Page 34 - 《中国药房》2024年6期

3.2.2 HDP对斑马鱼肝脏荧光面积及荧光强度的影响
与正常组比较，模型组斑马鱼肝脏荧光面积和荧光
强度均显著减小（P＜0.01），说明肝损伤造模成功；与模
型组比较，HDP 低、高浓度组斑马鱼肝脏荧光面积均显
著增加（P＜0.05或P＜0.01），HDP高浓度组斑马鱼肝脏

荧光强度显著增加（P＜0.01）。结果见表2。
A.正常组 B.模型组
表2 各组斑马鱼肝脏荧光面积和荧光强度的测定结果
（x±s，n＝8）
组别 荧光面积/% 荧光强度/% 组别 荧光面积/% 荧光强度/%
正常组 100.00±4.78 100.00±4.67 HDP低浓度组 82.27±2.82 b 73.12±3.20
模型组 75.19±4.55 a 70.18±3.50 a HDP高浓度组 98.05±1.84 c 83.78±2.59 c
a：与正常组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与模型组
比较，P＜0.01。
C. HDP低浓度组 D. HDP高浓度组
3.2.3 HDP对斑马鱼肝组织病理变化的影响
红色箭头：细胞核萎缩、畸变；黄色箭头：线粒体的数量和嵴；蓝色
与正常组比较，模型组斑马鱼肝细胞胞浆稀疏、核 箭头：线粒体形状扭曲变形。
萎缩、空泡化及炎症细胞聚集，出现明显的肝损伤坏死 图2 各组斑马鱼肝组织超微病理变化的显微镜图（醋
特征；与模型组比较，HDP低、高浓度组斑马鱼上述肝损 酸铀、柠檬酸铅染色）
伤坏死特征均有不同程度改善。结果见图1。 150 200
细胞存活率/% 100 细胞存活率/% 100
150
50
50
0 0
0 2 4 8 16 32 1 2 4 8 16 32
A.正常组 B.模型组 异烟肼/（mmol/L） HDP/（mg/mL）
A.异烟肼 B. HDP
图3 异烟肼和HDP对L02细胞存活率的影响
3.3.2 L02细胞存活率的测定结果
与正常组比较，模型组 L02 细胞存活率显著降低
（P＜0.01）；与模型组比较，HDP 低、高浓度组 L02 细胞
C. HDP低浓度组 D. HDP高浓度组
图1 各组斑马鱼肝组织病理变化的显微镜图（HE染色） 存活率均显著升高（P＜0.05或P＜0.01）。结果见图4。
120
3.2.4 HDP对斑马鱼肝组织超微病理变化的影响 c
与正常组比较，模型组斑马鱼肝细胞核出现萎缩、 b
畸变，线粒体的数量和嵴均明显减少、形状发生扭曲变 细胞存活率/% 80 a
形；与模型组比较，HDP低、高浓度组斑马鱼肝细胞核和
线粒体的病理变化均有不同程度改善，其中HDP高浓度
40
组改善更明显。结果见图2。
正常组 模型组 HDP低 HDP高
3.3 HDP对异烟肼致L02细胞损伤的保护作用及机制 浓度组 浓度组
a：与正常组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与模型组
3.3.1 异烟肼和HDP干预浓度的筛选结果
比较，P＜0.01。
如图3（A）所示，L02细胞存活率随异烟肼浓度的升 图4 各组L02细胞存活率的测定结果（x±s，n＝4）
高而降低，当异烟肼浓度为 4 mmol/L 时，细胞存活率约
3.3.3 L02细胞存活情况的染色结果
为 80%，满足 Western blot 实验提取蛋白的要求，综合考 AO 可透过正常细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色
虑选择 4 mmol/L 作为异烟肼诱导肝损伤的给药浓度。 均匀荧光；PI无膜通透性，不能透过活细胞膜，只能进入
如图3（B）所示，L02细胞存活率随HDP质量浓度的升高 损伤的细胞及死细胞，呈红色荧光。如图5所示，正常组
而降低，当 HDP 质量浓度大于 4 mg/mL 时，细胞存活率 视野以绿色荧光的活细胞为主；与正常组比较，模型组
低于 100%，综合考虑选择 2、4 mg/mL 作为 HDP 干预的 呈绿色荧光的活细胞数量明显减少，呈红色荧光的损伤
低、高浓度。 或死亡细胞数量明显增加；与模型组比较，HDP低、高浓

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