司氯胺酮
500 40 72.44±2.11 2.92 83.55±6.67 7.98
400 300 400 79.39±3.92 4.94 92.51±4.17 4.28
counts 300 counts 200 1 600 78.28±1.07 1.37 85.45±3.62 4.24
200
100
100 2.4.4 精密度与准确度试验
0 0
0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 2.4 2.8 3.2 3.6 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 2.4 2.8 3.2 3.6 按“2.4.2”项下方法制备定量下限和低、中、高质量
t/min t/min
B.空白血浆+盐酸艾司氯胺酮+内标 浓度（25、40、400、1 600 ng/mL）的质控样品，每个浓度平
600 内标 1 200 盐酸艾司氯胺酮 行 6 份，按“2.3”项下方法处理后，再按“2.1”项下条件进
500 1 000
样分析，考察日内精密度；连续测定 3 d，考察日间精密
400 800
counts 300 counts 600 度；以实测质量浓度与理论质量浓度的比值作为准确
200 400
度。结果见表2。
100 200
0 0 表2 盐酸艾司氯胺酮的准确度和精密度结果
0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 2.4 2.8 3.2 3.6 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 2.4 2.8 3.2 3.6
t/min t/min 理论质量浓度/ 日内精密度（n＝6） 日间精密度（n＝3） 准确度（n＝
C.给药后5 min的血浆样品+内标
（ng/mL） 实测质量浓度（x±s）/（ng/mL） RSD/% 实测质量浓度（x±s）/（ng/mL） RSD/% 6）/%
图1 盐酸艾司氯胺酮的专属性MRM色谱图 25 24.70±1.60 6.48 24.51±1.89 7.70 94.38
40 40.22±0.50 1.25 38.58±2.64 6.85 95.18
2.4.2 标准曲线与定量下限考察
400 399.40±3.21 0.80 456.81±44.41 9.72 107.92
精密量取“2.2.1”项下系列标准工作液 10 µL，加入 1 600 1 585.93±66.07 4.17 1 631.84±67.83 4.16 98.92
空白血浆40 µL、“2.2.2”项下内标溶液10 µL和乙腈190 2.4.5 稳定性试验
µL，得到质量浓度分别为 25、50、125、250、500、1 000、 按“2.4.2”项下方法制备低、中、高质量浓度（40、
2 000 ng/mL的质控样品，按“2.3”项下方法处理后，再按 400、1 600 ng/mL）的质控样品，每个浓度平行 6 份，按
“2.1”项下条件进样分析，记录峰面积。以盐酸艾司氯胺
“2.3”项下方法处理后，再按“2.1”项下条件进样分析，分
酮质量浓度为横坐标（x）、盐酸艾司氯胺酮与内标峰面
别考察样品在室温下放置 12 h、－20 ℃反复冻融 3
积比值为纵坐标（y），采用加权最小二乘法进行回归分
次、－20 ℃放置30 d的稳定性。结果显示，各样品在上
析。结果显示，盐酸艾司氯胺酮的回归方程为 y＝
述条件下准确度偏差均在±13.28% 以内，RSD 均小于
0.000 982x+0.007 48（r＝0.999 2），表明盐酸艾司氯胺酮
10.05%（n＝6），表明各样品在上述条件下的稳定性
检测质量浓度的线性范围为25～2 000 ng/mL，定量下限
良好。
为25 ng/mL。
2.5 药动学研究
2.4.3 基质效应与提取回收率
2.5.1 分组与给药
取不同来源的大鼠空白血浆，按“2.4.2”项下方法制
将大鼠随机分为静脉注射组和滴鼻组，每组 6 只。
备低、中、高质量浓度（40、400、1 600 ng/mL）的质控样
给药前，所有大鼠称重，禁食 12 h，自由饮水，静脉注射
品，每个浓度平行 6 份，按“2.3”项下方法处理后，再按
“2.1”项下条件进样分析，记录盐酸艾司氯胺酮和内标的 组大鼠静脉注射盐酸艾司氯胺酮溶液（溶剂为生理盐
峰面积比值（A1 ）；用乙腈代替空白血浆，按“2.4.2”项下 水），滴鼻组大鼠通过滴鼻法给予盐酸艾司氯胺酮鼻喷
[5]
方法制备盐酸艾司氯胺酮和内标质量浓度与前者一致 剂，两组给药剂量均为 10 mg/kg 。给药后 2、5、10、15、
的样品，每个浓度平行 6 份，再按“2.1”项下条件进样分 20、30、60、120、240 min 时于大鼠眼眶静脉丛取血 0.4
析，记录盐酸艾司氯胺酮和内标的峰面积比值（A2 ）；取 mL，置于含有肝素钠的EP管中，4 ℃下以5 000 r/min离
空白血浆，按“2.3”项下方法处理后，加入低、中、高质量 心10 min，取上层血浆，于－20 ℃储存，待测。

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