Page 30 - 《中国药房》2024年10期

tissue， the mRNA and protein expressions of multidrug resistance-associated protein 1 （MRP1）， P-glycoprotein （P-gp）， glucose
transporter-1 （GLUT1） and lactate dehydrogenase A （LDHA）， as well as the protein expressions of PI3K， phosphorylated PI3K
（p-PI3K）， Akt， phosphorylated Akt （p-Akt）， hexokinase-2 （HK2） and pyruvate kinase M2 （PKM2） were all detected. RESULTS
With the intervention of different concentrations of cisplatin， the survival rate of MKN45/DDP-resistant cells was significantly
higher than that of MKN45 parent cells （P＜0.05）. IC50 value of MKN45/DDP and MKN45 cells were（1.052 0±0.221 9） and
（0.372 1±0.238 0）μg/mL， and the drug resistant index was 2.827. Compared with the model group， cisplatin group， Compound
lizard powder group and combination group all had certain inhibitory effects on the tumor growth in nude mice； the inhibitory rates
of tumor increased significantly （P＜0.05）； the levels of inflammatory factors， the mRNA and protein expressions of MRP1，
P-gp， GLUT1 and LDHA （except for cisplatin group）， the phosphorylation levels of PI3K and Akt protein （except for cisplatin
group） as well as the protein expressions of HK2 and PKM2 were decreased significantly， while the combination group was
significantly better than the cisplatin group （P＜0.05）. CONCLUSIONS Compound lizard powder may inhibit tumor growth in
transplanted tumor model nude mice with gastric cancer-resistant cells by reducing the secretion of tumor-related inflammatory
factors， inhibiting the expression of glycolysis， drug resistance-related proteins and genes， inhibiting the activation of the PI3K/Akt
signaling pathway， thus having a certain effect of enhancing cisplatin efficacy and reversing drug resistance.
KEYWORDS Compound lizard powder； gastric cancer； cisplatin resistance； glycolysis； PI3K/Akt signaling pathway

胃癌恶变程度高、进展快、预后差，是世界范围内常 Scientific 公司），RM2255 型全自动轮转式石蜡切片机、
见的恶性肿瘤之一。我国是胃癌高发国家之一，胃癌发 Aperio LV1 型切片扫描仪（德国 Leica 公司），Amersham
[1]
病率和病死率分别位居恶性肿瘤的第3、2位 。顺铂是 Imager 680RGB 型超灵敏多功能成像仪（美国 GE 公
胃癌患者术前/术后化疗、晚期及癌变转移患者治疗的常 司），MiniProtean Tetra型蛋白电泳系统、iMark型酶标仪
用药物，可抑制肿瘤细胞 DNA 复制，损伤其细胞膜结 （美国Bio-Rad公司），Stepone Plus型荧光定量聚合酶链
[2]
构，有较好的广谱抗肿瘤活性 。但随着用药时间的延 式反应（PCR）仪（美国ABI公司）等。
长，顺铂对肿瘤细胞的毒性会有所降低，并产生耐药性， 1.2 主要药品与试剂
[3]
从而导致临床治疗失败，患者肿瘤复发 。 复方蜥蜴散组方药材密点麻蜥、黄芪、白术、半枝
瓦伯格（Warburg）效应是肿瘤的重要代谢特征，即 莲、延胡索、山楂、白芍、山药、鹿角胶、乌梅、甘草（批号
肿瘤细胞无论是在有氧还是低氧环境下都可进行糖酵 分别为 2208036、1808123、1804052、2303340、2307204、
解，从而产生大量能量，以维持其高水平能量代谢，其中 2206048、1809146、2305020、20110903、1809011、2305057）
[4]
糖酵解途径与肿瘤细胞耐药的发生密切相关 。因此， 均购自宁夏医科大学附属中医医院，其中君药密点麻
如何调控胃癌细胞的糖酵解，从而降低顺铂耐药性已成 蜥经宁夏医科大学药学院刘艳华教授鉴定为密点麻蜥
为当前研究的焦点之一。本课题组前期研究发现，密点 Eremias multiocellata Günther 的干燥全体，其余各药
[5]
麻蜥对胃癌细胞顺铂耐药有一定的逆转作用 ；同时，以 材经宁夏医科大学中医学院李卫强教授鉴定均为
密点麻蜥为君药的复方蜥蜴散有多年的实验和临床研 真品。
究基础，可促进缺氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor- 顺铂对照品（批号 124L021，规格 100 mg，纯度≥
1α，HIF-1α）介导的磷脂酰肌醇 3 激酶（phosphoinositide 98.5%）购自北京索莱宝科技有限公司；CCK-8 试剂盒
3-kinase，PI3K）/蛋白激酶 B（protein kinase B，又称 Akt） （批号KGA311-KGA312）购自武汉博士德生物工程有限
信号通路的激活，影响上皮细胞-间充质转化（epithelial- 公司；苏木精染色液（批号BA-4041）购自珠海贝索生物
mesenchymal transition，EMT）相关蛋白的表达，从而抑 技术有限公司；免疫组化试剂盒（批号 2206C0809）购自
[6]
制胃癌细胞的侵袭、转移，阻断癌变 。基于此，本研究 北京中杉金桥生物技术有限公司；全蛋白提取试剂盒
拟以人胃癌顺铂耐药细胞 MKN45/DDP 移植瘤裸鼠为 （批号20220823）购自江苏凯基生物技术股份有限公司；
对象，初步探讨复方蜥蜴散对其糖酵解的影响及潜在机 RPMI 1640培养基、胎牛血清（fetal bovine serum，FBS）、
制，旨在为改善或逆转顺铂耐药提供实验依据。 青-链霉素双抗混合液（批号分别为 2230182、2302008、
1 材料 20220705）均购自上海达特希尔生物科技有限公司；荧
1.1 主要仪器 光定量 PCR 试剂盒（批号 MQ00401S）购自莫纳（苏州）
本研究所用主要仪器包括3111型CO2细胞培养箱、 生物科技有限公司；肿瘤坏死因子α（tumor necrosis fac‐
TM
EVOS XL Core 型 倒 置 显 微 镜（美 国 Thermo Fisher tor-α，TNF-α）、白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）酶联免

· 1180 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 10 中国药房 2024年第35卷第10期