Page 61 - 《中国药房》2024年2期

10 6.8 10 6.8
HO-1 28 kDa
10 6 10 6
10 5 10 5
GAPDH 37 kDa
PI-H PI-H
10 4 10 4
Nrf2 100 kDa
10 3 10 3
10 2.3 10 2.3
Lamin B1 68 kDa 10 10 10 10 10 10 7.7 10 10 10 10 10 10 7.7
6
7
3.7
4
7
4
3.7
5
5
6
FITC-H FITC-H
对照组 低氧组 DMF干 GW501516 GW501516+ A.对照组 B.低氧组
预组 干预组 ML385干预组
10 6.8 10 6.8
A. HO-1蛋白与细胞核内Nrf2蛋白表达的电泳图
10 6 10 6
2.0 HO-1
Nrf2
b 10 5 10 5
1.5 PI-H 10 4 PI-H 10 4
蛋白相对表达量 1.0 b b b 10 3 10 3
0.5
7
6
6
5
4
3.7
4
5
7
3.7
a a c c 10 2.3 10 10 10 10 10 10 7.7 10 2.3 10 10 10 10 10 10 7.7
FITC-H FITC-H
0 C. DMF干预组 D. GW501516干预组
对照组 低氧组 DMF干 GW501516 GW501516+ 10 6.8
预组 干预组 ML385干预组
B. HO-1蛋白与细胞核内Nrf2蛋白表达的柱状图（n＝3） 10 6
a：与 对 照 组 比 较 ，P＜0.05；b：与 低 氧 组 比 较 ，P＜0.05；c：与
10 5
GW501516干预组比较，P＜0.05。 PI-H
图3 GW501516 对低氧条件下 PAECs 中 HO-1 蛋白和 10 4
细胞核内Nrf2蛋白表达水平的影响 10 3
10 2.3
（P＜0.05）；与低氧组比较，DMF干预组和GW501516干 10 10 10 10 10 10 7.7
7
4
6
3.7
5
FITC-H
预组 PAECs 中 SOD、GPx、CAT 水平均显著升高（P＜ E. GW501516+ML385干预组
0.05），MDA、ROS 水 平 均 显 著 降 低（P＜0.05）；与 图4 机制研究中各组细胞的凋亡流式图
GW501516 干 预 组 比 较 ，GW501516+ML385 干 预 组 表3 机制研究中 PAECs 的凋亡率、细胞活力、LDH 活
PAECs 中 SOD、GPx、CAT 水平均显著降低，MDA、ROS 性的检测结果（x±s）
水平均显著升高（P＜0.05）。结果见表2。 组别 细胞凋亡率（n＝3）/% 细胞活力（n＝6）/% LDH活性（n＝6）
表2 PAECs 中 SOD、GPx、CAT、MDA、ROS 水平的检 对照组 4.69±0.82 100.00±6.06 1.00±0.09
测结果（x±s，n＝6） 低氧组 21.55±3.13 a 73.85±4.58 a 8.65±0.81 a
DMF干预组 12.94±2.06 b 87.11±6.23 b 4.67±0.35 b
组别 SOD GPx CAT MDA ROS b b b
GW501516干预组 9.24±1.86 84.86±5.82 3.26±0.51
对照组 1.00±0.08 1.00±0.15 1.00±0.09 1.00±0.08 1.00±0.12 GW501516+ML385干预组 22.92±3.54 c 73.04±4.24 c 8.05±0.78 c
低氧组 0.48±0.05 a 0.15±0.01 a 0.30±0.04 a 7.56±0.81 a 7.62±0.56 a
DMF干预组 0.95±0.06 b 0.76±0.05 b 0.75±0.05 b 2.38±0.38 b 2.53±0.15 b a：与 对 照 组 比 较 ，P＜0.05；b：与 低 氧 组 比 较 ，P＜0.05；c：与
GW501516干预组比较，P＜0.05。
GW501516干预组 0.87±0.07 b 0.58±0.07 b 0.94±0.10 b 3.66±0.26 b 2.79±0.11 b
GW501516+ML385干预组 0.34±0.03 c 0.12±0.02 c 0.25±0.03 c 6.15±0.52 c 5.81±0.47 c 4 讨论
a：与 对 照 组 比 较 ，P＜0.05；b：与 低 氧 组 比 较 ，P＜0.05；c：与 低氧能够诱导 PAECs 损伤，使其凋亡增加，抑制
GW501516干预组比较，P＜0.05。
[1]
PAECs 损伤和凋亡能够逆转 HPH 。正常条件下 LDH
3.4.3 PAECs 的 凋 亡 率 、细 胞 活 力 、LDH 活 性 和 C-
不能穿透细胞膜，但当细胞受损或死亡后，LDH 可以释
caspase-3蛋白表达水平的检测结果
[10]
放到细胞外，其释放水平能够反映细胞损伤程度 。
与对照组比较，低氧组PAECs的凋亡率、C-caspase-
caspase-3 是调控细胞凋亡的关键介质，可被外源性（死
3蛋白表达水平、LDH活性均显著升高，细胞活力显著降
亡配体）和内源性（线粒体）凋亡途径激活，是最重要的
低（P＜0.05）；与低氧组比较，DMF干预组和GW501516
胱天蛋白酶。caspase-3 激活后生成的 C-caspase-3 是细
干预组 PAECs 的凋亡率、C-caspase-3 蛋白表达水平、
LDH活性均显著降低，细胞活力均显著升高（P＜0.05）； 胞凋亡的主要执行者之一，亦是细胞凋亡的标志蛋
[11]
与 GW501516 干预组比较，GW501516+ML385 干预组 白 。研究发现，PPARδ合成型激动剂L-165041能够抑
PAECs 的凋亡率、C-caspase-3 蛋白表达水平、LDH 活性 制 H2O2诱导的人脐静脉血管内皮细胞损伤，抑制其凋
均显著升高，细胞活力显著降低（P＜0.05）。结果见图 亡，而PPARδ的沉默逆转了这种作用 。此外，PPARδ可
[2]
4、表3、图5。 通过激活磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B通路来抑制缺
中国药房 2024年第35卷第2期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 2 · 183 ·