Page 35 - 《中国药房》2024年6期

度组呈绿色荧光的活细胞数量均明显增加，呈红色荧光 HO-1 蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05 或 P＜0.01），
的损伤或死亡细胞数量均明显减少。 Nrf2 蛋白表达水平有升高趋势，但差异无统计学意义
（P＞0.05）；与模型组比较，HDP 低浓度组 L02 细胞中
Nrf2、NQO1 蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05），HDP
正常组 高浓度组 L02 细胞中 Sirt1、Nrf2、NQO1、HO-1 蛋白表达

水 平 均 显 著 升 高（P＜0.05 或 P＜0.01）。 结 果 见 图
7、图8。
模型组 Sirt1 120 kDa

Nrf2 110 kDa
HDP低浓度组 NQO1 30 kDa

HO-1 32 kDa
HDP高浓度组 GAPDH 正常组 模型组 HDP低浓度组 HDP高浓度组 36 kDa

图7 各组L02细胞中Sirt1、Nrf2、NQO1、HO-1蛋白表
PI AO Merge 达的电泳图
图5 各组L02细胞存活情况AO/PI荧光染色图
1.5 1.6 c
3.3.4 L02 细胞上清液中 AST、ALT 水平及细胞裂解液 1.2 a b b
中GSH含量的测定结果 Sirt1/GAPDH 0.9 Nrf2/GAPDH 1.2
与正常组比较，模型组 L02 细胞上清液中 AST 和 0.6 0.8
0.3
ALT 水平均显著升高（P＜0.01），细胞裂解液中 GSH 含
0 0.4
量显著降低（P＜0.01）。与模型组比较，HDP 低浓度组 正常组 模型组 HDP低 HDP高 正常组 模型组 HDP低 HDP高
浓度组 浓度组
浓度组 浓度组
L02 细胞上清液中 AST 水平显著降低（P＜0.05）；HDP A. Sirt1 B. Nrf2
0.4 0.5
高浓度组L02细胞上清液中AST、ALT水平均显著降低 b b 0.4
（P＜0.05），细 胞 裂 解 液 中 GSH 含 量 显 著 升 高（P＜ 0.3 d 0.3 d b
0.01）。结果见图6。 NQO1/GAPDH 0.2 HO-1/GAPDH 0.2
150 100 0.1 0.1
80 a 0 0
a
（ U/L ） 100 （ U/L ） 60 b 正常组 模型组 HDP低 HDP高 正常组 模型组 HDP低 HDP高
浓度组 浓度组
浓度组 浓度组
AST/ 50 b b ALT/ 40 C. NQO1 D. HO-1
20 a：与正常组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与模型组
比较，P＜0.01；d：与正常组比较，P＜0.05。
0 0
正常组 模型组 HDP低 HDP高 正常组 模型组 HDP低 HDP高 图8 各组L02细胞中Sirt1、Nrf2、NQO1、HO-1蛋白表
浓度组 浓度组 浓度组 浓度组
A. AST B. ALT 达水平的测定结果（x±s，n＝3）
30 4 讨论
（ μg/mg prot ） 20 c 异烟肼诱导的肝损伤与线粒体呼吸链酶活性抑制、
25
15
GSH/ 10 5 a 通透性转化孔持续开放、动力学失衡等功能障碍密切相
0 关，其可导致线粒体膜通透性增加、肿胀畸形、数量减
[6]
正常组 模型组 HDP低 HDP高 少、嵴密度降低等 ，这与本研究结果一致。HDP能显著
浓度组 浓度组
C. GSH 改善异烟肼诱导的斑马鱼肝组织病理变化，尤其是对线
a：与正常组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与模型组 粒体形态、嵴密度等有较好的恢复作用，提示 HDP 对肝
比较，P＜0.01。
损伤的改善作用可能与调控线粒体功能相关。后期本
图6 各组 L02 细胞上清液中 AST、ALT 水平及细胞裂
研究团队将进一步探讨HDP对线粒体功能的影响。
解液中GSH含量的测定结果（x±s，n＝3）
异烟肼可诱导氧化还原蛋白Nrf2核外表达积累，抑
3.3.5 L02 细胞中 Sirt1/Nrf2 信号通路相关蛋白表达的 制 Nrf2 入核，导致肝细胞抗氧化能力降低而发生损伤，
[14]
测定结果 故氧化应激是异烟肼致肝损伤的重要因素 。Sirt1 作
与正常组比较，模型组 L02 细胞中 Sirt1、NQO1、 为细胞氧化还原状态的传感器和氧化应激的保护器，可

中国药房 2024年第35卷第6期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 6 · 669 ·