Page 30 - 《中国药房》2024年2期

表明供试品溶液在室温下放置18 h内稳定性良好。 表2 15批光皮木瓜特征峰相对保留时间和相对峰面积
2.1.6 重复性试验 的统计结果
取编号为 S2 的光皮木瓜药材粉末，按照“2.1.2”项 相对保留时间 相对峰面积
峰号 λ max/nm
下方法平行制备供试品溶液 6 份，再按照“2.1.1”项下色 平均值 RSD/% 平均值 RSD/%
1（绿原酸） 326 0.66 0.35 1.78 95
谱条件进样测定。以芦丁为参照峰，计算得到各共有峰 2（芦丁，参照峰） 255，351 a 1.00 0 1.00 0
相对保留时间的RSD均小于0.21%（n＝6），相对峰面积 3（金丝桃苷） 256，358 a 1.09 0.23 0.29 72
4 256，351 a 1.12 0.13 0.34 24
的RSD均小于3.73%（n＝6），表明方法重复性良好。
5 253，349 a 1.17 0.18 1.93 50
2.1.7 光皮木瓜特征图谱的建立与相似度评价 6 268，338 a 1.25 0.21 0.46 48
分别精密称取 15 批光皮木瓜药材（编号 S1～S15） 7 255，351 a 1.34 0.20 0.26 62
8（槲皮苷） 256，347 a 1.39 0.21 0.76 32
粉末 1.0 g，按照“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，再按
9 266，337 a 1.52 0.24 3.00 59
照“2.1.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图。将15批 10 252，345 1.59 0.25 0.68 58
样品的色谱图以AIA文件格式导入《中药色谱指纹图谱 11 313 1.80 0.34 0.37 154
相似度评价系统（2012版）》，以图谱轮廓较为典型的S1 a：典型的黄酮带Ⅰ、带Ⅱ吸收光谱。
为参照图谱，采用多点校正法进行匹配，以平均数法生 2.1.9 不同地区光皮木瓜药材的差异分析
成对照指纹图谱（R）。样品叠加图谱和对照指纹图谱见 使用SPSS 23.0软件对15批光皮木瓜药材HPLC特
图1。将15批样品与对照指纹图谱进行相似度评价，结 征图谱的10个特征峰[2号峰～11号峰，由于1号峰绿原
酸在同一产地的不同样品中亦可发生较大变化（如样品
果显示，15 批样品共确定了 11 个特征峰，相似度为
S1 和 S2 中，S3 和 S4 中），故不纳入产地差异分析]的峰
0.783～0.969，表明15批样品的相似度良好，化学成分具
面积进行聚类分析，采用组间连接法，以余弦距离为度
有一致性。
量标准进行聚类，当余弦距离大于15时，15批样品聚为
1
250 5 9
2 34 6 7 8 10 11 2类：S5～S8为一类，其他为一类（图3）。S5～S8来自湖
R
S15
200 S14 北省建始县和房县，其特征是11号峰显著，而其他批次
S13
S12 样品中该色谱峰较微弱，其中S3、S12～S15样品中均未
S11
150
电压/mV S10 检出该峰，故特征图谱在一定程度上反映了产地差异。
S9
S8
100
S7 余弦距离
S6
S5 0 5 10 15 20 25
50 S4 S3
S3
S2 S14
0 S1 S10
0 5 10 15 20 25 30 S1
时间/min S2
图1 15批光皮木瓜药材的HPLC图谱和对照指纹图谱 样品编号 S12
S9
（R） S11
S13
2.1.8 色谱峰的指认及相对保留时间和相对峰面积的 S15
S4
计算 S5
S7
在15批光皮木瓜药材的共有峰中选择11个峰作为 S8
特征峰，通过与混合对照品溶液图谱（图 2）中各峰的保 S6
图3 15批光皮木瓜药材的聚类分析树状图
留时间及紫外吸收光谱进行比对，共指认出4种成分，分
别是 1 号峰绿原酸、2 号峰芦丁、3 号峰金丝桃苷、8 号峰 2.1.10 光皮木瓜与皱皮木瓜的特征图谱比较
槲皮苷。其中2号峰的峰面积与保留时间适中，故以其 皱皮木瓜是光皮木瓜最常见的混淆品，二者为同科
为参照峰计算其他特征峰的相对保留时间和相对峰面 同属近缘种，故以皱皮木瓜药材（编号S16～S22）与光皮
积，结果见表2。 木瓜药材进行对比。按照“2.1.2”项下方法制备7批皱皮
木瓜的供试品溶液，再按照“2.1.1”项下色谱条件进样测
30 1
定，记录色谱图（图4）。对比光皮木瓜对照指纹图谱（R）
2
20
电压/mV 8 与皱皮木瓜的特征图谱发现，两种药材存在明显差异：7
10
批皱皮木瓜的 HPLC 图谱中也含有绿原酸色谱峰（1 号
3
0 峰），且极为显著，远高于光皮木瓜，同时还含有较弱的2
0 5 10 15 20 25 30 号峰（芦丁）以及 4 号峰；除了 S20 样品检出微弱的 3 号
时间/min
1：绿原酸；2：芦丁；3：金丝桃苷；8：槲皮苷。 峰（金丝桃苷），其他6批皱皮木瓜中均未检出3号峰；此
图2 混合对照品色谱图 外，7批皱皮木瓜均未检出5～11号峰。
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