Page 24 - 《中国药房》2024年1期

值分析。以目标蛋白与内参 β-actin 蛋白条带灰度值的 10 6 10 6
比值表示目标蛋白的表达量，以p-STAT3与STAT3蛋白 10 5 10 5
10 4 10 4
条带灰度值的比值表示STAT3的磷酸化水平，所有结果
均以对照组为标准作归一化处理。 IL-17A-PE 10 3 IL-17A-PE 10 3
10 2 10 2
2.7 统计学方法
10 1 10 1
采用 GraphPad Prism 8.0 软件对结果进行统计分析 10 0 10 0
0
5
2
1
4
0
10 10 10 10 10 10 10 6 10 10 10 10 10 10 10 6
1
3
2
3
4
5
和作图。数据均以x±s表示，多组间比较采用单因素方 CD4-FITC CD4-FITC
差分析，进一步的组间两两比较采用 Dunnett’s t 检验。 A.对照组 B.梓醇20 μg/mL组
10 6 10 6
检验水准α＝0.05。
10 5 10 5
3 结果 10 4 10 4
IL-17A-PE IL-17A-PE
3.1 体外Th17细胞分化模型的构建情况 10 3 10 3
与Th0组[（2.53±0.48）%，n＝3]比较，Th24组、Th48 10 2 10 2
组、Th72 组细胞中 Th17 细胞分化比例[分别为（4.51± 10 1 10 1
10 0 10 0
0.68）%、（9.86±0.56）%、（18.80±0.70）%，n＝3]均显著 10 10 10 10 10 10 10 6 10 10 10 10 10 10 10 6
5
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1
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4
CD4-FITC CD4-FITC
升高（P＜0.05），且具有一定的浓度依赖性趋势。结果 C.梓醇40 μg/mL组 D.梓醇80 μg/mL组
见图1。 图2 梓醇处理后细胞中 Th17 细胞分化比例检测的流
10 6 10 6 式细胞图
10 5 10 5
表2 各组细胞培养上清液中丙酮酸和乳酸水平测定结
10 4 10 4
IL-17A-PE 10 3 IL-17A-PE 10 3 果（x±s，n＝3）
10 2 10 2 组别 丙酮酸/（μmol/L） 乳酸/（mmol/L）
对照组 0.114±0.000 2.85±0.03
10 1 10 1 a a
梓醇20 μg/mL组 0.109±0.002 2.20±0.02
10 0 10 0 梓醇40 μg/mL组 0.105±0.001 a 1.55±0.05 a
2
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0
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10 10 10 10 10 10 10 6 10 10 10 10 10 10 10 6 a a
5
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3
4
CD4-FITC CD4-FITC 梓醇80 μg/mL组 0.099±0.001 0.82±0.02
A. Th0组 B. Th24组 a：与对照组比较，P＜0.05。
10 6 10 6
3.4 梓醇对细胞中PKM2、LDHA、RORγt mRNA表达
10 5 10 5
的影响
10 4 10 4
IL-17A-PE 10 3 IL-17A-PE 10 3 经处理72 h后，与对照组比较，梓醇20、40、80 μg/mL
10 2 10 2
组细胞中PKM2、LDHA、RORγt mRNA表达水平均显著
10 1 10 1
降低（P＜0.05），且具有一定的浓度依赖性趋势。结果
10 0 10 0
0
1
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5
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3
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1
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10 10 10 10 10 10 10 6 10 10 10 10 10 10 10 6 见表3。
5
3
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CD4-FITC CD4-FITC
C. Th48组 D. Th72组 表3 各组细胞中 PKM2、LDHA、RORγt mRNA 表达
图1 体外诱导后细胞中 Th17 细胞分化比例检测的流 水平检测结果（x±s，n＝3）
式细胞图 组别 PKM2 mRNA LDHA mRNA RORγt mRNA
对照组 1.01±0.04 1.02±0.04 1.03±0.06
3.2 梓醇对Th17细胞分化的影响
梓醇20 μg/mL组 0.75±0.03 a 0.76±0.01 a 0.75±0.02 a
经处理72 h后，与对照组[（16.70±1.41）%，n＝3]比 梓醇40 μg/mL组 0.65±0.02 a 0.66±0.03 a 0.60±0.01 a
梓醇80 μg/mL组 0.52±0.02 a 0.54±0.01 a 0.51±0.08 a
较，梓醇 20、40、80 μg/mL 组细胞中 Th17 细胞分化比例
a：与对照组比较，P＜0.05。
[ （9.96±1.33）%、（8.29±1.07）%、（7.46±1.31）%，n＝3]
均显著降低（P＜0.05），且具有一定的浓度依赖性趋势。 3.5 梓醇对细胞中 PKM2、LDHA、p-STAT3 和 STAT3
结果见图2。 蛋白表达的影响
3.3 梓醇对细胞培养上清液中丙酮酸、乳酸的影响 经处理72 h后，与对照组比较，梓醇20、40、80 μg/mL
经处理72 h后，与对照组比较，梓醇20、40、80 μg/mL 组细胞中 PKM2、LDHA 蛋白表达水平及 STAT3 磷酸化
组细胞培养上清液中丙酮酸、乳酸水平均显著降低（P＜ 水平均显著降低（P＜0.05），且具有一定的浓度依赖性
0.05），且具有一定的浓度依赖性趋势。结果见表2。 趋势。结果见图3、表4。
· 18 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 1 中国药房 2024年第35卷第1期