Page 25 - 《中国药房》2024年10期
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对 NMDA 受体的亲和力比 R-氯胺酮高 3～4 倍，并且与                    验伦理由军事医学研究院实验动物中心实验室审批通
          R-氯胺酮相比，还能够减少困倦、疲劳和认知障碍等副                          过，审查编号为IACUC-DWZX-2023-P692。
          作用  [3―4] 。艾司氯胺酮与外消旋氯胺酮疗效相似，但前                     2 方法
          者有效剂量相对较低，因此艾司氯胺酮在难治性抑郁症                           2.1 色谱与质谱条件
          患者的治疗中表现出较强的抗抑郁作用 。2019年3月                         2.1.1 色谱条件
                                            [5]
          4 日，美国 FDA 批准了盐酸艾司氯胺酮鼻喷雾剂（商品                           以CAPCELL PAK-C18 （2.0 mm×50 mm，5 μm）为色
                      ®
          名SPRAVATO ）用于治疗难治性抑郁症。                             谱柱，以乙腈-0.1% 甲酸（90∶10，V/V）为流动相；流速为
              鼻腔解剖学和生理学研究表明，鼻内给药可以使药                         0.2 mL/min；柱温为 28 ℃；进样量为 10 μL；运行时间为
          物快速穿过鼻毛细血管网并经嗅觉和三叉神经到达大                            4.0 min。
                                                    [6]
          脑，从而避免胃肠和首关肝代谢的吸收限制效应 。在                           2.1.2 质谱条件
          抑郁症患者中，口服艾司氯胺酮的生物利用度不到                                 采用电喷雾离子源，以正离子模式进行多反应监测
          20%，而经鼻给予艾司氯胺酮的生物利用度可达 45%～                       （multiple reaction monitoring，MRM）；毛细管电压为
             [7]
          50% 。由于目前国内尚无盐酸艾司氯胺酮鼻喷雾剂自                          3 500 V；离子源温度为350 ℃；气流速度为10 L/min；雾
          研制剂上市，因此本研究使用自制盐酸艾司氯胺酮鼻喷                           化压力为 50 psi；用于定量分析的离子对为 m/z 238→
          剂，通过建立液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）法测定盐                       207，碎裂电压 108 eV，碰撞能量 25 V（盐酸艾司氯胺
          酸艾司氯胺酮的血药浓度，考察盐酸艾司氯胺酮鼻喷剂                           酮）；m/z 291→230，碎裂电压 140 eV，碰撞能量 25 V
          在大鼠体内的药动学及对离体牛蛙上颚黏膜的纤毛毒                           （内标）。
          性，初步评价该药在体内的生物利用度和安全性，旨在                           2.2 溶液的制备

          为该制剂的国内开发和临床应用提供参考。                                2.2.1 系列标准工作液和质控溶液
          1 材料                                                   精密称取盐酸艾司氯胺酮对照品10.00 mg，用1 mL

          1.1 主要仪器                                           水溶解后，用乙腈定容至100 mL容量瓶中，制成质量浓
              本研究所用主要仪器包括 1260 型液相色谱-G6460                   度为100 μg/mL的对照品储备液；取上述对照品储备液
          型质谱联用仪（美国 Agilent 公司）、BX53F 型光学显微                  适量，用乙腈稀释得到系列标准工作液（质量浓度分别
          镜（日本 Olympus 公司）、1-14 型高速冷冻离心机（美国                  为 50、25、12.5、6.25、3.125、1.25、0.625 μg/mL）及低、中、
          Sigma-Aldrich 公司）、XS105 型十万分之一电子天平[梅               高质量浓度（1、10、40 μg/mL）的质控溶液。
          特勒托利多科技（中国）有限公司]、Vortex Genie 2 型涡                 2.2.2 内标溶液
          旋振荡器（美国Scientific Industries公司）等。                      精密称取甲氧苄啶原料药10.00 mg，用乙腈溶解并
          1.2 主要药品与试剂                                        定容至100 mL容量瓶中，制成质量浓度为100 μg/mL的
              盐酸艾司氯胺酮对照品、原料药（纯度均≥98%，批                       内标储备液；取上述内标储备液适量，用乙腈稀释得到
          号均为20220302）和盐酸艾司氯胺酮鼻喷剂[规格14 mg                    质量浓度为100 ng/mL的内标溶液。
         （以艾司氯胺酮计），100 µL/喷，批号20230530]均由军事                  2.3 血浆样品处理
          医学研究院实验室自制；甲氧苄啶原料药（内标，纯度                               取血浆样品 40 µL，置于 1.5 mL 的 EP 管中，加入
          99%，批号 O28HS199031）购自上海源叶生物科技有限                   “2.2.2”项下内标溶液 10 μL 和乙腈 200 µL，快速涡旋振
          公 司 ；乙 腈（色 谱 级 ，批 号 F22MCK201）购 自 美 国              荡 1 min，以 14 000 r/min 离心 10 min，取 100 μL 上清液
          Thermo  Fisher  Scientific 公 司 ；甲 酸（色 谱 级 ，批 号     进样分析。
          D23251007）购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司；脱                      2.4 方法学考察
          氧胆酸钠（批号 ST2049）购自上海碧云天生物技术股份                       2.4.1 专属性
          有限公司。                                                  取不同来源的大鼠空白血浆（于给药前采取）、空白
          1.3 实验动物                                           血浆+盐酸艾司氯胺酮和给药后 5 min 的血浆样品，按
              Sprague-Dawley（SD）大 鼠 ，雄 性 ，SPF 级 ，体 重        “2.3”项下方法处理（其中空白血浆样品不加内标）后，再
          180～200 g，购自北京希诺因生物科技有限公司，动物生                      按“2.1”项下条件进样分析，记录色谱图（图1）。结果显
          产许可证号为 SCXK（京）2022-0006。所有大鼠于标准                    示，空白血浆样品中内源性物质对盐酸艾司氯胺酮及内
          环境下适应性饲养 1 周。健康牛蛙，雌性和雄性，普通                         标的测定均无干扰，内标对盐酸艾司氯胺酮的测定亦无
          级，体重 400～500 g，购自北京岳各庄农贸市场。本实                      干扰，表明该方法专属性良好。


          中国药房  2024年第35卷第10期                                              China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 10    · 1175 ·
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