Page 34 - 《中国药房》2024年5期

Cel 及其衍生物的毒性干扰，后续实验选择对细胞生长 p-PI3K 85 kDa
无 显 著 影 响 的 药 物 浓 度（0.625、0.313、0.156、0.078、
PI3K 110 kDa
0.039 μmol/L）来评估其抗氧化损伤活性。
β-actin 43 kDa
3.2.2 Cel 及其衍生物对 SH-SY5Y 细胞存活率的影响
对照组 模型组 Cel-2低 Cel-2中 Cel-2高
浓度组 浓度组 浓度组
结果 A.磷酸化PI3K蛋白
与对照组比较，模型组细胞存活率显著降低（P＜ p-Akt 60 kDa
0.01）。与模型组比较，Cel 及其衍生物的不同浓度组细
Akt 60 kDa
胞存活率呈浓度依赖性趋势升高，并且 0.313、0.625
β-actin 43 kDa
μmol/L Cel 及其衍生物均可显著逆转 H2O2处理后细胞
对照组 模型组 Cel-2低 Cel-2中 Cel-2高
存活率降低的现象（P＜0.05 或 P＜0.01）。Cel、Cel-1、 浓度组 浓度组 浓度组
B.磷酸化Akt蛋白
Cel-2 神 经 保 护 的 EC50 分 别 为（0.43±0.08）、（0.45±
Bcl-2 26 kDa
0.04）、（0.28±0.03） μmol/L（n＝5）。可见，Cel-2 的神经
Bax 21 kDa
保护活性最强。结果见图3。
caspase-3 35 kDa
125 125
β-actin 43 kDa
100 100 对照组 模型组 Cel-2低 Cel-2中 Cel-2高
c b c C. caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白 浓度组
浓度组
浓度组
细胞存活率/% 75 a 细胞存活率/% 75 a 图4 各组细胞中凋亡相关蛋白表达检测的电泳图
b
50
50
25 25 表2 各组细胞中凋亡相关蛋白的表达水平测定结果
（x±s，n＝3）
0 0
Bax/
对照组 模型组 Cel 0.039 μmol/L组 Cel 0.078 μmol/L组 Cel 0.156 μmol/L组 Cel 0.313 μmol/L组 Cel 0.625 μmol/L组 对照组 模型组 Cel-1 0.039 μmol/L组 Cel-1 0.078 μmol/L组 Cel-1 0.156 μmol/L组 Cel-1 0.313 μmol/L组 Cel-1 0.625 μmol/L组 组别 p-PI3K/ p-Akt/ caspase-3/ Bcl-2/ β-actin Bcl-2/
β-actin
PI3K
Akt
β-actin
Bax
A. Cel B. Cel-1 对照组 1.00±0.18 a 1.00±0.13 a 1.00±0.14 a 1.00±0.10 a 1.00±0.13 a 1.00±0.04 a
1.40±0.17
模型组
0.59±0.16
1.32±0.03
0.45±0.13
0.61±0.05
0.55±0.18
125 Cel-2低浓度组 0.63±0.10 0.88±0.21 b 1.40±0.30 0.96±0.02 b 1.13±0.06 b 0.85±0.06 b
c Cel-2中浓度组 1.04±0.21 b 0.97±0.25 b 1.17±0.30 b 1.11±0.10 c 0.94±0.11 c 1.19±0.08 c
100 c Cel-2高浓度组 1.29±0.28 b 1.25±0.11 c 0.94±0.28 c 1.21±0.13 c 0.79±0.15 c 1.56±0.15 c
细胞存活率/% 75 a b 比较，P＜0.01。
a：与对照组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与模型组
50
25 4 讨论
随着老龄化群体的增加，神经退行性疾病的发病率
0
对照组 模型组 Cel-2 0.039 μmol/L组 Cel-2 0.078 μmol/L组 Cel-2 0.156 μmol/L组 Cel-2 0.313 μmol/L组 Cel-2 0.625 μmol/L组 在不断攀升，预防与年龄相关的神经退行性疾病是老龄
化社会的一个重要问题 。其中，神经炎症和氧化应激
[13]
C. Cel-2 是神经退行性疾病较为常见的病理表现 [7，10] 。已有研究
a：与对照组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与模型组 表明，Cel 在 LPS 诱导的人神经胶质瘤细胞神经炎症模
比较，P＜0.01。 型中，可显著抑制活性氧产生 ；Cel 在 H2O2诱导的人视
[2]
图3 各组 SH-SY5Y 细胞存活率测定结果（x±s，n＝
网膜色素上皮细胞中具有减弱氧化损伤和抑制细胞凋
4，%%）
[14]
亡的作用 。本研究结果显示，Cel 及其衍生物 Cel-1、
3.3 衍生物 Cel-2 对 SH-SY5Y 细胞中凋亡相关蛋白表 Cel-2 在一定浓度下具有神经保护作用，其神经保护作
达的影响结果 用大小依次为Cel-2＞Cel＞Cel-1，细胞毒性大小依次为
与对照组比较，模型组细胞中 PI3K、Akt 蛋白的磷 Cel＞Cel-2＞Cel-1。
酸化水平及 Bcl-2 蛋白表达水平均显著降低（P＜0.01）， 凋亡是一种由基因高度调控的程序性细胞死亡方
caspase-3、Bax蛋白表达水平和Bcl-2/Bax比值均显著升 式，过度的细胞凋亡可能导致多种疾病的发生 。已有
[15]
高（P＜0.01）；与模型组比较，Cel-2 中、高浓度组细胞中 研究报道，激活后的 BV2 细胞可引起炎症反应，进一步
PI3K、Akt 蛋白的磷酸化水平及 Bcl-2 蛋白表达水平、 损伤神经元；氧化损伤的 SH-SY5Y 细胞可使神经元凋
Bcl-2/Bax 比值均显著升高（P＜0.05 或 P＜0.01），cas‐ 亡 [7，9―10] 。caspase-3/Bcl-2/Bax 信号通路是细胞凋亡发生
pase-3、Bax 蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05 或 P＜ 发展的重要途径，Bcl-2 家族蛋白是调控凋亡因子释放
[16]
0.01）。结果见图4、表2。 的主要分子，caspase-3 是细胞凋亡的中心调节分子 。

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