Page 30 - 《中国药房》2024年5期

雷公藤红素及其衍生物的体外神经保护作用与机制研究
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陈佩佩 ，袁晓煊 ，张 鑫 ，徐 伟 ，许少华 （1.福建中医药大学药学院，福州 350122；2.中国中医科学院
道地药材国家重点实验室，北京 100700）
中图分类号 R965；R285 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2024）05-0536-06
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2024.05.05

摘 要 目的 从神经炎症和氧化损伤 2 个方面探究雷公藤红素（Cel）及其衍生物 Cel-1、Cel-2 的神经保护作用及可能机制。
方法 利用1 μg/mL脂多糖（LPS）诱导建立小胶质BV2细胞神经炎症模型、200 μmol/L过氧化氢（H2O2 ）诱导建立人神经母细胞瘤
SH-SY5Y细胞氧化损伤模型，考察不同浓度（0.625～20 μmol/L）Cel、Cel-1、Cel-2对2种细胞的毒性；并在安全浓度（0.039～0.625
μmol/L）范围内检测LPS诱导BV2细胞培养液中一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、IL-6含量，检
测H2O2诱导SH-SY5Y细胞的存活率。检测0.156、0.313、0.625 μmol/L活性化合物Cel-2作用后H2O2诱导SH-SY5Y细胞中磷脂酰
肌醇3激酶（PI3K）、磷酸化PI3K（p-PI3K）、蛋白激酶B（Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）、胱天蛋白酶3（caspase-3）、B淋巴细胞瘤2（Bcl-2）
和Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达水平。结果 在0.039～0.625 μmol/L浓度梯度区间，神经炎症模型实验显示，Cel、Cel-1、Cel-2均可
降低BV2细胞培养液中NO、TNF-α、IL-1β、IL-6的含量（P＜0.05或P＜0.01），其对神经炎症的半数抑制浓度分别为（0.25±0.04）、
（0.61±0.14）、（0.11±0.02） μmol/L；氧化损伤模型实验显示，Cel、Cel-1、Cel-2 在一定浓度下可逆转 H2O2处理后 SH-SY5Y 细胞存
活率降低的现象（P＜0.05或P＜0.01），其神经保护的半数效应浓度分别为（0.43±0.08）、（0.45±0.04）、（0.28±0.03） μmol/L。经H2O2
诱导，Cel-2干预后SH-SY5Y 细胞中 PI3K、Akt 蛋白的磷酸化水平和 Bcl-2 蛋白表达水平、Bcl-2/Bax 比值均显著升高（P＜0.05 或
P＜0.01），caspase-3、Bax蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05或P＜0.01）。结论 Cel、Cel-1、Cel-2在一定浓度下均具有显著的神经
保护活性，且以Cel-2的活性最强；Cel-2的作用机制可能与调控PI3K/Akt、caspase-3/Bcl-2/Bax信号通路，减轻炎症反应、氧化应激
损伤，抑制神经细胞凋亡有关。
关键词 雷公藤红素；衍生物；神经保护作用；神经炎症；氧化应激

Neuroprotective effect and mechanism of celastrol and its derivatives in vitro
CHEN Peipei ，YUAN Xiaoxuan ，ZHANG Xin ，XU Wei ，XU Shaohua （1. College of Pharmacy， Fujian
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University of Traditional Chinese Medicine， Fuzhou 350122， China；2. State Key Laboratory of Dao-di Herbs，
China Academy of Chinese Medical Sciences， Beijing 100700， China）
ABSTRACT OBJECTIVE To explore the neuroprotective effect and possible mechanism of celastrol （Cel） and its derivatives
（Cel-1， Cel-2） in terms of neuroinflammation and oxidative damage. METHODS Neuroinflammation model of microglial BV2
cells was induced by 1 μg/mL lipopolysaccharide （LPS）； oxidative damage model of human neuroblastoma SH-SY5Y cells was
induced by 200 μmol/L hydrogen peroxide （H2O2 ）. The toxicity of different concentrations of Cel， Cel-1 and Cel-2 （0.625-20
μmol/L） to the two types of cells was investigated. The levels of nitric oxide （NO）， tumor necrosis factor α （TNF-α）， interleukin
1β （IL-1β）， and IL-6 in BV2 cells induced by LPS at safe concentrations （0.039-0.625 μmol/L） were all detected. The survival
rate of SH-SY5Y cells induced by H2O2 was also determined. The expression levels of phosphoinositide 3-kinase （PI3K）， p-PI3K，
protein kinase B （Akt）， p-Akt， cystatinase 3 （caspase-3）， B-cell lymphoma 2 （Bcl-2） and Bcl-2-related X protein （Bax） in SH-
SY5Y cells induced by H2O2 at 0.156， 0.313， 0.625 μmol/L of active compound 2 were all detected. RESULTS In the
concentration gradient range between 0.039 and 0.625 μmol/L， the results of neuroinflammation model experiments showed that
Cel， Cel-1 and Cel-2 could reduce the contents of NO， TNF-α， IL-1β， and IL-6 in culture medium of BV2 cells （P＜0.05 or P＜
0.01）； their IC50 values for neuroinflammation were （0.25±0.04）， （0.61±0.14） and （0.11±0.02） μmol/L respectively.
Meanwhile， all of them could reverse the phenomenon of
Δ 基金项目 国家自然科学基金项目（No.82104321）；中央本级 decreased cell survival rate after H2O2 treatment in the
重 大 增 减 支 项 目（No. 2060302）；福 建 省 自 然 科 学 基 金 项 目（No. oxidative damage experiments at a certain concentration （P＜
2020J05062）；福建中医药大学基础类学科科研提升计划项目（No. 0.05 or P＜0.01）， with neuroprotective EC50 values of （0.43±
XJC2023009） 0.08）， （0.45±0.04） and （0.28±0.03） μmol/L， respectively.
＊第一作者 硕士研究生。研究方向：中药资源及品质评价。
Induced by H2O2， the phosphorylation of PI3K and Akt
E-mail：2459751484@qq.com
# 通信作者 副教授，硕士生导师。研究方向：中药化学成分与活 protein， protein expressions of Bcl-2 and Bcl-2/Bax ratio were
性。E-mail：xushaohua@fjtcm.edu.cn all increased significantly （P＜0.05 or P＜0.01）， while the

· 536 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 5 中国药房 2024年第35卷第5期