Page 42 - 《中国药房》2023年23期

表6 各组小鼠肝脏组织中炎症因子 mRNA 表达水平 lleibacterium
norank_f_Muribaculaceae Firmicutes
的检测结果（x±s） Lactobacillus Bacteroidetes
Allobaculum Deferribacteres
组别 n IL-6 mRNA IL-1β mRNA TNF-α mRNA Lachnospiraceae_NK4A136_group Actinobacteria
Romboutsia Proteobacteria
NFD组 8 1.00±0.55 1.00±0.14 1.00±0.48 Mucispirillum Epsilonbacteraeota
Verrucomicrobia
HFD组 8 1.30±0.60 1.16±0.30 5.35±0.56 a Faecalibaculum Patescibacteria
Bifidobacterium
ISL组 10 0.90±0.10 0.69±0.10 3.92±0.38 b Turicibacter
unclassified_f_Lachnospiraceae
a：与NFD组比较，P＜0.05；b：与HFD组比较，P＜0.05。 norank_f_Lachnospiraceae
Dubosiella
norank_f_Desulfovibrionaceae
如图 3 所示，各组样本聚集度均较好，但 HFD 组与 NFD Helicobacter
Lachnoclostridium
组差异较大，HFD 组和 ISL 组之间也有明显距离，说明 Desulfovibrio
Alloprevotella
各组样本间差异明显。在3组小鼠肠道中，Firmicutes门 unclassified_f_Prevotellaceae
Ruminococcaceae_UCG-014
Prevotellaceae_UCG-001
和Bacteroidetes门占主导地位。与NFD组比较，HFD组 Odoribacter
unclassified_f_Erysipelotrichaceae
小鼠的 Firmicutes/Bacteroidetes 值显著升高；与 HFD 组 Blautia
norank_f_Erysipelotrichaceae
比较，ISL 组小鼠的 Firmicutes/Bacteroidetes 值显著降低 [Ruminococcus]_torques_group
Akkermansia
（P＜0.05），结果见图 4。图 5 展示了小鼠肠道菌群种属 Bacteroides
Ruminiclostridium_9
Alistipes
中总丰度排名前50的菌属，其中异甘草素可部分逆转因 Oscillibacter
Parabacteroides
NAFLD改变的属水平肠道菌群丰度。 Ruminococcaceae_UCG-004
[Eubacterium]_coprostanoligenes_group
norank_f_Ruminococcaceae
R＝0.588 5，P＝0.001 0 A2
20 NFD组 unclassified_p_Firmicutes
15 HFD组
10 Candidatus_Saccharimonas
5 0 ISL组 Coriobacteriaceae_UCG-002 1×10 4
Lachnospiraceae_UCG-006
（ 10.52% ） －10 [Eubacterium]_xylanophilum_group 1×10 3 2
－5
Ruminococcaceae_UCG-013
Enterorhabdus
PC2 －15 Roseburia 1×10
10
－20
Ruminiclostridium
－25 norank_f_Rs-E47_termite_group 1
－30 Parasutterella
－35 Rikenella 1×10 －1
－40 unclassified_f_Ruminococcaceae
norank_f_F082
－30 －20 －10 0 10 20
PC1（17.13%） 图5 各组小鼠肠道菌群属水平群落的热图
A.主成分分析
R＝0.852 7，P＝0.001 0
NFD组 的菌属结果，筛选出异甘草素可显著影响的10个代表性
0.4 HFD组
ISL组 菌属，其中可显著上调NAFLD小鼠肠道中益生菌norank_
（ 13.77% ） 0.2 f_Muribaculaceae、Odoribacter、Ruminiclostridium、Ak‐
kermansia 的相对丰度，显著下调有害菌 Desulfovibrio、
PC2 0
norank_f_Lachnospiraceae、unclassified_p_Firmicutes、
－0.2 Ileibacterium、unclassified_f_Lachnospiraceae、Turici‐
－0.4 －0.2 0 0.2 0.4 bacter的相对丰度（P＜0.05）。结果见图6。
PC1（42.14%）
B.主坐标分析 3.7 小鼠各项指标与肠道菌群丰度的相关性分析结果
图3 小鼠肠道菌群的β多样性分析 基于上述10个代表性菌属发现，有4个菌属与小鼠
1 Firmicutes 30 NAFLD 指标呈负相关，6 个菌属呈正相关，其中相关性
Bacteroidetes 25 a 较大的菌属包括norank_f_Muribaculaceae，Odoribacter，
门水平的群落丰度占比 0.6 Epsilonbacteraeota Firmicutes/Bacteroidetes值 15 4 b Akkermansia， Ileibacterium， unclassified_p_Firmicutes
Proteobacteria
0.8
20
Actinobacteria
Deferribacteres
10
others
0.4
等，结果见图7。
0.2
0 2 0 3.8 异甘草素对NAFLD小鼠肠黏膜屏障功能的影响
NFD组 HFD组 ISL组 NFD组 HFD组 ISL组 结肠组织病理染色结果显示，NFD组小鼠肠道绒毛
A. 小鼠肠道群落组成的Bar图 B. 各组小鼠Firmicutes/
Bacteroidetes值测定结果 较为完整，未出现病理改变；与 NFD 组比较，HFD 组小
a：与NFD组比较，P＜0.05；b：与HFD组比较，P＜0.05。 鼠肠道绒毛完整性受损，出现少量炎症细胞浸润，Clau‐
图4 各组小鼠肠道菌群门水平群落组成
din-4、Occludin、ZO-1 蛋白表达水平均显著降低（P＜
采用 LEfSe 分析检测丰度差异显著的特征，寻找显 0.05）；与HFD组比较，ISL组小鼠肠道有明显改善，上述
著差异的种属，结合小鼠肠道菌群种属总丰度排名前50 指标水平均显著升高（P＜0.05）。结果见图8、图9、表7。
· 2852 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 23 中国药房 2023年第34卷第23期