Page 62 - 《中国药房》2024年2期

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17 kDa 反应，生成氧化型谷胱甘肽和 H2O，从而消除 ROS ；
C-caspase-3 19 kDa
CAT 能催化 H2O2生成 H2O 与 O2。氧化应激能导致细胞
GAPDH 37 kDa 脂质过氧化，MDA是脂质过氧化的产物，其水平与氧化
对照组 低氧组 DMF干 GW501516 GW501516+ 应激呈负相关。Nrf2 激活剂能够通过上调肺动脉组织
预组 干预组 ML385干预组
A. C-caspase-3蛋白表达电泳图 内 SOD、HO-1 活性，降低 MDA 及 ROS 水平，抑制低氧
4 [19]
a 诱导的氧化应激，从而缓解大鼠低氧肺血管重构 。在
高糖诱导人脐静脉血管内皮细胞氧化应激的细胞模型
3
C-caspase-3/GAPDH 2 b b c 中 发 现 ，PPARδ 激 动 剂 GW0742 和 L165041 可 激 活
Nrf2，并以浓度依赖的方式上调人脐静脉血管内皮细胞
内 HO-1 蛋白和 mRNA 的表达，抑制 ROS 产生，从而发
1
[20]
挥保护人脐静脉血管内皮细胞的作用 。在内皮细胞
0
对照组 低氧组 DMF干 GW501516 GW501516+ 中，GW0742通过诱导SOD、CAT等抗氧化酶的表达，减
预组 干预组 ML385干预组
B. C-caspase-3蛋白表达柱状图（n＝3） [2]
少肿瘤坏死因子α诱导的内皮细胞产生ROS 。内皮细
a：与 对 照 组 比 较 ，P＜0.05；b：与 低 氧 组 比 较 ，P＜0.05；c：与
GW501516干预组比较，P＜0.05。 胞特异性 PPARδ 基因敲除小鼠主动脉内 CAT 和 GPx 的
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图5 GW501516 对低氧条件下 PAECs 中 C-caspase-3 表达降低，氧化应激增强 。本研究发现，Nrf2 激活剂
蛋白表达水平的影响 DMF 和 GW501516 均可升高 Nrf2 蛋白、HO-1 蛋白的表
达水平及 SOD、GPx、CAT 水平，降低 MDA、ROS 水平，
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氧诱导的内皮祖细胞凋亡 。本研究发现，在低氧刺激
减轻低氧诱导的 PAECs 损伤，且 Nrf2 抑制剂 ML385 能
下，PAECs 中 PPARδ 蛋白表达水平降低，细胞凋亡率升
够逆转 GW501516 的上述作用。这说明 GW501516 可
高，C-caspase-3表达水平升高，细胞活力降低，LDH活性
通过抑制氧化应激，减轻低氧诱导的 PAECs 损伤，其机
升高；而 GW501516 可上调 PPARδ 蛋白的表达，抑制低
制可能与激活Nrf2有关。
氧 诱 导 的 PAECs 损 伤 ，且 实 验 浓 度 的 GW501516 对
综上所述，GW501516可通过激活Nrf2，抑制氧化应
PAECs无明显细胞毒性。因此，本课题组推测低氧通过
激来减轻低氧诱导的 PAECs 损伤。本研究仅从细胞水
抑制PPARδ蛋白表达来损伤内皮细胞，GW501516则通
平探讨了 GW501516 对低氧诱导 PAECs 损伤及氧化应
过激活PPARδ来发挥保护内皮细胞的作用。
激 的 影 响 ，本 课 题 组 将 在 后 续 动 物 实 验 中 观 察
低氧能够诱导氧化应激，导致 PAECs 的损伤和凋
GW501516 对低氧诱导的肺动脉高压大鼠内皮细胞功
亡 ，抑 制 氧 化 应 激 可 抑 制 PAECs 损 伤 及 HPH 的 形
能、氧化应激及肺血管重构的影响。
成 [1,13―14] 。有研究表明，PPARδ能够抑制高糖诱导的血管
参考文献
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内皮功能障碍及 ROS 的产生 。在动脉粥样硬化的动
[ 1 ] EVANS C E，COBER N D，DAI Z Y，et al. Endothelial
物模型中发现，PPARδ 可减少 ROS 的产生，从而发挥保
cells in the pathogenesis of pulmonary arterial hyperten‐
[16]
护内皮细胞的作用 。另有研究表明，GW501516 能够 sion[J]. Eur Respir J，2021，58（3）：2003957.
通过抑制 ROS 产生而抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管平 [ 2 ] XIAO L，WANG N P. PPAR-δ：a key nuclear receptor in
[5]
滑肌细胞肥大 。本研究发现，GW501516 及 NAC 均可 vascular function and remodeling[J]. J Mol Cell Cardiol，
抑制低氧诱导的PAECs损伤及ROS产生。因此，本课题 2022，169：1-9.
组推测 GW501516 可通过抑制氧化应激来抑制低氧诱 [ 3 ] BOJIC L A，BURKE A C，CHHOKER S S，et al. Peroxi‐
导的PAECs损伤。 some proliferator-activated receptor δ agonist GW1516
Nrf2是一种参与氧化应激的关键转录因子，其在细 attenuates diet-induced aortic inflammation，insulin resis‐
tance，and atherosclerosis in low-density lipoprotein recep‐
胞核内可与抗氧化反应元件结合，来促进下游抗氧化酶
tor knockout mice[J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol，
或蛋白的表达，从而发挥抗氧化应激作用。CAT、GPx、
2014，34（1）：52-60.
HO-1 和 SOD 是 Nrf2 通路下游的主要抗氧化酶。其中，
[ 4 ] TIAN D Y，MENG J Q，LI L，et al. Hydrogen sulfide ame‐
HO-1 可降解血红素，产生一氧化碳、亚铁和胆绿素，而
liorates senescence in vascular endothelial cells through
HO-1以及血红素分解代谢产物均具有抗氧化作用，并 ameliorating inflammation and activating PPARδ/SGLT2/
[17]
能够缓解肺血管重构 ；SOD可将超氧化自由基分解为 STAT3 signaling pathway[J]. Acta Biochim Biophys Sin，
H2O2，促进氧自由基的清除，上调SOD活性，减轻肺血管 2023，55（9）：1358-1369.
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重构 ；GPx可催化谷胱甘肽与H2O2或其他过氧化物的 [ 5 ] KANG E S，HWANG J S，LEE W J，et al. Ligand-

· 184 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 2 中国药房 2024年第35卷第2期